简介：摘要国家药品监督管理局（NMPA）制定了一系列体外诊断试剂（IVD）临床试验相关政策及指导原则，对IVD临床试验的科学性与规范性提出了更高的要求，有助于推动我国IVD产业的规范发展，提升临床试验能力。为进一步规范IVD临床试验样本管理，针对试验用样本来源、编号、保存、使用、留存、销毁等全流程关键环节，结合相关指导原则和最新政策要求，综合领域专家建议和意见，共同制定本共识，旨在为IVD临床试验研究人员提供参考和指导，为IVD临床试验用样本全流程管理提供操作规范。

简介：摘要目的验证改良导管侧孔灌注法静态尿道压力（rest urethral pressure profile，RUPP）测定的准确性及分析其临床价值。方法分别用传统及改良法行RUPP体外试验，分析比较试验数据，得出结论。结果传统及改良RUPP组Pura、Pves、Puramax、Pves∆的结果分别为（13.73±0.94）、（8.53±0.82）cmH2O，（6.93±0.78）、（6.73±0.52）cmH2O，（47.00±1.91）、（46.87±2.97）cmH2O，（6.93±0.78）、（6.73±0.52）cmH2O。除Pura差异有统计学意义外（P<0.05）外，两组间Pves、Pves∆、Puramax差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论改良导管侧孔灌注法RUPP准确性与传统方法相当，且无需进行强制"Pura=Pves"操作，保证所有检测数据的真实性，或许是一种更理想的静态尿道压力检测方法。

简介：摘要目的通过突变的方式构建含有鼠Thy1.1基因或鼠Thy1.2基因的HIV-1 CRF07_BC感染性克隆，建立CRF07_BC亚型体外竞争试验。方法用鼠Thy1.1基因和鼠Thy1.2基因替换CRF07_BC亚型感染性克隆pXJDC6291-13 Nef区前218个碱基，构建成CRF07_BC感染性克隆BCEA1和BCEA2质粒。BCEA1和BCEA2进行293T细胞转染后获得病毒，测定病毒滴度，以等比例病毒含量共感染PM1细胞，在感染的第3、4、5、6天收集细胞并用Thy1.1和Thy1.2特异性抗体标记细胞，并进行流式细胞检测病毒适应性。通过"TFitness"程序(http：//bis.urmc.rochester.edu/vFitness)计算病毒相对适应性。并观察耐药位点K103 N、多态性位点K166R相对于CRF07_BC亚型相对适应性的影响。结果CRF07_BC亚型BCEA1和BCEA2两病毒的相对适应性(1+s)结果为1.06±0.23693，无统计学差异，建立了CRF07_BC亚型体外生长竞争性试验。利用该体外生长竞争试验验证K103 N和K166R突变株与野生株的相对适应性，BCEA2-K103 N/BCEA1相对适应性是0.728282±0.16608、BCEA2-K166R/BCEA1是0.883385±0.19023、BCEA2-K103 N+K166R/BCEA1是0.804604±0.06164。K103耐药位点突变株与野生株相对适应性存在统计学差异。结论建立HIV-1 CRF07_BC病毒适应性的体外生长竞争试验，基于该体外竞争试验，HIV-1 K103 N的耐药毒株的病毒适应性降低。

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简介：摘要目的探讨医院体外生命支持中心的建立对体外膜肺氧合（extracorporeal membrane oxygenation，ECMO）技术治疗患者生存率的影响。方法通过回顾2015年1月至2021年7月青岛大学附属医院收治的158例应用ECMO技术治疗的患者为研究对象。将患者分为2组，对照组为2015年1月至2020年8月体外生命支持中心成立前ECMO治疗患者，共85例；观察组体外生命支持中心成立后2020年9月至2021年7月ECMO治疗患者，共73例。比较两组ECMO救治患者总体生存率，VV-ECMO及VA-ECMO救治生存率、存活患者ECMO支持时间及患者住院费用、体外心肺复苏（extracorporeal cardiopulmonary resuscitation, ECPR）建立时间等差异。结果与体外生命支持中心成立前相比，体外生命支持中心成立后ECMO治疗患者总体生存率（52.9% vs. 65.7%，P=0.019）以及VA-ECMO救治生存率明显提高（53.2% vs. 71.7%，P=0.042），ECMO救治存活患者ECMO支持时间[（16.78±11.38）min vs. （12.99±6.98）min，P=0.014]及住院费用明显降低[（38.0±10.7）万元vs. （30.6±8.8）万元，P<0.001），ECPR建立时间[（26.0±10.1） min vs. （18.0±10.2）min，P<0.001]，差异均有统计学意义；VV-ECMO救治生存率（52.1% vs. 70.0%，P=0.233），差异无统计学意义。结论通过体外生命支持中心的建设，并不断持续质量改进，可以有效提高ECMO救治患者总体生存率，并降低ECMO支持时间及住院花费。

