简介：

简介：摘要：目的：探究氢氧化钙对人根尖牙乳头干细胞增殖影响。方法：通过酶消化法联合组织块贴壁法分离人根尖牙乳头组织进行培养，鉴定其干细胞特性，并在不同浓度氢氧化钙影响下分析其增殖情况。结果：在第 5d开始时，氢氧化钙组浓度低于 5%B组对细胞增殖的抑制作用与对照组相比无统计学差异，（ p＞ 0.05）；但氢氧化钙组浓度高于 5%B组对细胞增殖的抑制作用有统计学意义，（ p＜ 0.05），而在第 7d与第 9d开始开始时氢氧化钙组与对照组对于细胞增殖均表现出抑制效果，并有统计学差异（ p＜ 0.05）。结论：高浓度的氢氧化钙抑制了 SCAP的体外增殖，但由于本次研究样本较少，药物是否会导致生物相容性及安全性问题的出现仍需进一步研究。

简介：摘要：目的：探究氢氧化钙对人根尖牙乳头干细胞增殖影响。方法：通过酶消化法联合组织块贴壁法分离人根尖牙乳头组织进行培养，鉴定其干细胞特性，并在不同浓度氢氧化钙影响下分析其增殖情况。结果：在第 5d开始时，氢氧化钙组浓度低于 5%B组对细胞增殖的抑制作用与对照组相比无统计学差异，（ p＞ 0.05）；但氢氧化钙组浓度高于 5%B组对细胞增殖的抑制作用有统计学意义，（ p＜ 0.05），而在第 7d与第 9d开始开始时氢氧化钙组与对照组对于细胞增殖均表现出抑制效果，并有统计学差异（ p＜ 0.05）。结论：高浓度的氢氧化钙抑制了 SCAP的体外增殖，但由于本次研究样本较少，药物是否会导致生物相容性及安全性问题的出现仍需进一步研究。

简介：目的：研究B细胞淋巴瘤因子6共抑制因子（BCL6co—repressor，BCOR）对根尖牙乳头干细胞成肌分化能力的影响。方法：利用HA—BCOR逆转录病毒载体过表达BCOR进行获得性功能研究；WesternBlot检测HA—BCOR的过表达效果；重组人肿瘤生长因子β1（TGF—β1）蛋白诱导根尖牙乳头干细胞体外成肌分化；通过检测成肌分化相关基因smoothened（SMO）、smoothmuscleactinalpha2（ACTA2）和caldeson（CALDl）的表达研究根尖牙乳头干细胞体外成肌分化能力。结果：WesternBlot结果显示HA-BCOR可以在根尖牙乳头干细胞有效的过表达；过表达BCOR抑制根尖牙乳头干细胞成肌分化相关基因SMO和CALDl的表达。结论：过表达BCOR基因抑制根尖牙乳头干细胞体外成肌分化，证实BCOR是根尖牙乳头干细胞成肌分化的抑制甚因。

简介：目的：探讨17β-雌二醇对人根尖牙乳头干细胞（stemcellsfromapicalpapilla，SCAPs）核因子-κB受体活化因子配体（receptoractivatorfornuclearfactor—κBligand，RANKL）、骨保护素（osteoprotegerin，OPG）表达的影响。方法：通过酶消化法分离培养SCAPs，将SCAPs分别于对照组（普通培养基＋10μmol／L无水乙醇）和含0．1μmol／L17β-雌二醇的培养基培养3d和7d后，实时荧光定量PCR法和蛋白质免疫印迹法分别检测RANKL、OPGmRNA和蛋白表达。结果：17β-雌二醇刺激3d和7d组，OPGmRNA和蛋白表达均较对照组升高（P〈0．01），RANKLmRNA和蛋白表达均较对照组降低（P〈0．01）。结论：1713一雌二醇可能通过调节RANKL／OPG系统，参与调节SCAPs成牙／骨及破牙／骨活性。

