简介：摘要白血病是一种起源于造血干细胞的恶性血液病，其特征在于增殖失控、分化障碍及凋亡受阻导致白细胞数量异常。有学者研究发现，核因子-κB（nuclear factor κB，NF-κB）信号通路在多种白血病细胞的增殖和分化等生命过程中起到关键作用，本文就NF-κB信号通路在白血病中的机制研究做一综述。

简介：摘要目的探讨褪黑素（melatonin, MEL）对脂多糖（lipopolysaccharides，LPS）诱导的SD幼鼠大脑星形胶质细胞活化及远期焦虑样行为的影响。方法将新生鼠随机（随机数字法）分为对照组（CON）组、LPS组、LPS+MEL组。LPS组：腹腔注射P1d幼鼠LPS(1 mg/kg)制作脓毒症模型，CON组仅注射等体积生理盐水，LPS+MEL组于建模0.5 h后注射MEL溶液10 mg/kg。在各组注射后不同时间点分为3 d、7 d、28 d三个亚组。免疫荧光染色和Western Blot法检测三组3 d、7 d后胼胝体内GFAP、TNF-α的表达变化；采用旷场实验检测28 d动物焦虑样行为。细胞实验以LPS（1 μg/mL）诱导原代星形胶质细胞为细胞模型, 随机分为对照组、LPS组、LPS+MEL组和LPS+MEL+褪黑素受体抑制剂（Luzindole，LUZ）组, 采用免疫荧光观察各组GFAP、TNF-α表达情况，Western Blot法检测GFAP、TNF-α、p-NF-κBp65、NF-κBp65蛋白表达，荧光定量PCR检测对照组、LPS组、LPS+MEL组神经营养因子GDNF、BDNF mRNA的表达。计量资料多组间比较采用单因素及双因素方差分析，以P<0.05为差异有统计学意义。结果与CON组相比，LPS组中央区活动时间、中央路程/总路程比例下降，MEL干预可明显改善LPS组大鼠焦虑样行为；与LPS组相比，MEL组可降低LPS注射后3 d、7 d胼胝体内GFAP、TNF-α的表达（P<0.05）。与LPS刺激组相比，MEL可降低星形胶质细胞GFAP、TNF-α、p-NF-κBp65的表达上调(P<0.05)，该效应可被LUZ所阻断(P<0.05)。此外，与LPS组相比，MEL预处理原代星形胶质细胞可逆转LPS诱发的GDNF、BDNF表达下调(P<0.05)。结论褪黑素可改善LPS诱导的脓毒症新生鼠远期焦虑样行为，其作用机制可能是通过NF-κB途径抑制星形胶质细胞活化及炎症反应有关。

简介：摘要目的评价过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)/NF-κB信号通路在丁酸钠减轻小鼠肠缺血再灌注损伤中的作用。方法SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠32只，7~9周龄，体重20~25 g，采用随机数字表法分为4组(n＝8)：假手术组(Sham组)、肠缺血再灌注组(IIR组)、丁酸钠组(NaB组)和PPARγ抑制剂GW9662组(GW9662组)。采用夹闭肠系膜上动脉根部45 min后恢复灌注2 h的方法制备小鼠肠缺血再灌注损伤模型。GW9662组于缺血前1 h腹腔注射GW9662 2 mg/kg，NaB组和GW9662组于缺血前30 min腹腔注射丁酸钠500 mg/kg。于再灌注2 h时，心脏穿刺采集血标本，然后处死小鼠，取肠组织，光镜下观察肠黏膜损伤情况并行Chiu评分；采用ELISA法检测血清和小肠组织二胺氧化酶(DAO)、IL-6及TNF-α水平；采用Western blot法检测小肠组织PPARγ和NF-κB p65的表达水平。结果与Sham组比较，IIR组Chiu评分升高，血清和小肠组织DAO、TNF-α、IL-6水平升高，PPARγ表达下调，NF-κB p65表达上调(P<0.05)；与IIR组比较，NaB组小鼠Chiu评分、血清和小肠组织DAO、TNF-α、IL-6水平降低，PPARγ表达上调，NaB组及GW9662组NF-κB p65表达下调(P<0.05)；与NaB组比较，GW9662组Chiu评分、血清和小肠组织DAO、TNF-α、IL-6水平升高，PPARγ表达下调，NF-κB p65表达上调(P<0.05)。结论丁酸钠减轻肠缺血再灌注损伤的机制可能与激活PPARγ/NF-κB信号通路，抑制炎症反应有关。

