简介:摘要目的探讨小檗碱对小鼠代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)致肝细胞程序性坏死的影响及其相关分子机制。方法20只雄性C57BL/6N小鼠随机分为4组(每组n = 5):对照(S)组、脂肪肝(H)组、小檗碱(B)组、核因子-E2相关因子(Nrf2)抑制剂全反式维甲酸组(ATRA,A组)。12周末检测各组血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)浓度,计算肝指数(肝质量/体质量比值);进行肝组织HE、Masson和油红O染色,采用SAF评分评价肝损伤程度;Western blot法检测肝组织程序性坏死相关蛋白,即受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)、磷酸化混合系列蛋白酶样结构域(p-MLKL)及Nrf2表达水平。组间均数比较采用单因素方差分析,组间多重比较采用LSD-t检验。结果与S组相比,H组血清ALT、AST、LDH、TG、TC、TNF-α、IL-1β水平及肝指数显著升高;肝组织充满空泡样改变及炎性细胞浸润,油红O染色可见大量红色脂滴,Masson染色可见胶原纤维增生明显,SAF评分(6.60±0.55与0.80±0.45)显著增高。RIPK3及p-MLKL表达上调,Nrf2水平相对增加,差异均有统计学意义(P < 0.05)。与H组相比,小檗碱干预可明显降低小鼠肝脏生化指标与血脂指标水平、促炎介质表达、肝指数及SAF评分,RIPK3和p-MLKL也表达下调,而Nrf2水平进一步增加,差异均有统计学意义(P < 0.05)。与B组相比,给予Nrf2抑制剂处理可拮抗小檗碱对脂肪肝的保护效应,血清ALT、AST、LDH、TG、TC、TNF-α、IL-1β水平及肝指数显著升高,SAF评分升高,RIPK3和p-MLKL表达相对增加,差异均有统计学意义(P < 0.05)。结论小檗碱可明显改善小鼠代谢相关脂肪性肝病损伤,其机制与激活Nrf2、抑制肝细胞程序性坏死有关。
简介:目的:探讨己酮可可碱(PTX)对香烟提取物激活原代培养大鼠肺泡巨噬细胞IP-10表达的作用。方法:肺泡灌洗法收集Wistar大鼠肺泡巨噬细胞,贴壁纯化培养,制备香烟烟雾提取物(CSE),分别以1mol/L、10mol/L、100mol/L和1000mol/LPTX加入含5%CSE的培养体系中,干预24小时后ELISA法检测上清中IP-10含量。RT—PCR.法检测细胞IP-10mRNA表达。结果:1、10、100和1000mol/LPTX干预后,培养上清中IP-10的含量分别为15.82±0.43pg/ml、12.41±0.36pg/ml、7.92±0.67pg/ml、5.13±O.31pg/ml,IP-10mR.NA的表达强度分别为0.241±0.056、0.432±0.034、0.854±0.094、0.772±0.055。结论:PTX干预能剂量依赖性地抑制香烟烟雾诱导的大鼠肺泡巨噬细胞IP-10表达,该作用可能是PTX拮抗肺内炎症激活和抑制慢性吸烟肺气肿形成的机制之-。