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简介：摘要目的比较CPB前后异丙酚麻醉患者前额脑频谱图变化并分析其特征。方法纳入分析2019年5月—2020年9月29例异丙酚麻醉维持在CPB浅低温下进行冠状动脉旁路移植术的病例，比较CPB前与CPB浅低温阶段（约30 ℃）脑频谱图β波、α波、θ波、δ波能量，绘制CPB期间脑频谱图，重建CPB前与CPB浅低温阶段平均脑频谱图并进行比较，做差异谱分析描述两个阶段频谱变化。结果CPB期间脑频谱图呈现动态性变化，其中CPB浅低温阶段与CPB前相比，脑电θ波能量增强[2.8（1.9~3.9）dB，Z=-4.64，P<0.001]，但β波能量[-3.4（-4.1~-2.6）dB，Z=-4.62，P<0.001]、α波能量[-2.9（-3.9~-2.0）dB，Z=-4.01，P<0.001]以及δ波能量[-1.5（-1.9~-0.9）dB，Z=-3.53，P<0.001]均减弱。前额脑频谱图可以直观地反映这种改变，降温时呈现动态α-θ频率减慢，复温时呈现动态α-θ频率增快。差异谱分析提示CPB浅低温状态时在4~8 Hz具有较高的能量[两个阶段间能量分布在4~8 Hz内差异有统计学意义（P<0.05）]。结论脑频谱图在CPB浅低温阶段发生显著改变，θ波能量增强和β波、α波、δ波能量降低的脑频谱图可作为异丙酚维持输注CPB麻醉状态分析的参考。

简介：摘要体外激活（in vitro activation，IVA）技术是指IVA原始卵泡，使其生长至可接受激素刺激的阶段，结合促排卵获得成熟卵泡的技术，最终通过体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer，IVF-ET）技术达到受孕目的。常用方法为激活PI3K/Akt信号通路和阻断Hippo信号通路。随着研究深入，新的激活方法逐渐发展。现已有多例早发性卵巢功能不全（primary ovarian insufficiency，POI）患者应用IVA技术成功妊娠的案例报道，结合生育力保存技术，卵巢低反应（poor ovarian response，POR）以及女性恶性肿瘤患者都可能受益于IVA技术。然而IVA技术尚不完善，仍在临床成功率、安全性等方面存在问题，需要在机制和临床应用继续探索。本文针对IVA技术的机制、临床应用情况以及发展方向方面进行论述，为IVA的研究和临床应用提供参考。

简介：摘要体外诊断是临床诊断信息的重要来源，为疾病的预防、诊断和治疗提供了重要决策依据，是推动分级诊疗，实现精准医疗，支撑健康中国建设和应对重大突发性公共卫生事件的必备手段。本文结合我国体外诊断发展取得的长足进展和面临的短板弱项，分析阐述体外诊断的需求、政策支撑情况、技术和产业发展趋势以及加快产业化发展的路径，旨在推进我国体外诊断科技与产业高质量发展。