简介：摘要目的研究咪唑安定对结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响，并探讨其机制是否与调控微小RNA-4458（miR-4458）/核因子κB（nuclear factor κB，NF-κB）通路有关。方法本研究于2019年12月至2020年10月开展实验。用不同浓度咪唑安定处理结肠癌细胞SW620，噻唑蓝法、Transwell实验检测SW620细胞增殖、迁移和侵袭，蛋白质印迹法检测细胞周期素D1（CyclinD1）、基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase 2，MMP2）、MMP9、磷酸化的NF-κBp65（phosphorylated NF-κB p65，p-p65）和磷酸化的NF-κB抑制蛋白-α（phosphorylated NF-κB inhibitory protein-α，p-IкBα）表达，实时定量聚合酶链反应分析miR-4458表达。转染miR-4458抑制物至SW620细胞，采用上述方法评估抑制miR-4458表达对SW620细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果咪唑安定处理显著降低SW620细胞增殖活力［（0.843±0.05）、（0.611±0.04）、（0.527±0.03）比（1.089±0.07）］、迁移能力［（147±10.49）个、（117±8.06）个、（83±6.13）个比（179±13.07）个］和侵袭能力［（113±8.67）个、（89±4.71）个、（61±3.79）个比（136±9.14）个］（均P＜0.05），并下调CyclinD1［（0.70±0.05）、（0.51±0.03）、（0.44±0.03）比（0.83±0.07）］、MMP2［（0.73±0.05）、（0.56±0.04）、（0.45±0.03）比（0.91±0.07）］、MMP9［（0.58±0.04）、（0.41±0.03）、（0.34±0.02）比（0.76±0.06）］、p-p65［（0.70±0.05）、（0.57±0.04）、（0.43±0.03）比（0.83±0.07）］和p-IкBα［（0.61±0.04）、（0.48±0.04）、（0.37±0.02）比（0.71±0.05）］蛋白的表达（均P＜0.05），上调miR-4458［（1.43±0.10）、（1.89±0.15）、（2.01±0.14）比（1.00±0.08）］表达（均P＜0.05）。抑制miR-4458表达显著增加SW620细胞增殖活力［（1.428±0.11）比（1.093±0.08）］、迁移能力［（237±19.76）个比（183±14.55）个］和侵袭能力［（179±14.12）个比（131±8.14）个］（均P＜0.05），上调CyclinD1［（1.37±0.11）比（0.85±0.06）］、MMP2［（1.58±0.12）比（0.93±0.08）］和MMP9［（1.11±0.09）比（0.77±0.06）］蛋白表达（均P＜0.05）。抑制miR-4458表达可减弱咪唑安定对SW620细胞增殖活力［（0.978±0.07）比（0.534±0.04）］、迁移能力［（173±9.84）个比（87±5.73）个］、侵袭能力［（143±11.04）个比（65±4.13）个］以及CyclinD1［（0.81±0.06）比（0.43±0.02）］、MMP2［（0.89±0.08）比（0.48±0.03）］和MMP9［（0.75±0.05）比（0.36±0.02）］蛋白表达的抑制作用（均P＜0.05）。抑制NF-κB通路可逆转抑制miR-4458表达对咪唑安定处理的SW620细胞增殖［（0.547±0.03）比（0.978±0.07）］、迁移［（76±4.19）个比（173±9.84）个］和侵袭［（61±4.05）个比（143±11.04）个］的影响（均P＜0.05）。结论咪唑安定通过上调miR-4458和抑制NF-κB活化对结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭产生抑制作用。

