简介：摘要在新课程标准的要求下，初中语文教学应本着以生为本的教学观念。例如有学生对《故乡》的题材和作者做出提问，笔者本着尊重学生人格的原则，给予了充分的肯定，进而进行适当的引导和小组讨论，让学生自发地投入到学习中，充分提高了教学质量。

简介：杂交瘤制备单克隆抗体的出现创立了具有划时代意义的新技术。随着分子生物学的飞跃发展,人—鼠嵌合抗体、人源化抗体、完全人源性单克隆抗体应运而生。这些技术在许多学科领域得到广泛应用,特别在疾病的诊断和治疗方面。单克隆抗体受到世界各界学者的极大关注,被认为是具有巨大生命及发展前途的一项新技术。本文主要对单克隆抗体的研究进展进行综述。

简介：植物生长发育过程中会遭遇各种病原物的攻击,植物为了应对这些危害并适应外界的生存竞争,逐渐演化出了复杂的防御机制。NHL基因家族庞大,部分NHL基因受病原物诱导后会过量表达,增强植物对多种病原菌的抗性,是与植物防御机制密切相关的蛋白。本研究以津南实芹和美国西芹2个芹菜品种为试验材料,分别克隆出NHL-like蛋白基因AgNHL。序列分析表明,上述2种芹菜的AgNHL基因序列均含636bp的开放阅读框,编码211个氨基酸。2种芹菜碱基序列,只有第36位不同,津南实芹为T,美国西芹为C,2种碱基序列相似性高达99.84%,编码的氨基酸序列相同。进化分析显示,2种芹菜的NHL-like蛋白与葡萄、大豆等植物的相似度较高,在第80～185氨基酸间含一个LEA-2蛋白保守结构域。荧光定量PCR结果表明,AgNHL基因主要在芹菜茎中表达,根中表达量最低,有明显组织特异性,品种差异也很显著。对2种芹菜分别进行4℃低温、38℃高温、20%PEG处理、0.2mol/LNaCl处理2h表达分析显示,低温、盐处理下该基因表达量明显上升。

简介：为明确SOC1基因在叶片中的生理作用,克隆到烟草中SOC1基因的完整开放阅读框,全长806bp。农杆菌介导转化烟草后,获得26棵转基因植株,其中23棵鉴定为阳性植株,转化率为88.46%。与野生型烟草K326相比,获得的SOC1过表达烟株开花提前,株高增加,叶片宽大。半定量RT-PCR结果显示,SOC1过表达不影响叶片中Rubisco大亚基、蔗糖磷酸合成酶和蔗糖合成酶基因的表达水平,但提高了抗坏血酸氧化酶的表达水平;提高了碳酸酐酶活性、蔗糖含量和还原性抗坏血酸含量,并降低了抗坏血酸过氧化物酶活性。表明SOC1可能通过影响氧化还原状态而提高碳酸酐酶活性和光合速率。

简介：<正>科学家正利用苔藓对大气污染的敏感性,加之其无根生长及高的表面质量比,使其成为吸收大气污染颗粒物的上佳植物材料。由欧盟5个成员国西班牙(总协调)、法国、德国、爱尔兰和意大利的有关分子生物学、材料科学和生态仿生学科技人员组成研发团队,利用实验室的可控环境条件,采用泥炭苔藓芽孢子克隆技术,尽可

简介：摘要目的观察右佐匹克隆治疗失眠症的临床疗效。方法86例失眠症患者分为研究组和对照组，研究组给予右佐匹克隆2mg/次，对照组给予艾司唑仑1mg/次，连用4周后观察疗效。结果研究组总有效率88.64%高于对照组85.71%，两组间差异无统计学意义；研究组不良反应发生率为13.6%低于对照组30.9%，两组间差异有统计学意义。结论右佐匹克隆对失眠症疗效确切，不良反应少，值得推广应用。