简介：摘要目的建立大鼠卵巢体外低温机械灌注(HMP)模型，并验证其有效性。方法26只雌性8～10周龄SD大鼠，供体组、受体组、正常对照组和卵巢摘除组各6只，另有2只大鼠HMP结束后留取卵巢标本以备检测。供体组和取材大鼠获取卵巢和肾脏后置于0～4 ℃林格氏液中保存2 h，再行HMP 2 h。供体组大鼠卵巢组织HMP结束后移植至受体组大鼠左肾包膜下，移植7 d后检测血清抗苗勒管激素(AMH)水平，同时获取移植卵巢进行组织病理检查以及Ki67和CD31免疫组织化学染色。采用单因素方差分析比较正常对照组、卵巢摘除组和受体组大鼠血清AMH水平，采用t检验比较正常对照组和受体组卵泡计数以及Ki67和CD31阳性细胞面积百分比。P<0.05为差异有统计学意义。结果HMP后的卵巢组织血管未见明显扩张，受体组大鼠移植7 d后的卵巢组织卵泡结构完整，成熟卵泡数为(7.0±0.6)个，低于正常对照组(26.3±3.4)个，差异有统计学意义(t＝5.633，P<0.05)。受体组血清AMH为(4.63±0.87)ng/mL，高于卵巢摘除组(2.55±0.16)ng/mL，低于正常对照组(7.39±1.04)ng/mL，但差异均无统计学意义(P均>0.05)。移植7 d后受体组大鼠卵巢组织Ki67和CD31阳性细胞面积百分比分别为(29.0±2.4)%和(12.3±1.0)%，正常对照组分别为(21.9±3.8)%和(12.6±1.2)%，差异均无统计学意义(t＝1.634和0.178，P均>0.05)。结论本研究构建的大鼠卵巢体外HMP模型，方法简单，可短时间维持卵巢的正常功能，为卵巢器官保存提供了一个新的方式。

简介：摘要肝移植是治疗终末期肝病最有效手段，但存在供肝短缺的问题，边缘供肝被考虑用于移植手术。静态冷保存边缘供肝的效果欠佳，移植术后并发症的发生率增加。供肝质量是影响移植受者长期生存的关键因素，许多试验开始研究新的器官保存技术和修复边缘供肝技术。本文就目前常用的供肝体外保存方式及新型机械灌注技术在肝移植中的应用进行综述。

简介：摘要目的通过体外试验探究慢性淋巴细胞白血病细胞损害CD8+T细胞的线粒体代谢功能影响嵌合抗原受体的T淋巴细胞(chimeric antigen receptors modified T cells，CAR-T)的效能。方法将培养得到的CAR-T细胞和CD8+T细胞作为正常组，感染组为加入慢性淋巴细胞白血病细胞进行侵染的CAR-T细胞和CD8+T细胞。采用FACScan流式细胞仪检测CAR-T细胞的凋亡情况；Western blot检测细胞凋亡相关的蛋白Bcl-2、cleaved-caspase-3和Bax的相对表达量；酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测炎症因子肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor-alpha，TNF-α)、白细胞介素(interleukin，IL)-6和IL-10的变化；使用Pierce BCA蛋白检测试剂盒测定蛋白质浓度；化学发光发检测细胞内三磷酸腺苷(adenosine triphosphate，ATP)水平，分光光度计检测线粒体丙二醛(malondialdehyde，MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione，GSH)的含量；荧光探针法检测胞内钙离子浓度的变化，实时荧光定量PCR检测线粒体DNA表达水平的变化。结果正常组CAR-T细胞凋亡率显著低于感染组CAR-T细胞凋亡率，差异有统计学意义[(4.58±0.16)%比(7.06±0.74)%，χ2＝5.674，P<0.05]。感染组的Bax和cleaved-PARP表达量明显高于正常组，Bcl-2表达量明显低于正常组，差异具有统计学意义[(3.51±0.01)%比(1.07±0.01)%，(2.34±0.05)%比(1.36±0.04)%，(0.66±0.02)%比(1.17±0.02)%，χ2值分别为298.838，26.509和31.231，P值均<0.05]。感染组的IL-6、TNF-α表达量较正常组明显升高，IL-10表达量较正常组明显降低，组间差异具有统计学意义[(87.69±21.07)ng/L比(43.25±5.36)ng/L，(65.12±15.75)ng/L比(33.14±5.23)ng/L，(16.02±1.69)ng/L比(24.33±2.33)ng/L，t值分别为3.54，3.338和4.988，P值均<0.05]。感染组的ATP和总钙离子浓度低于正常组，差异具有统计学意义[(0.15±0.03)μmol/g比(0.32±0.06)μmol/g，(12.46±2.74)μmol/L比(25.97±3.49)μmol/L, t值分别为4.389和5.274，P值均<0.05]。感染组的MDA含量高于正常组，GSH含量低于正常组，差异具有统计学意义[(1.84±0.23)μmol/L比(1.34±0.21)μmol/L，1.07±0.17)pg/mg比(5.23±0.36)pg/mg，t值分别为2.781和18.098，P值均<0.05]。感染组CD8+T细胞线粒体基因蛋白的表达量明显低于正常组，差异具有统计学意义[(0.62±0.03)%比(1.01±0.06)%, χ2＝10.070，P<0.05]。结论离体状态下慢性淋巴细胞白血病细胞通过损害CD8+T细胞的线粒体代谢功能促进CAR-T细胞的凋亡。