简介：摘要目的检测不育症男性患者精浆核因子κB(NF-κB) 、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及生殖道解脲支原体(UU)的含量，探讨其与不育症的关系。方法抽取2015年8月至2018年6月在连云港市第二人民医院就诊的男性不育症患者53例作为观察组，根据UU检测结果分为UU阳性不育组(30例)和UU阴性不育组(23例)。另抽取同期于医院体检且过去2年内有生育史的健康男性27例为对照组。采用硝酸还原酶法检测精浆一氧化氮(NO)含量，流式细胞仪微球捕获芯片技术(CBA)检测精浆NF-κB、IL-17、IL-6、TNF-α含量，脲酶显色法检测UU含量，并结合计算机辅助精子分析系统对精液常规参数进行分析。结果UU阳性不育组精浆NO、NF-κB、IL-17、IL-6和TNF-α浓度高于UU阴性不育组(P<0.01)；UU阴性不育组精浆NO、NF-κB、IL-17、IL-6和TNF-α浓度高于对照组(P<0.01)。UU阳性不育组精液pH值、精子浓度、形态正常率、存活率、前向运动率均低于UU阴性不育组和对照组(P均<0.01)。男性精液中NO浓度与NF-κB、IL-17、IL-6、TNF-α浓度呈正相关(R2＝0.8264、0.9642、0.9143、0.9530，P均< 0.01)。结论UU感染引起男性精浆NO浓度的增高和异常NF-κB、IL-17、IL-6、TNF-α的表达，各因子间的失衡与男性不育有关，可以作为男性不育的辅助鉴别诊断指标。

简介：摘要目的探究着丝粒蛋白-A（CENP-A）对卵巢癌（OC）细胞侵袭、迁移的影响，并探讨相关机制。方法体外培养OC细胞系A2780细胞株，分为NG组（空白对照组）、pcDNA组（阴性转染组，转染pcDNA载体质粒）、pcDNA-CENP-A组（过表达CENP-A组，转染pcDNA-CENP-A载体质粒）、通路抑制剂组（转染pcDNA-CENP-A+PI3K通路抑制剂LY294002）。采用CCK-8法检测细胞增殖情况，划痕实验、Transwell实验分别检测细胞迁移、侵袭能力；免疫印迹法检测CENP-A蛋白、迁移、侵袭相关蛋白E-钙粘附蛋白（E-cadherin）、N-钙粘附蛋白（N-cadherin）及磷脂肌醇3-激酶/蛋白激酶B/核转录因子kappa B（PI3K/AKT/NF-κB）通路相关蛋白表达情况。结果A2780细胞成功转染。24 h后，随着培养时间延长，与NG组[（0.50±0.07）、（0.72±0.11）、（0.99±0.14）]、pcDNA组[（0.55±0.08）、（0.78±0.12）、（1.02±0.15）]比较，pcDNA-CENP-A组[（0.78±0.12）、（1.03±0.15）、（1.67±0.25）]、通路抑制剂组[（0.63±0.09）、（0.87±0.13）、（1.39±0.20）]A2780细胞存活力显著增加（P<0.05），与pcDNA-CENP-A组比较，通路抑制剂组A2780细胞存活力显著降低（P<0.05），呈时间依赖性。与NG组[（15.83±1.46）%、（105.32±15.78）个]、pcDNA组[（16.79±1.46）%、（108.98±16.35）个]比较，pcDNA-CENP-A组、通路抑制剂组A2780细胞迁移率[（37.96±5.80）%、（25.15±2.19）%]、侵袭数[（327.87±49.18）个、206.53±30.97）个]、CENP-A、N-cadherin、Vimentin、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、NF-κB、白细胞介素（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）蛋白表达显著增加或升高（P<0.05），E-cadherin蛋白表达显著降低（P<0.05）；与pcDNA-CENP-A组比较，通路抑制剂组A2780细胞迁移率、侵袭数、CENP-A、N-cadherin、Vimentin、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、NF-κB、IL-1β、TNF-α蛋白表达显著减少或或降低（P<0.05），E-cadherin蛋白表达显著升高（P<0.05）。结论过表达CENP-A表达可促进卵巢癌细胞增殖、侵袭及迁移，可能是通过激活PI3K/AKT/NF-κB信号通路实现的。