简介：为了探索梨树植物的开花调控机制,本研究以砂梨（PyruspyrifoliaNakai）叶片为材料,采用同源序列克隆法,进行了开花调控相关基因CONSTANS的克隆,命名为PyCO,GenBank登录号为KF246572。序列分析表明,该基因包含一个1023bp的开放阅读框,编码340个氨基酸,推测蛋白质分子量为37.81kD,等电点为5.95。PyCO蛋白具有典型的植物CO家族的结构特征,含有2个高度保守的B-box及CCT结构域。进化树分析表明,该氨基酸序列与苹果的同源性接近93%,与碧桃、可可树、草莓等其他高等植物的CO类蛋白同源性也在70%以上。原核表达获得了具有较高表达水平的融合蛋白,分子量约为58.5kD,为进一步探索梨树开花调控机理奠定了基础。

简介：为揭示大麦中黄酮合成的分子调控机制,利用反转录PCR结合同源克隆和RACE技术首次从青稞（裸大麦）叶片中克隆获得肉桂酸-4-羟化酶基因（HvC4H）的全长cDNA序列（Genbank登录号：KF927086）,总长度1951bp,ORF为1518bp,编码505个氨基酸,等电点PI=9.01,平均亲水指数（GRAVY）为-0.170,属于亲水性碱性蛋白,高级结构分析表明其具有细胞色素P450家族保守域及C4H特异的功能性活性位点。利用实时荧光定量PCR分析胚乳发育5个时期不同组织（茎、叶及子粒）的表达情况,结果显示HvC4H基因在青稞胚乳发育期的表达情况存在着明显的组织差异性,在茎中的表达量最高。本研究为通过调控C4H基因的表达从而提高大麦黄酮的含量奠定了分子生物学基础,对于改良大麦的品质、抗性、生长发育等性状具有重要意义。

简介：摘要目的分析右佐匹克隆用于慢性原发性失眠症临床治疗的效果。方法以118例接受回访及调查问卷调查的患者为对象，随机平均分成两组，观察组59例以右佐匹克隆治疗，对照组59例以艾司唑仑治疗，1月为一个疗程。于治疗前及治疗完成后，分别对两组中患者实施睡眠质量评价，对比本组治疗前、后及两组治疗前、后的差异。结果两组患者治疗后的PQSI评分均明显地低于治疗前评分，观察组6.31±1.24分<18.51±1.61分，对照组8.21±1.04分<18.52±1.28，P<0.05；治疗前，观察组与对照组无显著差异，P>0.05；治疗后，观察组显著地对于对照组，P<0.05。结论右佐匹克隆与艾司唑仑两种药物用于慢性原发性失眠症的治疗，均具有良好效果，但是，右佐匹克隆可以更好的提升患者睡眠质量，促进患者痊愈。

简介：克隆植物在湿地中普遍存在，其在有性和克隆两种繁殖方式之间的权衡是植物生态学中的热点议题，并具有重要的理论意义。以扁秆蔗草（Scirpusplaniculmis）为研究对象，在吉林省莫莫格湿地，对不同环境条件下土壤中的扁秆蔗草种子数量及其分布规律进行了研究，并对影响扁秆蔗草种子数量的环境因素进行了分析。结果表明，①在垂直方向上，扁秆蔗草种子主要集中分布在土壤表层（0～5cm深度）和中层（5-10cm深度）内，在下层土壤（深度〉10cm）中明显减少；表层土壤中的扁秆蔗草种子容易受到干扰而发生变动；这种垂直分布规律不随环境条件的改变而发生变化；②在不同的环境条件下，扁秆蔗草种子的数量存在显著差异；土壤含水率、pH和群落辛普森指数与扁秆蔗草种子数量显著相关，植被中扁秆蔗草的多度则与种子数量不相关。分析发现，因环境因素引发的扁秆蔗草繁殖方式的权衡是存在的，并可以在小的局域范围内实现；扁秆蔗草被重新定义为兼性盐碱植物，其适宜生长条件为弱碱性，在强碱性条件下则会通过大量产生种子而实现对当前生境的逃离；两种繁殖方式的意义不同，有性繁殖主要服务于宏观尺度上种群的扩散与维系，而克隆繁殖的则实现了小尺度内克隆对资源的有效利用和竞争优势的保持。

