简介：目的：筛选出对孢子丝菌结合效率相对较高的探针。方法以50株纯培养的孢子丝菌及标准株为样本，以毛霉、烟曲霉、念珠菌各1株为阴性对照，用聚合酶链反应-酶联免疫法（PCR-ELISA）对已报道的5个孢子丝菌特异性探针（U26852、U26866、U26866′、M85053及AF117945）进行筛选。记录各探针与合成DNA片段杂交底物显色与否及酶免疫测定指数（EI）值。结果PCR产物测序证实5个探针均位于产物序列上；在相同的ELISA条件下，探针U26852显色最强，EI值最高。结论针对28SrRNA的探针U26852是目前与孢子丝菌结合效率相对较高的探针。

简介：目的合成异核苷掺入寡核苷酸并考察它们与互补序列的结合能力.方法采用DNA固相合成仪合成寡核苷酸,通过热变性实验考察双链的稳定性.结果合成了四条单异核苷掺入的寡核苷酸,热变性实验结果发现异核苷的引入降低了双链的稳定性,当异核苷处于寡核苷酸链的中央时,这种影响更为明显.异核苷6′-OH处于游离和烯丙基保护状态时的结果没有显著差异.结论寡核苷酸中的异核苷使链发生扭曲,从而导致双链稳定性降低.

简介：摘要目的LCR与PCR在检测解脲支原体（UU）泌尿生殖感染中的临床意义与差别，方法用LCR法与PCR法对232份临床病历进行检测UU，其中201份来源于男性尿道拭子和女性宫颈拭子，对两种检测方法的检测结果进行了分析。结果LCR检测法检测232份标本，UU阳性率为29%（69/232），PCR法检测232份标本，阳性率为23%（55/232）。LCR与PCR检测有明显差异（P〈0.05〉，结论LCR用于临床男性尿道拭子和女性宫颈拭子在诊断泌尿生殖感染中有极其重要意义。

简介：目的获得东方田鼠的特异DNA序列.方法Aβ基因使用PCR,基因克隆,斑点杂交,DNA序列分析,生物信息学技术.结果根据小鼠MHCⅡ外显子2及其两侧序列,合成引物并扩增东方田鼠基因组DNA,将PCR产物回收、测序后,分别设计内引物扩增东方田鼠基因组DNA,其中一对引物可得到特异性扩增带,将得到的DNA片段插入PGEM-Teasy载体,进行序列分析.用这对引物扩增人、昆明小鼠、BALB/c小鼠及C57BL/6J小鼠基因组DNA,均无扩增产物.以东方田鼠特异性扩增产物为探针进行斑点杂交,除东方田鼠基因组DNA外,其他几种动物基因组DNA均为阴性结果.进一步对该DNA片段进行了BLAST同源性搜索和外显子预测,在Genbank中没有发现高度同源序列,并且找到一个可能的外显子,该外显子由69个氨基酸组成.结论获得的DNA片段为东方田鼠的特异片段,这将为从分子水平深入研究东方田鼠的遗传背景、生物进化规律以及东方田鼠抗日本血吸虫的机理奠定基础.

简介：摘要目的对聚合酶链反应（FQ-PCR）检测乙型肝炎病毒进行分析，了解其临床应用价值。方法用中山医科大学达安基因诊断中心设计的HBV-FQ-PCR试剂盒对101份临床血清标本同时进行PCR荧光定量和ELISA肝炎标志物检测，对检测结果进行分析。结果经过FQ-PCR检测，24份HbsAgHbeAgHbcAb都阳性的标本，其血清HBV-DNA也全部阳性，HBV-DNA拷贝数范围在1.4×105-7.0×109/ml之间；32份HbsAgHbeAbHbcAb都阳性的标本，阳性率为46.9%，HBV-DNA拷贝数范围在0-8.1×107/ml之间；14份HbsAb阳性的标本，阳性率为7.1%，HBV-DNA拷贝数范围在0-5.0×104/ml之间；18份全阴性的标本，阳性率为5.6%,HBV-DNA拷贝数范围在0-4.9×105/ml之间。结论FQ-PCR定量检测HBV-DNA灵敏度，特异性较高，能基本反映乙肝病毒在体内的真实复制情况，具有较高的临床应用价值。

