简介：目的建立水产品中溶藻弧菌的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)的快速鉴定方法。方法以溶藻弧菌标准菌株(CICC10889)为研究对象,采集不同样品处理方法(直接涂抹法和甲酸提取法)、激光强度和菌株传代次数的MALDI-TOFMS图谱并加以分析比较,探讨上述因素对方法准确性的影响。将溶藻弧菌标准菌株(CICC10889)的MALDI-TOFMS图谱主产物(MSP)添加到数据库中,使用36株分离菌株及8株与溶藻弧菌近缘的弧菌标准菌株验证数据库的补充对鉴定结果可信度的影响。结果甲酸提取法处理所得图谱特征峰多、基线平滑、信噪比高,图谱质量优于直接涂抹法;激光强度对MALDI-TOFMS图谱有影响,过高或过低均会导致图谱质量的下降;标准菌株补充数据库后可提高鉴定可信度,分离株的鉴定分值均达到2.300以上;传代次数对鉴定结果没有影响。结论MALDI-TOFMS方法可将溶藻弧菌准确鉴定到种水平。该方法准确、可靠,可用于溶藻弧菌的快速鉴定。

简介：摘要目的基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术（MALDI-TOF MS）技术建立一种无需抗体富集直接检测血清M蛋白的方法，并评估其检测效能。方法方法学建立。收集在首都医科大学附属北京朝阳医院申请M蛋白鉴定检测的患者检验后剩余血清标本712份。用TCEP还原剂处理IgG、IgA纯品获得免疫球蛋白轻链，初步确定检测方法。收集20名健康体检人群检验后剩余血清标本，确定κ和λ轻链离子峰质荷比范围。设置8个平行管和8个批次进行批内和批间重复性评价；选取23例M蛋白阳性标本进行10倍、100倍和200倍稀释，采用所建MALDI-TOF MS方法检测M蛋白，评价灵敏度；采用IFE、SPE和MALDI-TOF MS 3种方法同时检测M蛋白，计算MALDI-TOF MS方法与IFE和SPE的符合率。结果批内和批间重复性均为100%；对23份M蛋白阳性标本的原倍、10倍、100倍和200倍稀释标本进行测定，MALDI-TOF MS对M蛋白的检测限为0.06~0.18 g/L；在712份标本中，以IFE为金标准，SPE与MALDI-TOF MS总的符合率分别为85.9%和92.3%，SPE与MALDI-TOF MS的阳性符合率分别为72.8%和99.7%；在M蛋白的不同型别中，MALDI-TOF-MS在IgA、IgD、IgM、游离轻链型和双克隆组中对M蛋白的检出率为100%，而SPE对IgM、IgA和游离轻链型标本的检出率分别只有66.7%、58%和19.5%；IgG组有1份阳性标本MALDI-TOF MS未检出。对23份M蛋白阳性标本进行原倍、10倍、100倍和200倍稀释后，10倍稀释时MALDI-TOF MS的检出率为100%，IFE为96%；100倍和200倍稀释时，IFE的检出率分别为MALDI-TOF MS的28%和23%。结论本研究成功建立了血清M蛋白的MALDI-TOF MS检测方法，该法检测通量高、速度快，具有良好的灵敏度、特异性和符合率。

简介：基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术是一种可用于检测大分子物质的“软电离”质谱分析技术，近年来在致病性真菌研究中的作用日显突出，该文对近几年该技术在病原真菌研究中的应用进展作一综述。

简介：目的研究基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（Matrix—AssistedLaserDesorptionIonization—TimeofFlightMassSpectrometry，MALDI—TOF—MS）用于快速检测鉴定临床分离的酵母菌的可行性。方法应用BrukerMALDI—TOF—MS和VITEK2-compact系统分别鉴定150株临床分离的酵母菌，结果不一致的菌株通过基因序列测定来鉴定。结果MALDI—TOF—MS快速准确鉴定出了150株临床酵母菌，鉴定符合率在属水平上为100％，种水平上为94％。结论基于MALDI—TOF—MS鉴定方法具有很好的可重复性和准确性，并且其检测成本较低，实验准备时间很短，MALDI—TOF—MS可以用于临床分离的酵母菌的快速鉴定。

简介：摘要：基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）近年来凭借其快速、准确、灵敏、高通量、低成本等优势，逐渐成为了体外诊断领域最富生命力的新技术之一，尤其在结核病领域应用日益广泛。因此，本文参考国内外文献，针对MALDI-TOF-MS在非结核分枝杆菌鉴定、结核分枝杆菌耐药性和药敏试验、血清标记物筛选等尤为活跃领域的最新进展进行综述，旨在有助于其进一步推广，从而更好地服务于临床实践。

