简介：目的研究生孢梭菌代谢产物对ICR小鼠的毒性作用。方法将分离自浓缩乳清蛋白粉及其制品样品中的生孢梭菌分别培养在庖肉肉汤及TPGY肉汤培养基中,将过滤除菌及处理后的培养液分别经灌胃和腹腔注射给予ICR小鼠,观察其中毒及死亡情况。结果生孢梭菌培养液及处理后的培养液经腹腔注射ICR小鼠后均对其有毒性作用,中毒症状表现为小鼠急促呼吸后猝死,死亡时间多集中在10min内,平均为5~7min,A-F多价抗肉毒毒素诊断血清对小鼠无保护作用。结论生孢梭菌代谢产物中含有不同于肉毒毒素的有毒代谢产物,腹腔注射可导致ICR小鼠猝死。

简介：目的建立-种灵敏、可靠、快速对水中大肠埃希菌富集和DNA提取的最佳方法组合，以便应用TaqMan探针实时荧光PCR技术进行定量检测。方法膜过滤洗脱环节，采用3种不同的方法进行富集洗脱，通过平板计数法比较各方法富集洗脱效果；DNA提取环节，采用4种方法进行DNA提取。所得DNA进行实时荧光PCR扩增，定量检测DNA拷贝数，比较各方法的DNA提取效率；并采用最优的方法组合，对模拟水样进行膜过滤和DNA提取，考察全过程的回收率和灵敏度。结果采用加表皮葡萄球菌过滤＋漩涡混合器＋玻璃棒刮擦洗脱方法（C法），洗脱效率能达到75％-93％；TritonX-100法和磁珠法的线性范围达到6个数量级稀释度（10^0-10^-5），r2分别为0．998和0．999，然而，TritonX—100法更省时，更简便，经济性更好。采用该最优的方法组合，其全过程的回收率为79．7％～104．0％且灵敏度达到1cfu／ml。结论c法＋Triton-100法组合可以快速、准确、经济地对饮用水中大肠埃希菌进行富集和DNA提取。

简介：目的了解我国食品中分离的110株大肠埃希菌O157的耐药及脉冲场凝胶电泳（PFGE）分子分型特征,完善我国食品中大肠埃希菌O157菌株特征的基础信息,为该菌的风险评估提供依据。方法使用琼脂稀释法对确认的110株大肠埃希菌O157进行药敏试验,完成耐药特征的分析。参照美国疾病预防控制中心PulseNet试验方法,对110株大肠埃希菌O157,运用XbaⅠ酶进行酶切并完成PFGE分析,利用BioNumerics软件对分离株的指纹图谱进行聚类分析。结果1110株菌中,43株菌至少对一种抗生素有抗性。耐药率最多的前三种抗生素依次是四环素（30.0%,33/110）,磺胺甲恶唑（29.1%,32/110）,萘啶酸（26.4%,29/110）;2一共有24个耐药谱,耐两种以上抗生素的菌株有34株,耐3种以上抗生素的多重耐药菌株有32株。最常见的三种耐药谱依次是SMX（6）,AMP-NAL-SMX-SXT-TET（6）,AMP-CHL-NAL-SMX-SXT-TET（4）/AMP-SMX-SXT-TET（4）/TET（4）;3大肠埃希菌O157非H7（O157∶hund）对所测试的抗生素的耐药率明显高于大肠埃希菌O157∶H7（χ2=72.010P〈0.05）。其中37株携带了志贺毒素基因的大肠埃希菌O157∶H7仅对磺胺甲恶唑（2.7%,1/37）、萘碇酸（2.7%,1/37）有耐药,没有多重耐药菌株;4通过不同种类食品中大肠埃希菌O157菌株耐药率比较发现,从生猪肉、生禽肉中分离的菌株耐药率相对高于其他食品种类;5PFGE分子分型研究显示菌株具有基因多态性,且可以很好将大肠埃希菌O157非H7和大肠埃希菌O157∶H7菌株区分开。结论我国食品中分离的大肠埃希菌O157耐药现象严重。我们应加强养殖环节和零售环节食源性致病菌,特别是大肠埃希菌O157（包括产志贺毒素大肠埃希菌O157）菌株药敏特征的监测,探明食品与养殖环节菌株耐药的传播关系,并为国家制定科学的养殖业抗生素用药提供依据。