简介：摘要目的探究碘化钾诱导甲状腺滤泡细胞焦亡的分子机制。方法ELISA检测桥本甲状腺炎合并甲状腺癌组织中焦亡指标白细胞介素(interleukin, IL)-1β及IL-18的含量，以癌旁桥本甲状腺炎组织为对照；Western印迹检测焦亡标志性蛋白焦孔素(gasdermin, GSDM)的活化情况。碘化钾作用于甲状腺滤泡细胞，检测细胞焦亡IL-1β、IL-18、乳酸脱氢酶(LDH)的分泌及GSDM蛋白的活化及分子机制；转录组芯片分析高浓度碘化钾诱导甲状腺滤泡细胞差异性表达的分子及其在焦亡中的作用机制。结果桥本甲状腺炎合并甲状腺癌组织中IL-1β和IL-18细胞因子含量较同一患者癌旁桥本甲状腺炎组织显著升高(P<0.01)，且焦亡标志性蛋白GSDMD的活化显著，而GSDME无显著活化改变。高浓度碘化钾作用于甲状腺滤泡细胞后，通过激活核因子-κB (NF-κB)/NLRP3信号轴诱导IL-1β、IL-18、LDH的分泌(P<0.01)和GSDMD活化，使甲状腺滤泡细胞发生焦亡。转录组芯片分析发现，甲状腺滤泡细胞受高浓度碘化钾刺激后PARP1蛋白表达显著上调，并通过调控NF-κB转录因子的活性促进细胞焦亡。结论本研究发现高浓度碘化钾通过促进PARP1蛋白表达，诱导甲状腺滤泡细胞NF-κB/NLRP3炎症小体的活化，从而诱导甲状腺滤泡细胞发生炎症性焦亡。

简介：摘要目的探讨臭氧水关节腔注射治疗膝关节骨关节炎（knee osteoarthritis，KOA）对关节软骨损伤的修复作用及其内在的修复机制。方法将48只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、生理盐水对照组和臭氧水组共4组，每组各12只。除空白组外，余各组采用木瓜蛋白酶关节腔注射建立KOA模型。取关节软骨行HE染色确认造模成功后，臭氧水组和生理盐水组分别行臭氧水和生理盐水关节注射治疗，每周1次，连续3周，空白组和模型组则不进行干预。分别于治疗前、后行大鼠膝关节行为学评分、治疗后行关节软骨表面大体评分、软骨组织HE染色及改良Mankin评分、Western blot和Rt-PCR分别检测软骨NF-κBp65（P65）、IKKβ及IκBα的mRNA和蛋白表达。结果与模型组和生理盐水组相比，治疗后臭氧水组大鼠的膝关节行为学评分显著降低（均P<0.05）；与模型组和生理盐水对照组相比，臭氧水组大鼠关节软骨表面大体评分、改良的Mankin评分均显著降低（均P<0.05）；与模型组和生理盐水组相比，臭氧水组大鼠软骨组织P65和IKKβ的mRNA和蛋白表达明显降低（均P<0.05），IκBα的mRNA和蛋白表达均明显升高（均P<0.05）。结论臭氧水关节腔注射治疗KOA能有效修复损伤的关节软骨，其修复机制可能是通过调控NF-κB信号通路而实现的。

简介：摘要目的观察复方肿节风雾化剂对慢性咽炎模型大鼠的影响，探讨其作用机制。方法将60只SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、阳性药物组及复方肿节风雾化剂低、中、高剂量组，每组10只。除正常组外，其余各组采用咽部注射A族乙型溶血性链球菌(group A beta-hemolytic streptococcus, GAS)法建立细菌性慢性咽炎大鼠模型。造模成功后，复方肿节风雾化剂低、中、高剂量组分别用2.33、4.66、9.32 g/kg复方肿节风雾化剂进行超声雾化，正常组与模型组予同体积生理盐水雾化，阳性药物组腹腔注射氨苄西林钠0.93 g/kg，1次/d，连续干预14 d。采用HE染色法检测咽部黏膜病理形态学改变，ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平，采用免疫组化染色法检测咽部黏膜组织TLR-4、髓样细胞分化因子88(myeloid differentiation factor88, MyD88)、NF-κB p65蛋白表达，RT-qPCR法检测咽部黏膜组织TLR-4、MyD88、NF-κB p65 mRNA表达。结果HE染色显示，复方肿节风雾化剂各剂量组随药物剂量升高，炎性细胞浸润情况逐步缓解；与模型组比较，阳性药物组及复方肿节风雾化剂低、中、高剂量组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低(P<0.05)，咽黏膜组织TLR-4、MyD88、NF-κB p65蛋白积分光密度值降低(P<0.05)；阳性药物组及中、高剂量组大鼠咽黏膜组织TLR-4[(1.17±0.41)、(2.44±1.06)、(1.25±0.34)比(3.87±1.43)]、MyD88[(1.15±0.53)、(1.75±0.36)、(1.09±0.14)比(2.44±0.19)]、NF-κB p65[(1.97±0.51)、(2.64±0.26)、(2.31±0.44)比(5.08±0.34)]mRNA表达降低(P<0.05)。结论复方肿节风雾化剂可通过抑制慢性咽炎模型大鼠TLR-4、MyD88、NF-κB p65表达来降低炎性细胞因子水平，从而发挥抗炎作用。