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简介：摘要目的探索超声引导下射频消融治疗肝癌的有效消融模式。方法观察人肝癌细胞HepG2和人永久化肝细胞LO2经高温处理后的形态变化，采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测其增殖能力。收集47℃处理后仍然存活的HepG2细胞(ΔHepG2细胞)和LO2细胞(ΔLO2细胞)，行二次高温处理，采用CCK-8法检测其增殖能力。在离体猪肝的不同位置进行消融，比较超声声像图汽化区与肉眼观消融灶的一致性，观察声像图汽化区各区域的温度。结果水浴加热至50℃后，随着培养时间的延长，HepG2和LO2细胞的贴壁细胞数目愈来愈少，且逐渐失去正常细胞形态。水浴加热至50℃及以上后，HepG2、LO2、ΔHepG2和ΔLO2细胞的细胞增殖率降低，与37℃组比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)，并对细胞产生不可逆性损伤。声像图中汽化区横径与肉眼观消融灶横径较为一致，差异均无统计学意义(均P>0.05)。射频消融9 min时，超声图像上高回声团边缘及其内部猪肝组织温度均≥53℃，为有效消融时间。结论初始功率200 W、目标温度105℃，当有效消融时间持续9 min以上时，超声声像图汽化区内的肝癌细胞均可发生不可逆性损伤。

简介：摘要目的探索超声引导下射频消融治疗肝癌的有效消融模式。方法观察人肝癌细胞HepG2和人永久化肝细胞LO2经高温处理后的形态变化，采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测其增殖能力。收集47℃处理后仍然存活的HepG2细胞(ΔHepG2细胞)和LO2细胞(ΔLO2细胞)，行二次高温处理，采用CCK-8法检测其增殖能力。在离体猪肝的不同位置进行消融，比较超声声像图汽化区与肉眼观消融灶的一致性，观察声像图汽化区各区域的温度。结果水浴加热至50℃后，随着培养时间的延长，HepG2和LO2细胞的贴壁细胞数目愈来愈少，且逐渐失去正常细胞形态。水浴加热至50℃及以上后，HepG2、LO2、ΔHepG2和ΔLO2细胞的细胞增殖率降低，与37℃组比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)，并对细胞产生不可逆性损伤。声像图中汽化区横径与肉眼观消融灶横径较为一致，差异均无统计学意义(均P>0.05)。射频消融9 min时，超声图像上高回声团边缘及其内部猪肝组织温度均≥53℃，为有效消融时间。结论初始功率200 W、目标温度105℃，当有效消融时间持续9 min以上时，超声声像图汽化区内的肝癌细胞均可发生不可逆性损伤。

简介：摘要3例服用过量地高辛后引起致死性心律失常的患儿，入院后给予体外膜肺氧合辅助下心肺复苏，均抢救成功。国内外尚无体外膜肺氧合辅助下心肺复苏救治儿童地高辛中毒引起致死性心律失常的报道。

简介：摘要对于体外膜氧合（ECMO）辅助患者的神经功能改变，目前的认知还远远不足，前瞻性研究的难度也非常大。脑梗死、脑出血等的诊断需要依靠特殊的辅助检查，如果只对少部分患者进行这些检查，诊断率和实际发生率之间就会具有较大差异。从应对神经系统并发症的方法看，目前尚无针对ECMO辅助患者神经系统并发症的特异性治疗手段。当前阶段，对ECMO辅助患者神经系统并发症的预防大于治疗，需要充分理解ECMO造成的病理生理改变，对有ECMO适应证的患者及早进行辅助治疗，在ECMO转机中做好每一个细节，加强监测，及时撤机。