简介：针对人体运动分析中高维姿态空间难题,提出了一种基于子空间构造和克隆选择的人体运动分析方法.该方法首先利用等距映射方法学习得到反映人体运动本质的低维姿态流形空间,并在低维空间中进行运动分析,提高了运动分析的效率和精度;其次,将克隆选择算法（CSA）应用于姿态优化,并通过引入运动时序信息提出序列克隆选择（S-CSA）,实现了基于单幅图像的姿态估计和图像序列的姿态跟踪.试验结果表明,该方法具有良好的计算效率、良好的收敛性和局部优化能力,从而能准确分析视频中的人体运动.

简介：LEAFY（简称LFY）是植物花分生组织特征基因,在植物由营养生长向生殖生长转变过程中起着重要作用,是启动开花的枢纽。菲油果是一种新兴的果树资源,为研究菲油果LFY基因（FsLFY）的表达调控规律,本研究通过实时荧光定量PCR技术研究了FsLFY基因的时空表达模式,并通过染色体步移技术克隆了该基因的启动子序列。荧光定量PCR结果表明,FsLFY基因在菲油果花蕾不同发育阶段以及其他组织器官中均有表达。在花蕾中,小蕾期最高,中蕾期最低；组织器官中,营养枝茎段最高,花瓣最低。FsLFY基因启动子序列长度为2436bp（GenBank登录号：KF766536）,运用PLACE、PlantCARE等在线软件对其序列进行顺式作用元件分析,结果显示该序列不仅含有CAAT-box、TATA-box等核心启动子元件,而且还具有响应水分、光、赤霉素（GA）以及其他功能未知的顺式调控元件,表明FsLFY基因的表达受多种外界环境条件的调控。本研究为阐明菲油果的开花机理,以及通过分子育种手段使菲油果早花早果奠定了理论基础。

简介：目的克隆广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区（CDS）序列,利用RT-PCR和QRT-PCR方法分析PGC-1αmRNA组织表达情况。方法本实验以广西巴马小型猪背最长肌cDNA为模版,PCR扩增PGC-1α基因CDS序列,将其连接至pEASY-T5载体,转染细菌、验证和序列测定;通过RT-PCR半定量和QRT-PCR实时荧光定量检测PGC-1α基因在小型猪多个组织中的表达情况。结果克隆获得广西巴马小型猪PGC-1α基因CDS序列,全长2391bp,编码796个氨基酸,与参考序列的同源性为99.9%,两处碱基发生同义突变,分别是C-A1105和GA1524;PGC-1α基因在广西巴马小型猪心脏和肾脏中的表达丰度最高,其次是肝脏、皮下脂肪和背最长肌,而在胰腺中未检测到其表达。结论成功克隆了广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区序列并进行了多种组织表达分析,为后续研究PGC-1α在小型猪2型糖尿病发生过程中作用途径打下基础。

简介：单克隆抗体类药物的第一个国际非专利药品名称（INN）MuromonabCD3，由WHO在1988年首次公布。其后，随着单克隆抗体类药物研发热潮的到来，WHO对该类药物的INN命名规则也逐步建立和完善。至2014年6月，WHO陆续公布的单克隆抗体类药物的建议INN（ProposedINN，以下缩写为p-INN）已经达到329个。

简介：仿冒正规出租车的＂克隆出租车＂,成为坑害消费者的一大毒瘤。上海集中拆解销毁近期查处的350辆＂克隆出租车＂。此外,上海近期还出台了新规,加大＂黑车＂违法成本,提高执法震慑力。上海公安、交通部门有关负责人在＂克隆出租车＂集中销毁现场表示,为维护公共安全,近期将掀起更大力度的打击＂黑车＂行动,其中整治重点就是这些＂克隆出租车＂。