简介：摘要目的探讨磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，AKT）/核因子κB（NF-κB）信号通路在人肾小管上皮细胞（human kideny-2，HK-2）-尿酸性肾病细胞模型中表达水平变化及其作用机制。方法体外培养HK-2细胞，随机分为对照组及实验组。实验组经高尿酸（720 μmol/L）浸泡48 h建立体外尿酸性肾病细胞模型，分为高尿酸处理组、过表达蛋白激酶活化受体2（protease activated receptor 2，PAR2）组和敲减PAR2组。实时定量PCR法检测HK-2细胞PAR2、PI3K、AKT、NF-κB的mRNA表达水平，Western印迹法检测HK-2细胞PAR2、PI3K、AKT、NF-κB蛋白表达水平，酶联免疫吸附法检测上清液肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein-1，MCP-1）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白细胞介素-1β前体（pro-interleukin-1β，pro-IL-1β）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）表达水平。结果（1）与对照组相比，高尿酸处理组HK-2细胞中PAR2、PI3K、AKT、NF-κB的mRNA及蛋白表达增加（均P<0.05），上清液中TNF-α、MCP-1、IL-6、pro-IL-1β、IL-1β、TGF-β1增加（均P<0.01）。（2）与高尿酸处理组相比，过表达PAR2组HK-2细胞中PAR2、PI3K、AKT、NF-κB的mRNA及蛋白表达明显增加（均P<0.05），上清液中TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-1β、TGF-β1明显增加（均P<0.05）。（3）与高尿酸处理组相比，敲减PAR2组HK-2细胞PAR2、PI3K、AKT、NF-κB的mRNA及蛋白表达明显下降（均P<0.05），上清液中IL-6、pro-IL-1β、IL-1β、TGF-β1明显减少（均P<0.05）。结论尿酸致肾脏HK-2细胞损伤过程中，尿酸通过激活PAR2显著上调PI3K/AKT/NF-κB信号通路表达，导致HK-2细胞炎症损伤明显加重。敲减PAR2抑制PI3K/AKT/NF-κB信号通路，可有效减轻HK-2细胞炎症损伤。

简介：摘要目的本研究旨在探讨葛根素对人肾组织性缺氧/复氧(H/R)诱导的急性肾损伤的体外保护作用。方法利用肾小管上皮细胞(HK 2)细胞和H/R处理模拟缺血再灌注损伤的体外实验。实验分为对照组(Control)、H/R处理组(0、6、12和24 h)、H/R 24 h +葛根素处理组、H/R 24 h +葛根素+ 3-甲基腺嘌呤(3-MA，Ⅲ类磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂)处理组、H/R 24 h + 3-MA处理组。采用免疫印迹法(WB)检测自噬相关蛋白的表达变化，用细胞计数试剂-8(CCK-8)检测细胞增殖情况，电子显微镜检测自噬体形成，原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测凋亡。结果与对照组相比，H/R处理组(24 h)微管相关轻链3-II(LC3-II)的表达增加，且自噬标志物P62的表达减少，自噬体数目增多，细胞活力降低，细胞出现炎症反应。葛根素作用与3-MA作用接近，与H/R处理组(24 h)相比，加入葛根素处理后可逆转H/R诱导的LC3、P62表达水平变化(P<0.05)，表现为细胞活力增加，降低了自噬体数目，减轻了细胞凋亡(P<0.05)。同时高迁移率族蛋白1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)和活化B淋巴细胞的核因子κ-轻链增强子(NF-κB)的蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论葛根素可以通过HMGB1/TLR4/NF-κB轴抑制自噬来减轻体外模型的缺血再灌注损伤。