简介：

简介：摘要目的验证基于基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）技术的B组链球菌（Group B streptococcus，GBS）在线血清型预测模型的分型效能，为临床GBS菌血清型快速分型提供参考。方法选取2015至2018年全国多中心新生儿侵袭感染分离GBS菌237株，均已经应用血清凝集试验结合PCR法确认血清型和多重PCR法多位点序列分型（MLST），包括Ⅰa型18株、Ⅰb型70株、Ⅲ型140株、Ⅴ型8株、Ⅵ型1株。运用乙醇灭活-甲酸（乙腈）提取法提取蛋白，用微生物质谱仪采集蛋白指纹图谱，将图谱以m/z和峰强度数据格式输入GBSTyper，以传统血清凝集法血清型为金标准，采用召回率、精确率、F值（精确率和召回率的调和平均值）来评价GBSTyper分型效果。结果GBSTyper对120株（50.63%）GBS菌血清型分型正确，各血清型召回率从高到低依次为Ⅲ型（71.43%）、Ⅴ型（37.50%）、Ⅰb型（21.43%）、Ⅰa型（11.11%），Ⅲ型精确率最高（86.96%），血清型分型精确率仅为3.57%~46.88%，Ⅲ型F值最高（78.43%），Ⅰa、Ⅰb、Ⅴ型等F值仅为6.52%~29.41%。结论GBSTyper血清型快速分型模型对Ⅲ型血清型菌株分型有效性较高，而对Ⅰa、Ⅰb、Ⅴ型分型有效性很低。该模型能快速识别高危Ⅲ型GBS，对于围产期新生儿GBS感染预防及患儿的临床管理有重要指导意义。

简介：摘要目的探寻与卵巢癌诊断相关的血清循环多肽标志物。方法以2018年3月至2018年9月中国医学科学院肿瘤医院妇瘤科收治的原发卵巢上皮癌患者54例(卵巢癌组)、同期在中国医学科学院肿瘤医院体检中心进行体检的健康女性40例(健康对照组)为研究对象。采用随机数字表法，将例卵巢癌患者和健康对照者各按1∶1随机分为训练集和验证集。采用基质辅助激光解吸离子飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)联合磁珠技术检测血清多肽峰，在训练集中筛选卵巢癌组与健康对照组间的差异多肽峰(评分>5)。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析，在训练集和验证集中，筛选曲线下面积(AUC)均≥0.8、诊断卵巢癌的灵敏度和特异度均>90%的差异多肽峰。采用液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/MS)技术鉴定差异多肽峰的成分。结果在质荷比1 000~10 000范围内，卵巢癌组和健康对照组之间有102个差异多肽峰。ROC曲线分析显示，在训练集和验证集中，AUC均≥0.8的差异多肽峰有42个，其中19个在卵巢癌组血清中高表达，23个低表达；诊断卵巢癌灵敏度与特异度均≥90%的卵巢癌血清高表达差异多肽峰有15个，质荷比分别为7 744.27、5 913.41、5 329.87、4 634.21、4 202.02、3 879.26、3 273.35、3 253.79、3 234.34、2 950.33、2 664.51、2 018.38、1 893.37、1 498.69和1 287.55；诊断卵巢癌灵敏度与特异度均≥90%的卵巢癌血清低表达差异多肽峰有15个，质荷比分别为9 288.46、7 759.77、5 925.24、4 652.77、4 210.42、3 887.02、3 279.90、3 240.82、2 962.15、2 932.70、2 022.42、1 897.16、1 501.69、1 337.38和1 290.13。在卵巢癌患者血清低表达的15个差异多肽峰中未鉴定出多肽峰的蛋白成分，在卵巢癌患者血清高表达的15个差异多肽峰中鉴定出2个多肽峰的蛋白成分，质荷比为1 498.70者是丝甘蛋白聚糖(SRGN)，质荷比为5 913.42者是纤维蛋白原α链(FGA)，二者在全部研究对象中诊断卵巢癌的灵敏度均为100%，特异度分别为90.9%和100%。结论SRGN和FGA在卵巢癌患者血清中高表达，可能是潜在的卵巢癌诊断标志物。

