简介:摘要目的为血吸虫病预防和控制中制造抗原、研究血吸虫病致病机理和相关药物研发创造良好的基础,研究取得较高生物活性的日本血吸虫卵的分离方法与活性鉴定措施。方法将被血吸虫感染的肝脏组织悬液进行分级过滤,然后将滤液离心,去除碎片,再以325目分样筛过滤分离的虫卵,收集筛上的虫卵,将收集到的虫卵以密度为1.070的Percoll分离液进行梯度离心,吸取Percoll液下层的纯化虫卵,用显微镜观察其纯度,用丫啶橙染色检查分离虫卵的死活,用环卵沉淀试验检查分离虫卵的分泌活性。结果每块肝脏均能获得0.6克左右的虫卵,且分离出的虫卵纯度较高,环卵沉淀试验结果和丫啶橙染色结果均显示分离出的活虫卵比例较高、生物活性较好。结论该日本血吸虫卵分离法用时较短,操作简且效果较好,所分离出的虫卵完全能够满足研究需要。
简介:目的:为了制备足量、高纯度的供血吸虫保护性免疫力研究的多价分子疫苗。方法:通过制备型SDS-PAGE和电渗析方法从日本血吸虫成虫分离纯化出28kD、31/32kD及97kD蛋白。并检测其蛋白含量,蛋白纯度和分子量及其抗原活性。结果:此三种纯化蛋白经SDS-PAGE检测均为单一条带并与所分离的蛋白分子量相符;其蛋白含量分别为0.35mg/ml、0.4mg/ml和0.3mg/ml;Westem-blot均为单一反应区带;ELISA反应滴度分别为1:640、1:1280和1:320。结论:所制备的日本血吸虫成虫28kD、31/32kD及97kD蛋白多价分子疫苗,具有纯度高、制备快、回收率高等优点,而且不影响所纯化的抗原活性。
简介:摘要目的高通量测序分析日本血吸虫童虫的微小RNA(microRNA,miRNA),鉴定已知miRNA的表达水平,预测分析miRNA靶基因及其生物学功能。方法体外制备日本血吸虫童虫,提取童虫的总RNA构建文库进行Illumina高通量测序。采用DEGseq R语言包,结合perl脚本进行miRNA表达量的差异分析;分别利用miRanda、Blast软件和KEGG数据库对差异miRNA进行靶基因及其生物学功能预测。结果构建文库中,日本血吸虫童虫表达的miRNAs与最新miRBase数据库比对结果显示,共有38 483条匹配序列,鉴定到已知miRNA 60个;其中,sja-miR-125b表达量最高,其次为sja-miR-61、sja-miR-71a、sja-miR-36-3p和sja-miR-10-5p,上述5种miRNA表达量占总miRNA的91%(3 263/3 585)。共预测到靶基因7 176个,基因功能集中在核苷酸转移酶活性、细胞氮复合代谢、分子功能、生物学过程、生物合成、等离子体膜及蛋白质成熟;功能富集分析显示,高表达的miRNA主要参与致病过程、生物进展及多条代谢途径通路。结论日本血吸虫童虫显著表达的miRNA参与了血吸虫分化、生长发育和致病过程中的代谢途径调节,为研究血吸虫发育调控机制及新药物开发奠定了基础。
简介:为了在湖沼型血吸虫病重度流行区观察青蒿琥酯预防日本血吸虫感染的效果和优化服药方案,1996年4~11月,选择安徽省贵池市唐田乡2个村为试点,选择6~65岁村民随机配对分为青蒿琥酯组和对照组。在服青蒿琥酯前20天,先服单剂吡喹酮50mg/kg。于5月下旬口服第1剂青蒿琥酯6mg/kg,以后每半个月重复给药1次,共服10次,对照组口服相同剂型的安慰剂(淀粉),在停药后4周以粪检评价效果。结果显示,口服青蒿琥酯323人的粪检血吸虫卵阳性率为0.31%,无血吸虫急性感染发生,对照组323人的粪检血吸虫卵阳性率为9.60%,平均克粪便虫卵数(EPG)为4.00±3.50,出现急性血吸虫感染1例。用药前后对肝、肾功能、网织红细胞和心电图检查未见明显变化。结果表明在感染季节每半个月口服青蒿琥酯1次,对湖沼型重度血吸虫病流行区人群有较好的预防作用。
简介:目的观察不同宿主粪便中日本血吸虫虫卵存活时间.方法采集日本血吸虫虫卵阳性居民、水牛、猪、兔子和鼠等不同宿主粪便,观察不同宿主粪便中虫卵的孵化率,以及不同温度和不同时间内虫卵的存活情况.结果来自猪、鼠、人、兔和水牛新鲜粪便中血吸虫虫卵的孵化率分别为78.9%、53.7%、41.7%、28.9%和22.1%.在37℃、30℃、20℃和4℃温度下不同时段粪便中虫卵存活率差异很大,其中干燥和样本粪便的大小是影响虫卵存活的重要因素.水牛和猪粪便中虫卵存活率高,随着温度的降低存活率逐渐增加.结论不同宿主粪便中虫卵的孵化率,以及不同温度和不同时间内虫卵的存活情况存在显著性差异.