简介：摘要目的探讨产妇子宫平滑肌组织中谷胱甘肽过氧化酶1（GPX1）及核因子-κB（NF-κB）表达水平与宫缩乏力性产后出血的相关性。方法选取2019年2月至2020年1月在本院分娩后发生产后出血的48例产妇作为观察组，并选择同期分娩的正常产妇48例为对照组，分别取两组产妇子宫平滑肌组织进行分析测定，对两组子宫平滑肌收缩功能、出血量、mRNA及蛋白表达结果进行对比。结果经过测定发现，子宫平滑肌收缩幅度对照组大于观察组（P＜0.001），观察组收缩频率及活动力均较对照组低（均P＜0.001）；对照组出血量为（286.71±56.38）ml，观察组为（597.84±87.62）ml，观察组出血量更大（P＜0.001）；经过比较发现，观察组平滑肌组织中GPX1 mRNA表达及蛋白表达均显著低于对照组（均P＜0.001），NF-κB mRNA表达及蛋白表达均显著高于对照组（均P＜0.001）。结论对子宫平滑肌中GPX1水平及NF-κB水平进行有效调节，能够提高子宫平滑肌收缩功能，进而抑制宫缩乏力性产后出血，对产后出血的预防及治疗具有重要意义。

简介：摘要目的探讨正五聚蛋白3(PTX3)对小儿神经母细胞瘤细胞增殖、侵袭和耐药的影响及其作用机制。方法将si-RNA(si-RNA组)、si-PTX3(si-PTX3组)、siRNA＋pcDNA3.1(siRNA＋pcDNA3.1组)、si-PTX3＋pcDNA3.1(si-PTX3＋pcDNA3.1组)、siRNA＋pcDNA3.1-TLR4(siRNA＋pcDNA3.1-TLR4组)和si-PTX3＋pcDNA3.1-TLR4(si-PTX3＋pcDNA3.1-TLR4组)转染至SH-SY5Y细胞中。收集2016年7月至2019年8月就诊于驻马店市中心医院的小儿神经母细胞瘤患儿的肿瘤组织和癌旁正常组织32例。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和免疫组化检测小儿神经母细胞瘤组织和癌旁正常组织中PTX3 mRNA和蛋白的表达水平，EdU增殖实验检测各组SH-SY5Y细胞增殖能力，Western blot检测血管内皮生长因子(VEGF)、耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白1(MRP-1)以及基质金属蛋白酶1(MMP-1)的表达水平。结果小儿神经母细胞瘤组织中PTX3 mRNA的表达水平为0.87±0.07，高于癌旁正常组织(0.13±0.06, P<0.05)；免疫组化检测PTX3蛋白的表达情况与qRT-PCR结果一致。si-PTX3组细胞中PTX3 mRNA和蛋白的表达水平分别为0.25±0.05和0.45±0.66，低于si-RNA组(分别为0.95±0.08和1.02±0.10；均P<0.05)。si-PTX3组细胞EdU阳性率、侵袭率、VEGF、MMP-1、P-gp和MRP-1蛋白的表达水平分别为(19.73±1.22)%、(8.45±1.06)%、0.25±0.05、0.19±0.03、0.19±0.06和0.16±0.07，均低于si-RNA组[分别为(31.86±1.86)%、(28.12±2.96)%、0.58±0.07、0.44±0.06、0.46±0.08和0.51±0.05；均P<0.05]。si-PTX3＋pcDNA3.1组细胞EdU阳性率、侵袭率、VEGF、P-gp蛋白、TLR4、p-p65蛋白的表达水平分别为(19.49±1.68)%、(8.48±1.36)%、0.10±0.15、0.18±0.07、0.45±0.06、0.25±0.05，均低于siRNA＋pcDNA3.1组[分别为(38.21±2.67)%、(26.39±2.14)%、0.49±0.05、0.52±0.06、0.93±0.14和0.82±0.06；均P<0.05]。siRNA＋pcDNA3.1-TLR4组细胞EdU阳性率、侵袭率、VEGF、P-gp、TLR4和p-p65蛋白的表达水平分别为(62.73±5.18)%、(50.45±3.25)%、2.17±0.17、2.15±0.16、2.68±0.16、2.48±0.13，均高于siRNA＋pcDNA3.1组(均P<0.05)。结论降低PTX3的表达能抑制小儿神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的增殖和侵袭能力，并降低其耐药性，其作用机制可能是通过调控TLR4/NF-κB信号通路来实现，为小儿神经母细胞瘤的诊断和临床治疗提供新视角。