简介：根据转录组测序获得的钙依赖蛋白激酶基因的EST序列设计特异引物,利用RT-PCR和RACE技术从油菜中克隆获得BnCDPK1基因全长序列,NCBI登录号为KF740477,其cDNA和gDNA全长分别为2115bp和2857bp,含有11个内含子和12个外显子。生物信息学分析表明其开放阅读框为1581bp,编码527个氨基酸,具有CDPKs家族典型的特征,含有1个激酶区域和4个钙离子手型结构域,与拟南芥AtCDPK28同源性最高,属于第Ⅳ亚家族。BnCDPK1在油菜的根、茎、叶、花、种子中均有表达,但表达丰度存在差异,叶片中表达量最高,其次为茎、根和种子,花中的表达量最低;在高抗和高感油菜品种中,菌核菌胁迫均能够诱导BnCDPK1上调表达,但是高抗品种比高感品种反应更迅速,表达量更高。接种前、接种后12h、接种后24h,高抗品种的表达量相比高感品种分别提高1.4倍、4倍和3倍,推测其可能参与油菜的生长发育以及油菜对菌核菌侵染的应答和防御反应。

简介：MADS-box基因家族中的AG（AGAMOUS）基因对心皮和胚珠的发育起重要作用。本研究以甜樱桃（PrunusaviumL.）为试验材料,通过RT-PCR扩增AG保守片段,利用RACE技术获得一个全长表达序列,采用实时荧光定量的方法研究了外源赤霉素对该基因表达的影响。结果表明：（1）所获得基因PaMADS5（Genebank登录号：JQ686726）,全长为1092bp,编码246个氨基酸;（2）蛋白同源性分析和系统进化分析表明,PaMADS5属于MADS-box家族中的AG亚族;组织特异性分析表明,PaMADS5在花的雄蕊和心皮中表达。（3）PaMADS5在雌蕊中的表达量受赤霉素的影响,随着赤霉素处理浓度的升高,PaMADS5的表达逐渐升高,表明PaMADS5可能参与调控甜樱桃雌蕊的发育。

简介：目的寻找能调节T细胞功能的相关分子,进行与T细胞介导的自身免疫性疾病相关的研究。方法从BALB/c小鼠骨髓中收集树突状细胞,免疫Wistar大鼠,进行细胞融合,建立杂交瘤细胞系。筛选得到很多株能调节T细胞功能的杂交瘤细胞系,对其中一株最能抑制T细胞增殖的杂交瘤细胞系进行了进一步的深入研究。结果显示其目标分子是CD45,同时增殖实验结果显示该抗体能显著抑制T细胞增殖反应。结论抗CD45单克隆抗体能有效抑制T细胞增殖,有望将本抗体用于T细胞介导的自身免疫性疾病的相关预防及治疗中。

简介：摘要目的阐明人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor成熟肽的基因克隆过程，获得人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor成熟肽克隆载体，为后续构建Hespintor原核表达载体奠定基础。方法提取pMD19-TSimpleVector-Hespintor克隆质粒后，应用RT-PCR法扩增Hespintor成熟肽基因片段，对Hespintor成熟肽克隆载体进行构建，及双酶切反应鉴定。结果琼脂糖凝胶电泳，在约230bp处可见1条特异性条带；蓝斑和白斑斑点数量比对大约为11，说明转化效率大约为50%左右；经BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定，约230bp处的条带为所克隆的人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor成熟肽基因片段。结论重组克隆质粒pMD19-TSimpleVector-Hespintor成熟肽基因构建成功。

简介：乳酸菌胞外多糖具有良好的功能特性。从泡菜中分离乳酸菌,初筛到11株产胞外多糖的乳酸菌。经黏度及EPS产量测定,复筛出1株高产EPS的乳酸菌,其产量为771.97μg/mL。采用CTAB法提取该菌株基因组,测定其16SrRNA序列,在NCBI上进行同源序列比对,建立系统发育树。结果初步确定该菌株为干酪乳杆菌ZJ-4（LactobacilluscaseiZJ-4）。以该菌株基因组为模板,参照干酪乳杆菌BL23（HM162415）的galU序列设计引物。采用Touch-downPCR扩增得到大约900bp的galU序列,经TA克隆、测序,与干酪乳杆菌BL23（HM162415）的galU序列同源率为98%,表明克隆正确。