简介：目的建立食品中沙门菌聚合酶链反应（PCR）的快速检测方法。方法根据沙门菌invA基因序列设计引物；氯化镁孔雀绿选择性增菌0到8h后，煮沸法提取DNA，用PCR扩增电泳。结果PCR法能特异性检测出食品中的沙门菌，扩增片段为389bp，增菌前的检出限为10^2CFU／g，增菌后为2CFU／25g。结论应用PCR检测沙门菌具有快速、特异、灵敏和简便的特点。

简介：摘要聚合酶链反应(PCR)是一种在试管进行的简便而快速的特异性DNA体外扩增技术，其基本原理与细胞内DNA复制的相似，但反应体系相对比较简单。主要应用于传统培养方法不能及时准确检出或敏感性太低或培养时间长的病原体的检测。PCR扩增能力极强、灵敏性极高，微量的样品污染便有可能导致假阳性结果的出现，为此，在实验操作中应谨防污染的发生，并设置严格的对照，以提高PCR结果的正确性。

简介：在本文中主要针对医学检验中聚合酶链反应的应用和进展做出了深入的探讨与分析，聚合酶链技术具有精准度高、操作方便等特点，在医学检验领域中得到广泛应用，文中主要从医学检验的不同的领域研究聚合酶链反应的具体应用，并且提出聚合酶链反应在医学检验中的具体要求，以此来进一步对医学检验中聚合酶链反应的应用进行优化，推动本次研究发展的同时，为相关工作人员提供良好的参考依据。

简介：目的研究聚合酶链反应分析急性视网膜坏死综合征眼内液病毒DNA的临床价值.方法聚合酶链反应检测28例37个眼内液标本疱疹病毒DNA,分析检测结果、影响因素及最终诊断.结果发现水痘-带状疱疹病毒DNA15例,单纯疱疹病毒1型DNA3例.适宜检测时间为炎症活动期,不用或短期使用抗病毒药.前房水和玻璃体均可取得可靠结果.结论聚合酶链反应检测眼内液病毒DNA,方法简便,尤其有助于疑难病例的诊断.

简介：摘要聚合酶链反应技术操作简便且灵敏程度较高，具有良好的特异性，是研究、检测以及鉴定标本中DNA片段的一种重要方式，在医学检验中具有较好的应用价值。本文就聚合酶链反应技术在医学检验中的实际应用情况进行分析，并对其未来发展进行展望，仅供相关人员参考。

简介：目的用合成仪自动地合成60mer寡核苷酸SARS冠状病毒的探针来制作寡核苷酸基因芯片。方法根据寡核苷酸探针的制作要求，选取SARS冠状病毒的特异序列30条、长度为60mer的片段进行合成，并对合成后的纯化方法与条件进行探索。将经12％变性PAGE胶纯化后的探针直接点样制备成12×12阵列的寡核苷酸的基因芯片，初步与处理后的临床样品进行杂交。结果经PAGE纯化的寡核苷酸探针的纯度高，能满足寡核苷酸芯片制备的要求。临床SARS患者标本进行处理后与寡核苷酸芯片杂交、扫描检测，效果较好。结论本室合成的60mer的寡核苷酸SARS冠状病毒探针能用于基因芯片的制备与检测，这为该疾病的实验室诊断提供了一种快速、平行的检测方法。

简介：人类巨细胞病毒(HCMV)在成年人群中感染很普遍，且随年龄增长，感染率明显增高。但多数呈不显性感染或潜伏感染，损伤机体的免疫功能。HCMV的先天性感染或围产期感染常常危害胎儿和新生儿，因此早期准确诊断HCMV感染对指导防治，促进优生优育工作有重要的意义。笔者采用聚合酶链反应(PCR)技术检测HCMV，现报告如下。

简介：肺炎支原体（ＭＰ）是人类呼吸道感染的重要病原体。本文用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术自１９９６年１月—１９９８年１月检测呼吸道感染的住院和门诊患儿５９１例，其中肺炎支原体ＤＮＡ阳性确诊肺炎支原体感染６６例，现报告如下。１对象与方法１．１对象５９１例呼吸道...