简介：摘要目的探讨正五聚蛋白3(PTX3)对小儿神经母细胞瘤细胞增殖、侵袭和耐药的影响及其作用机制。方法将si-RNA(si-RNA组)、si-PTX3(si-PTX3组)、siRNA＋pcDNA3.1(siRNA＋pcDNA3.1组)、si-PTX3＋pcDNA3.1(si-PTX3＋pcDNA3.1组)、siRNA＋pcDNA3.1-TLR4(siRNA＋pcDNA3.1-TLR4组)和si-PTX3＋pcDNA3.1-TLR4(si-PTX3＋pcDNA3.1-TLR4组)转染至SH-SY5Y细胞中。收集2016年7月至2019年8月就诊于驻马店市中心医院的小儿神经母细胞瘤患儿的肿瘤组织和癌旁正常组织32例。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和免疫组化检测小儿神经母细胞瘤组织和癌旁正常组织中PTX3 mRNA和蛋白的表达水平，EdU增殖实验检测各组SH-SY5Y细胞增殖能力，Western blot检测血管内皮生长因子(VEGF)、耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白1(MRP-1)以及基质金属蛋白酶1(MMP-1)的表达水平。结果小儿神经母细胞瘤组织中PTX3 mRNA的表达水平为0.87±0.07，高于癌旁正常组织(0.13±0.06, P<0.05)；免疫组化检测PTX3蛋白的表达情况与qRT-PCR结果一致。si-PTX3组细胞中PTX3 mRNA和蛋白的表达水平分别为0.25±0.05和0.45±0.66，低于si-RNA组(分别为0.95±0.08和1.02±0.10；均P<0.05)。si-PTX3组细胞EdU阳性率、侵袭率、VEGF、MMP-1、P-gp和MRP-1蛋白的表达水平分别为(19.73±1.22)%、(8.45±1.06)%、0.25±0.05、0.19±0.03、0.19±0.06和0.16±0.07，均低于si-RNA组[分别为(31.86±1.86)%、(28.12±2.96)%、0.58±0.07、0.44±0.06、0.46±0.08和0.51±0.05；均P<0.05]。si-PTX3＋pcDNA3.1组细胞EdU阳性率、侵袭率、VEGF、P-gp蛋白、TLR4、p-p65蛋白的表达水平分别为(19.49±1.68)%、(8.48±1.36)%、0.10±0.15、0.18±0.07、0.45±0.06、0.25±0.05，均低于siRNA＋pcDNA3.1组[分别为(38.21±2.67)%、(26.39±2.14)%、0.49±0.05、0.52±0.06、0.93±0.14和0.82±0.06；均P<0.05]。siRNA＋pcDNA3.1-TLR4组细胞EdU阳性率、侵袭率、VEGF、P-gp、TLR4和p-p65蛋白的表达水平分别为(62.73±5.18)%、(50.45±3.25)%、2.17±0.17、2.15±0.16、2.68±0.16、2.48±0.13，均高于siRNA＋pcDNA3.1组(均P<0.05)。结论降低PTX3的表达能抑制小儿神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的增殖和侵袭能力，并降低其耐药性，其作用机制可能是通过调控TLR4/NF-κB信号通路来实现，为小儿神经母细胞瘤的诊断和临床治疗提供新视角。