简介：目的:研究BCL6共抑制因子(BCOR)异构体(BCOR-short)对根尖牙乳头干细胞(SCAPs)成骨分化能力的影响。方法:利用HA-BCOR-short逆转录病毒载体在SCAPs中过表达BCOR-short,WesternBlot检测过表达效果;通过碱性磷酸酶(ALP)活性、茜素红染色及钙离子定量分析研究SCAPs体外成骨分化能力;实时定量RT-PCR检测SCAPs中骨涎蛋白(BSP)、骨钙素(OCN)和转录因子AP2A的表达。结果:WesternBlot结果显示HA-BCOR-short可以在SCAPs有效的过表达;ALP活性结果显示过表达HA-BCOR-short抑制SCAPs的ALP活性;茜素红染色及钙离子定量分析结果显示HA-BCOR-short明显抑制SCAPs体外矿化能力;实时定量RT-PCR结果显示过表达HA-BCOR-short明显抑制SCAPs中BSP、OCN和AP2A的表达。结论:过表达BCOR异构体BCOR-short可以抑制转录因子AP2A的表达,并且抑制SCAPs体外成骨分化功能。

简介：目的：探讨肝细胞生长因子（hepatocytegrowthfactor，HGF）对体外培养的根尖牙乳头干细胞（stemcellsfromapicalpapilla，SCAP）增殖和矿化能力的影响。方法：将SCAP细胞分别在标准培养液、含有10ng／mlHGF的培养液以及矿化诱导培养液中培养，分为空白对照组、HGF组、矿化诱导组和HGF＋矿化诱导组。通过MTF法、碱性磷酸酶（alkalinephosphotase，ALP）活性检测、茜素红染色和氯代十六烷基吡啶定量检测SCAP细胞增殖和矿化能力的改变。结果：MTT结果显示，HGF可以侧进矿化诱导下的SCAP细胞的增殖能力（P〈0．005）。与其他组相比较，HGF＋矿化诱导组SCAP细胞的ALP活性明显上调，矿化能力显著提高（P〈0．005）。结论：10ng／mlHGF可明显促进SCAP细胞的增殖和矿化能力。

简介：目的:研究过表达基质金属蛋白酶1(MMP1)对根尖牙乳头干细胞(SCAPs)骨/牙向分化能力的影响。方法:从牙根未发育完全的第三磨牙上摘取根尖牙乳头组织,采用酶消法和组织块法结合的方法分离纯化得到SCAPs。设计构建MMP1过表达质粒,转染SCAPs。通过碱性磷酸酶(ALP)活性检测试剂盒、茜素红染色、Westernblot和实时定量RT-PCR检测MMP1过表达组和空载质粒组的骨/牙向分化相关指标的变化。结果:成功构建SCAPsMMP1过表达模型;ALP活性检测和茜素红染色结果显示MMP1过表达组的ALP活性降低和矿化能力减弱,Westernbolt结果显示MMP1过表达组的Runt相关转录因子2(RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix(OSX)、牙本质涎蛋白(DSP)、骨钙素(OCN)的表达降低,实时定量RT-PCR结果显示Ⅰ型胶原蛋白基因(COL1)、OCN、OSX、RUNX2、牙本质涎磷蛋白基因(DSPP)表达降低。结论:过表达MMP1抑制SCAPs的骨/牙向分化潜能。

简介：目的研究富血小板纤维蛋白(plateletrichfibrin,PRF)对根尖牙乳头干细胞(stemcellsfromapicalpapilla,SCAP)生物学性能的作用,探讨其应用于牙髓再生治疗(regenerativeendodontictreatment,RET)、促进年轻恒牙牙根继续发育的机制。方法原代分离培养SCAP,抽取静脉血获取PRF。实验按所用PRF的体积不同分为4组:1/8PRF组、1/2PRF组、1PRF组、0PRF组(对照组)。分别收集各组PRF上清液,制备条件培养基。通过MTT法检测PRF对SCAP增殖的影响;对经不同PRF条件培养基预处理的SCAP进行成骨诱导,应用WesternBlot检测牙本质涎磷蛋白(dentinsialophosphoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白1(dentinmatrixprotein1,DMP1)、骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达水平,检测PRF对SCAP成牙本质或成骨分化的影响。结果在条件培养基培养3d和5d时,与对照组相比,实验组PRF均显著促进SCAP的增殖(P<0.05),3d和5d时,1/2PRF组促进SCAP增殖作用最强(P<0.05)。PRF条件培养基预处理的SCAP经成骨诱导后,高表达DSPP和DMP1(P<0.05)。结论PRF可显著促进SCAP增殖和向成牙本质细胞分化,为PRF应用于RET奠定了生物学基础。