简介：为探讨阜阳地区庚型肝炎病毒感染的现状，采用逆转录-Nested-聚合酶链反应技术检测HGVRNA。结果在献血员和各类患者中HGVRNA检出率分别是：献血员8.8%，血透患者15.4%，慢性乙型肝炎6.5%，慢性丙型肝炎17.8%，非A-E型肝炎14.2%，提示：HGV感染多为无症状携带者或亚临床型，常与HCV重叠感染并与输血密切相关。

简介：

简介：研究寡核苷酸芯片的重复性与间隔臂(spacer)和探针长度之间的相关性.设计12条不同长度的带有不同spacer的探针,与749bp荧光标记靶序列杂交.扫描分析三次杂交结果,用Quantarray定量分析软件进行分析.随探针长度的延长,杂交信号的变异系数逐步降低.15mer的探针杂交的信号较弱,杂交不够稳定,重复性也相对较差.20mer、25mer、30mer的探针的变异系数逐渐降低.spacer为15时变异系数最小.说明选择spacer为poly(dT)15的25mer和30mer的探针可以获得较好的重复性.

简介：摘要目的探讨真菌游离DNA(cfDNA)聚合酶链反应(PCR)诊断侵袭性真菌感染的临床价值。方法本研究为前瞻性研究，选取2017年1月至2021年1月宁德市蕉城区医院检验科收治的120例真菌感染患者，男81例，女39例，年龄(52.33±2.69)岁，年龄范围为35~79岁。根据《侵袭性真菌感染诊断标准》将所有患者分为非侵袭性真菌感染组(n＝39)和侵袭性真菌感染组(n＝81)，比较两组患者的半乳甘露聚糖(GM)和cfDNA含量，并对GM和cfDNA的诊断效能进行分析。结果侵袭性真菌感染组患者的GM含量[(0.74±0.37)OD]高于非侵袭性真菌感染组[(0.21±0.05)OD]，差异有统计学意义(P<0.001)。侵袭性真菌感染组患者的cfDNA含量[(9 526.33±511.33)GE/ml]高于非侵袭性真菌感染组[(8 014.65±501.45)GE/ml]，差异有统计学意义(P<0.001)。cfDNA诊断的灵敏度(98.77%)显著高于GM诊断(86.42%)。结论真菌cfDNA PCR诊断侵袭性真菌感染的灵敏度较高，具有推广价值。

简介：目的探索一种快速、经济、敏感的方法用来诊断泌尿生殖道中淋病奈瑟氏球菌(N．gonorrrhoeae，简称NC)。方法用微孔渗漏法与聚合酶链反应(PCR)联合检测检泌尿生殖道中淋病奈瑟氏球菌。结果对186例临床标本进行检测，微孔渗漏法阳性为67．2％(125例)，聚合酶链反应阳性为81．2％(151例)，培养法阳性为66．1％(123例)，且微孔渗漏法不需要特殊仪器，测定时间短，工作量小，灵敏度高。它与培养法二者无显著性差别(P>0．05)。PCR与培养法二者阳性率有显著性差别(P<0．01)。结论因此微孔渗漏法与聚合酶链反应联合检测NG具有简便、快速、检出率高的优点。

简介：目的:评价普通聚合酶链式反应(C-PCR)和荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒核酸(HBVDNA)的临床应用价值.方法:用C-PCR和FQ-PCR分别检测249例乙型肝炎患者和51例健康体检者血清HBVDVA.乙型肝炎血清学标志物用ELISA测定.结果:用C-PCR和FQ-PCR检测HBVDVA阳性率分别为:HBeAg(+)组80.50%和100.00%(P<0.01);抗HBe(+)组17.39%和82.60%(P<0.01);HBeAg(-)抗HBe(-)组14.51%和40.32%(P<0.01).健康体检者两法均为阴性.结论:FQ-PCR对乙型肝炎诊断、传染性的判断和抗病毒药物疗效评价方面比C-PCR更具有临床应用价值.

简介：PCR（PolymerasChainReafion）即聚合酶链反应，于1985年就有报道，是一种模拟特异天然DNA复制过程的核酸扩增法。以DNA为模拟的特异靶序列，在引物介导下酶促扩增，可以从极少量基因组DNA合成百万拷贝数的某DNA片段。我们应用PCR测试法，对肝病患者及体检的青年工人血清中的乙肝病毒DNA进行有关血清分析及临床研究，获得了可靠数据和临床效果。