简介：摘要目的探寻与卵巢癌诊断相关的血清循环多肽标志物。方法以2018年3月至2018年9月中国医学科学院肿瘤医院妇瘤科收治的原发卵巢上皮癌患者54例(卵巢癌组)、同期在中国医学科学院肿瘤医院体检中心进行体检的健康女性40例(健康对照组)为研究对象。采用随机数字表法，将例卵巢癌患者和健康对照者各按1∶1随机分为训练集和验证集。采用基质辅助激光解吸离子飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)联合磁珠技术检测血清多肽峰，在训练集中筛选卵巢癌组与健康对照组间的差异多肽峰(评分>5)。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析，在训练集和验证集中，筛选曲线下面积(AUC)均≥0.8、诊断卵巢癌的灵敏度和特异度均>90%的差异多肽峰。采用液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/MS)技术鉴定差异多肽峰的成分。结果在质荷比1 000~10 000范围内，卵巢癌组和健康对照组之间有102个差异多肽峰。ROC曲线分析显示，在训练集和验证集中，AUC均≥0.8的差异多肽峰有42个，其中19个在卵巢癌组血清中高表达，23个低表达；诊断卵巢癌灵敏度与特异度均≥90%的卵巢癌血清高表达差异多肽峰有15个，质荷比分别为7 744.27、5 913.41、5 329.87、4 634.21、4 202.02、3 879.26、3 273.35、3 253.79、3 234.34、2 950.33、2 664.51、2 018.38、1 893.37、1 498.69和1 287.55；诊断卵巢癌灵敏度与特异度均≥90%的卵巢癌血清低表达差异多肽峰有15个，质荷比分别为9 288.46、7 759.77、5 925.24、4 652.77、4 210.42、3 887.02、3 279.90、3 240.82、2 962.15、2 932.70、2 022.42、1 897.16、1 501.69、1 337.38和1 290.13。在卵巢癌患者血清低表达的15个差异多肽峰中未鉴定出多肽峰的蛋白成分，在卵巢癌患者血清高表达的15个差异多肽峰中鉴定出2个多肽峰的蛋白成分，质荷比为1 498.70者是丝甘蛋白聚糖(SRGN)，质荷比为5 913.42者是纤维蛋白原α链(FGA)，二者在全部研究对象中诊断卵巢癌的灵敏度均为100%，特异度分别为90.9%和100%。结论SRGN和FGA在卵巢癌患者血清中高表达，可能是潜在的卵巢癌诊断标志物。

简介：摘要缺陷乏养菌是感染性心内膜炎少见但重要的病原菌之一，因培养和鉴定困难，常被误诊和漏诊。现报道2例男性晚发型人工瓣膜心内膜炎患者，其中1例为血培养和瓣膜培养缺陷乏养菌均阳性，1例仅为血培养缺陷乏养菌阳性，均通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry，MALDI-TOF MS)鉴定为缺陷乏养菌，经治疗后好转。提示MALDI-TOF MS可帮助临床医师快速、精准地识别缺陷乏养菌感染。

简介：目的探索乳腺癌与乳腺良性疾病和健康人血清蛋白质谱表达差异，寻找具有鉴别诊断意义的血清蛋白标志物。方法实验分为两大组：（1）决策树模型组共293例标本，包括3个亚组，分别为乳腺癌组110例标本、乳腺良性疾病组113例和健康组70例，建立决策树（乳腺癌诊断）模型；（2）盲法验证组共34例标本，包括3个亚组分别为乳腺癌组7例标本、乳腺良性疾病组13例及健康组14例，进行盲筛验证决策树模型。采用弱阳离子磁珠捕获乳腺癌患者血清中的蛋白，使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI—TOF—MS）仪检测绘制蛋白峰。应用BiomarkerWizardTM3．1软件和BiomarkerPatternsTM5．0软件分析数据。统计分析采用方差分析法和秩和检验法。计算决策树模型诊断的准确率以及盲法验证模型诊断乳腺癌的敏感性和特异性。结果在决策树模型组中检测到了47个差异有统计学意义的蛋白峰（P〈0．050）。应用BPS5．0软件，以相对损失最小的原则从这47个蛋白峰中选取了4个蛋白峰，分别为相对分子质量（Mr，本文中相当于质荷比m／z）9292．5、Mr11707．2、Mr15504．5和Mr16107．9，用其建立决策树模型（乳腺癌诊断模型）。该模型判断乳腺癌、乳腺良性疾病及健康人的准确率分别为99．09％、95．58％、92．86％。盲法验证该模型诊断乳腺癌的敏感性为71．43％，特异性为88．89％。结论应用MALDI—TOF—MS联合磁珠技术可以检测乳腺癌血清中差异蛋白峰并可以建立决策树（乳腺癌诊断）模型。选择的4个差异蛋白蜂建立的决策树模型诊断乳腺癌具有好的准确性和较好的敏感性及特异性。决策树模型能将乳腺癌与乳腺良性疾病及健康人相鉴别。寻找到的Mr9292．54、Mr11707．2、Mr15504．5以及Mr16107．9的蛋白峰有望成为鉴别乳腺癌与乳腺良性疾病和健康人的有效的肿瘤血清�

简介：目的应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（SELDI-TOFMS）技术检测乳腺癌新辅助化疗前后癌组织内蛋白质谱的变化,筛选乳腺癌新辅助化疗敏感性相关蛋白质。方法60份样本来自2009年3月至2010年8月山东省千佛山医院乳腺外科收治的30例乳腺癌患者CEF新辅助化疗前后的乳腺癌组织。化疗前,行粗针穿刺获得乳腺癌组织;化疗后,在乳腺癌根治术中取样。应用SELDI-TOFMS技术检测乳腺癌组织的蛋白质谱,所得数据采用Biomarkerwizard3.0.2软件分析,得到差异蛋白谱,再采用SPSS17.0软件对数据进行Shapiro-Wilk正态性检验和配对设计t检验。根据差异蛋白质的质荷比,在SWISS-PROT数据库中检索与差异蛋白质相匹配的存在于乳腺组织或乳腺癌组织中的蛋白质。结果通过比较患者新辅助化疗前后的蛋白峰值,筛选出8个蛋白峰有差异的蛋白质,其质荷比（m/z）分别为5825.9、8949.5、11053.5、11652.0、17898.9、22250.6、26055.5、38546.6,化疗后这8个蛋白峰均高于化疗前（11.0±5.0比8.2±4.9、10.7±4.5比6.3±3.4、22.3±9.9比15.3±9.9、28.0±10.2比21.4±9.3、9.5±4.6比5.4±3.4、1.1±1.0比0.6±0.5、2.0±0.7比1.5±0.7及2.7±2.2比1.5±1.2,P值均〈0.05）。结论应用SELDI-TOFMS技术可以筛选出与乳腺癌新辅助化疗敏感性相关的蛋白质谱。

简介：表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术（SELDI—TOF—MS）是一种用来检测生物样品中蛋白质的生物分析技术。血液或尿液中的蛋白质如果受毒性试剂的影响可能会发生变化。丙烯酰胺是一种广泛使用的工业化学品，很可能是一种致癌物，因此人们很担心暴露在丙烯酰胺中会产生健康问题。丙烯酰胺及其代谢产物环氧丙酰胺很容易与蛋白质结合。目前有多种分析技术评估丙烯酰胺对尿液和血红蛋白的影响，但是这些分析方法耗时而且昂贵。本文考察了SELDI—TOF—Ms能否作为一种筛查工具以鉴定受丙烯酰胺影响而发生修饰的尿液蛋白质或血红蛋白。

简介：目的应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）检测产KPC-2、NDM-1、VIM-2、IMP-1与IMP-4型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌水解厄他培南的能力。方法收集2009年6月-2013年12月上海交通大学医学院附属新华医院各种临床标本中分离的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CRE）,用改良Hodge试验进行产碳青霉烯酶的表型筛选,用PCR扩增方法检测其碳青霉烯酶基因,并经测序确认。应用MALDI-TOFMS进行厄他培南水解预试验以确定最适厄他培南浓度及孵育时间,随后采用预试验中的最适条件,应用MALDI-TOFMS检测CRE水解厄他培南的能力。结果108株CRE中,有102株改良Hodge试验阳性,其中90株产KPC-2、4株产NDM-1、3株产VIM-2、2株产IMP-1、2株产IMP-4、1株同时产KPC-2和IMP-4型碳青霉烯酶,且在2h内均能水解厄他培南;另外6株CRE改良Hodge试验阴性,未检测出上述碳青霉烯酶基因,且不水解厄他培南。结论临床微生物实验室应用MALDI-TOFMS能够快速准确检测CRE水解厄他培南的能力,筛查产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌,为临床早期合理使用碳青霉烯类抗生素提供依据。

简介：摘要目的了解基质辅助激光解析离子－飞行时间质谱仪（MALDI-TOF-MS,MS）在临床分离革兰阴性杆菌鉴定中的应用，为临床医师正确诊断提供科学依据。方法回顾性分析2015年4月－2015年10月临床标本经MS鉴定为革兰阴性杆菌，将所得菌质谱峰图与数据库中峰图进行比较，分析得出鉴定结果。结果MS共鉴定出革兰阴性杆菌834株，肠杆菌科622株共6种，占74.58%，主要为大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌，分别占肠杆菌科的39.40%及50.16%；非发酵菌属212株共4种，占25.42%，主要为鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌，其在非发酵菌属中的构成比分别为49.53%及39.15%，使用MS后能鉴定出临床常见革兰阴性杆菌。结论MS能快速鉴定出常见革兰阴性杆菌，为临床治疗及鉴别感染病原菌提供了快速的筛选方法。