简介：在适宜的环境下，根部牙乳头干细胞和成熟根髓于细胞均具有形成纤本质的能力，但二者牙本质形成能力是否处于同一水平仍不清楚。本研究分别从出牛后16天和8周大鼠的第一磨牙分离出牙根形成期的iRPSCs（根部牙乳头干细胞）和牙根发育完成期的mRPSCs（成熟根髓干细胞）。

简介：目的：探寻小鼠牙乳头来源MDPC-23细胞自发形成的体外破牙细胞的培养方法。方法MDPC-23细胞常规培养6d，利用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色法与RANKL诱导RAW264.7细胞形成的破骨细胞相比较；金相显微镜及扫描电镜（SEM）观察牙本质片上细胞形态及吸收陷窝形成情况；免疫荧光染色观察丝状肌动蛋白（F-actin）细胞骨架结构；免疫印迹、免疫荧光和（或）ELISA法检测破牙细胞形成相关蛋白RANKL、RANK、TRAF6以及破牙细胞标志蛋白TRAP、组织蛋白酶K（CathepsinK）的表达情况。CathepsinK和TRAP蛋白表达的灰度值比较采用两独立样本的t检验进行统计；0、2、4、6d四个时间点RANKL分泌水平的比较采用方差分析进行统计分析。结果MDPC-23细胞常规培养6d可自发形成少量TRAP染色阳性的多核巨细胞，其形态有别于RAW264.7细胞形成的破骨细胞；自发形成的多核巨细胞仅能在牙本质片上形成少量较浅的吸收陷窝；免疫荧光结果显示，自发形成的类破牙细胞具有破牙细胞特征性丝状肌动蛋白环结构；免疫印迹、免疫荧光和（或）ELISA结果表明，MDPC-23细胞体外常规培养下表达RANK、TRAF6蛋白并自分泌RANKL，第0、2、4、6天RANKL分泌水平总体差异有统计学意义（F=5.373，P=0.026），第2天RANKL分泌水平较第0天增加（P=0.007）；第6天TRAP及CathepsinK蛋白表达上调（tTRAP=5.033，PTRAP=0.0024；tCathepsinK=12.95，PCathepsinK=0.0002）。结论MDPC-23细胞体外常规培养下可自发形成少量吸收能力较弱的TRAP染色阳性的多核巨细胞，具有特征性肌动蛋白环结构，同时能上调破牙细胞特征性蛋白TRAP和CathepsinK表达，自分泌RANKL并表达RANK、TRAF6蛋白，是与成熟破牙细胞形态、结构及蛋白表达相似的类破牙细胞。

简介：本研究通过与根尖牙乳头来源细胞（APDCs）相比，鉴定其中干细胞／祖细胞的放射学特性。方法：从新鲜拔除的具有未成熟根尖的人类第三磨牙中分离APDCs，运用神经球培养技术，制备含有大量干细胞／祖细胞成分的多能性细胞团。经1射线照射后，对牙乳头球形成细胞（PSFCs）和APDCs进行放射敏感性和硬组织形成能力分析。

简介：摘要近年研究证实，母乳中存在不同分化阶段的干细胞，包括多能干细胞、造血干细胞和间充质干细胞等。人乳干细胞组成存在个体差异，且受分娩孕周、泌乳阶段等多因素影响。通过母乳喂养进入子代的母乳干细胞也许可以促进婴儿的生长发育。同时，人乳干细胞具有多向分化潜能，未来可能作为干细胞替代治疗的新来源，具有广泛临床应用前景。现就上述几个方面的内容展开综述。