简介：目的评价基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（Matrix-AssistedLaserDesorptionIonization-TimeOfFlightMassSpectrometry,MALDI-TOF-MS）技术对酵母样真菌鉴定的临床应用价值。方法将2015年6月-2016年6月临床检出的142株酵母样真菌标本同时采用MALDI-TOF-MS技术和传统真菌培养方法进行鉴定,记录结果并对结果进行对比分析。结果两种方法对于常见的白念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌和新生隐球菌的鉴定率很高（100%）,符合率较高（100%）;对于少见的葡萄牙念珠菌、解脂念珠菌、产朊念珠菌,两种方法的符合率较低,分别为25.00%、00.00%、00.00%。结论MALDI-TOF-MS技术对酵母样真菌的鉴定率较高,操作简便快速,是传统真菌培养鉴定的有力补充,可将其推广应用于酵母样真菌的早期快速鉴定。

简介：目的研究sn-甘油-1-花生苷-3-磷脂酰胆碱和sn-甘油-1-花生苷-2-磷脂酰胆碱的质谱裂解特征,对其进行区分,探讨该类化合物的质谱裂解规律。方法建立Q-TOF/MS法对sn-甘油-1-花生苷-3-磷脂酰胆碱和sn-甘油-1-花生苷-2-磷脂酰胆碱进行质谱检测,观察其在不同碰撞能量（5eV、15eV、25eV、35eV、45eV）下产生的碎片离子。结果在不同的碰撞能量下,sn-甘油-1-花生苷-3-磷脂酰胆碱产生碎片离子m/z104,125,147,184,317,361和485,而sn-甘油-1-花生苷-2-磷脂酰胆碱产生碎片离子m/z104,125,147,184,361和485。由此推测出溶血磷脂的裂解规律,并对sn-甘油-1-花生苷-3-磷脂酰胆碱和sn-甘油-1-花生苷-2-磷脂酰胆碱进行了区分。结论Q-TOF/MS法可以有效地对同分异构体化合物sn-甘油-1-花生苷-3-磷脂酰胆碱和sn-甘油-1-花生苷-2-磷脂酰胆碱进行结构解析。

简介：采用激光基底辅助电离质谱(MALDI/MS)技术分别对系列环状聚芳醚酮低聚物进行了分析,确定了几种不同大小的低聚物的存在,实验证明本方法是测定环状聚芳醚酮低聚物各种不同聚合度的快速、有效、准确的方法。

简介：摘要：目的:探讨是否可能利用MALDI-TOF MS质谱技术，帮助识别肿瘤患者中的ABO困难血型，以有效预防疾病引起的干扰。该方法采用血清蛋白法和PCR-SSP链反应法，这是一种基因测序技术，用于鉴别20例与ABO血型正反定型观念不符的肿瘤患者(其中10例为血液系统恶性肿瘤患者)；还对这些患者的输血影响进行了回顾性分析。结果，这一组肿瘤患者中25%(5/20)的困难血型样本显示抗原a和/或b减弱，分别有两个MDS病例、一个前列腺癌病例和两个AL病例；45%(9/20)A或b抗体减弱，最初有4例MM、1例WM、1例AGL、1例肝癌、1例右结肠癌和1例食道癌；ABO子类型为30%(6/20):1 bel 09/02.1b(a)04/o2.1b(a)02/b.2 bel 03/o；一个例子是新的a型亚等基因:测序结果是797个位置发生突变，根据其他位置的突变判断，其特征为A102/O01。基因型与血清类型的一致性率为75%(15/20)。60%的病人(20人中有12人)接受了输血治疗，没有进行可溶性输血，75 %的病人(12人中有9人)获得了所需的效率。结论首次将MALDI-TOF MS质谱技术应用于国内困难临床标本血型遗传分组。与PCR-SSP相比，MALDI-TOF MS系统具有速度、高吞吐量和高特异性等优点，有助于识别困难血型和检测稀有血型。

简介：利用MALDI-TOF-MS法测定了谷胱甘肽S-转移酶的分子量,并讨论和对比了三种不同基质对其影响,认为用α-氰基-4-羟基肉桂酸(α-CHC)作基质是最佳适宜条件。实验结果表明本方法优于其它传统的测定生物大分子分子量方法。