简介：目的：比较人牙周膜干细胞（humanPeriodontalligamentstemcells,hPDLSCs）和牙髓干细胞（humanDentalpulpstemcells,hDPSCs）的表型及生长特性,为深入研究这两种细胞生物学特性提供依据。方法：组织块法培养获得原代人牙周膜细胞和牙髓细胞,采用有限稀释法分别对两者克隆化培养、分离纯化得到hPDLSCs和hDPSCs,采用倒置相差显微镜观察细胞形态、CCK8法检测细胞生长活性并绘制两者生长曲线、流式细胞技术检测干细胞表面标志物,分析比较两种细胞集落形成率（colonyformationratio,CFR）。结果：hPDLSCs和hDPSCs镜下形态相似,生长曲线均呈＂S＂形,牙周膜细胞中STRO-1表达hPDLSCs阳性率为15.88±0.48%,牙髓细胞中STRO-1表达hDPSCs阳性率为11.86±0.43%,两者无显著性差异。两种干细胞均阳性表达间充质干细胞（Mesenchymalstemcells,MSCs）表面标志物STRO-1、CD29、CD44、CD90、CD73和血管内皮标志物CD105,其中STRO-1、CD29、CD90、CD73、CD105及CD166百分率达90%以上,阴性表达造血干细胞表面标志物CD34和CD45。hDPSCs的集落形成率（4.31±0.08%）显著高于hPDLSCs的集落形成率（2.68±0.06%）（P〈0.05）。结论：hPDLSCs和hDPSCs细胞的形态相似,均高表达MSCs表面特异性标志物,hDPSCs的集落形成率显著高于hPDLSCs,说明hDPSC自我更新能力较hPDLSCs强,可为深入研究这两种干细胞提供实验依据。

简介：

简介：背景：人脐带间充质干细胞较骨髓、脂肪等来源的间充质干细胞易取材、更为原始，并不受伦理、法律的限制，是中枢神经系统损伤修复最具治疗潜力的细胞来源之一。目的：探讨重组人碱性成纤维生长因子、重组人表皮生长因子定向诱导人脐带间充质干细胞分化为神经干细胞的潜能。方法：采用碱性成纤维生长因子、表皮生长因子作为诱导剂，体外诱导人脐带间充质干细胞；在倒置显微镜下动态观察细胞形态学变化，并用免疫荧光法检测人脐带间充质干细胞向神经干细胞分化的情况，实时荧光定量PCR技术检测诱导前后神经干细胞标记蛋白巢蛋白在mRNA水平的相对表达量。结果与结论：形态学观察经诱导后的人脐带间充质干细胞呈神经干细胞球改变；免疫荧光法及实时荧光定量PCR技术均可检测到神经干细胞标记物巢蛋白，并可进一步分化表达神经元标志蛋白神经元特异性烯醇化酶、微管相关蛋白2以及神经胶质细胞蛋白、神经胶质原纤维酸性蛋白。碱性成纤维生长因子、表皮生长因子可定向诱导人脐带间充质干细胞向神经干细胞及神经元、神经胶质细胞分化。

简介：据UngrinMD2011年12月2日（BiotechnolBioeng,2011Dec2.doi：10.1002/bit.24375）报道,加拿大研究人员利用一种新技术从人多能干细胞（pluripotentstemcell,PSC）中制造出医学上有用的数量足够的内胚层细胞（endodermcell）,从而战胜开发糖尿病和肝脏疾病的再生性治疗方法过程中的一个关键性障碍,为科学家们指引通往临床应用的道路。

简介：

简介：摘要人的心、肝、脑、肾、肌肉、骨骼、皮肤等所有器官组织从何而来？医学界专家经过深入研究之后发现，它们全部来自人胚胎时期的干细胞。所以说，干细胞是具有自我复制和多项分化潜能（形成不同器官组织细胞的能力）的原始细胞，是形成人体各种组织器官的祖宗细胞。

简介：本实验在综合分析目前国内外人胚胎生殖细胞（EG细胞）的培养条件后，采用组织块培养法，以同源胚胎的成纤维细胞为饲养层，在不添加任何细胞因子的情况下，对人EG细胞进行体外培养。该培养体系确保了在培养过程中人EG细胞有充足的来源，避免了胰酶以及一些机械操作对原始生殖细胞（PGCs）的损伤，同时也避免了由于用小鼠成纤维细胞做饲养层，而对培养体系造成的异种蛋白的污染。这是关于建立人EG细胞合适的体外培养体系的一次有意义的探索。