简介：摘要目的探讨低分子肝素(LMWH)对氧糖剥夺(OGD)诱导的PC12细胞炎症反应的影响及相关机制。方法体外培养神经细胞株PC12，随机分为Sham(对照)组、OGD组、LMWH组及阻断剂组，其中阻断剂组又分为：Eritoran+OGD组、LMWH+Eritoran+OGD组、ST2825+OGD组、LMWH+ST2825+OGD组、吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)+OGD组及LMWH+PDTC+OGD组；建立OGD细胞模型，应用CCK-8法检测细胞活力，应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测Toll样受体4(TLR4)、MyD88和核因子κB(NF-κB)的mRNA和蛋白表达情况，ELISA法检测IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和S100β的浓度变化。结果OGD组第1、2、3天的细胞活性较Sham组明显降低(P<0.05)，LMWH处理后，可显著提高PC12细胞OGD后第2、3天的细胞活性(P<0.05)，但较Sham组低。与Sham组相比，OGD组中TLR4、MyD88及NF-κB的mRNA表达量明显升高(F＝144.9，710.5，79.51，P<0.01)，当用LMWH处理后三种物质mRNA表达量下降，与OGD组比较差异均有统计学意义(P<0.01)，且TLR4/MyD88/NF-κB通路的特异性阻断剂Eritoran、ST2825、PDTC均可强化LMWH的抗炎作用。TLR4、MyD88及NF-κB的蛋白表达量同基因相一致。OGD组IL-1β、IL-6、TNF-α和S100β的表达显著高于Sham组(P<0.05)；LMWH组其表达被抑制，与OGD组比较差异均有统计学意义(P<0.05)，应用Eritoran、ST2825和PDTC分别阻断TLR4、MyD88和NF-κB，炎症因子和S100β的浓度明显降低，但仍高于Sham组(P<0.05)。结论OGD会导致PC12细胞病理性损伤，S100β含量增多，炎症反应加重；应用LMWH可以改善细胞活性，下调炎症反应程度，对细胞有保护作用，同时使用TLR4/MyD88/NF-κB通路各个环节的抑制剂后，OGD上调炎症因子的作用皆被不同程度地抑制，提示LMWH可能通过TLR4/MyD88/NF-κB通路调节OGD诱导的PC12细胞的炎症反应。

简介：摘要目的研究肾安汤通过调节TLR4/NF-κB信号通路对顺铂诱导的大鼠肾损伤的保护作用，探讨其作用机制。方法将60只SD大鼠按体重分为空白组、模型组、阳性对照组、肾安汤高剂量组、肾安汤中剂量组、肾安汤低剂量组，每组10只。除空白组外，其余各组采用腹腔注射顺铂7.5 mg/kg制备急性肾损伤大鼠模型。造模后，肾安汤高、中、低剂量组分别灌胃肾安汤水煎液0.698、1.395、2.790 g/ml，阳性对照组灌胃盐酸贝那普利混悬液5 mg/kg，1次/d，连续灌胃14 d。采用HE染色观察各组大鼠肾组织病理学改变，采用ELISA法检测各组大鼠血清BUN、肌酐(Cr)、胱抑素C(Cys-c)及TNF-α、IL-6水平，Western-blot法检测肾组织TLR-4、NF-κB p65、髓样分化因子(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)蛋白表达。结果与模型组比较，肾安汤低、中、高剂量组大鼠一般生长情况明显改善，肾脏系数降低(P<0.05)；肾安汤低、中、高剂量组大鼠血清BUN、Cr、Cys-c、TNF-α、IL-6水平降低(P<0.05)，肾组织中TLR-4[(0.54±0.07)、(0.52±0.09)、(0.41±0.04)比(0.86±0.06)]、NF-κB p65[(0.74±0.02)、(0.72±0.06)、(0.67±0.05)比(0.93±0.03)]、MyD88[(0.86±0.02)、(0.82±0.03)、(0.61±0.02)比(1.04±0.03)]、TRAF-6[(0.65±0.04)、(0.58±0.08)、(0.54±0.07)比(0.90±0.06)]蛋白表达下调(P<0.05)，且具有一定的浓度依赖性。结论肾安汤可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路，减轻顺铂诱导的大鼠肾损伤病理改变，从而保护大鼠肾功能。

简介：摘要目的探讨低分子肝素(LMWH)对氧糖剥夺(OGD)诱导的PC12细胞炎症反应的影响及相关机制。方法体外培养神经细胞株PC12，随机分为Sham(对照)组、OGD组、LMWH组及阻断剂组，其中阻断剂组又分为：Eritoran+OGD组、LMWH+Eritoran+OGD组、ST2825+OGD组、LMWH+ST2825+OGD组、吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)+OGD组及LMWH+PDTC+OGD组；建立OGD细胞模型，应用CCK-8法检测细胞活力，应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测Toll样受体4(TLR4)、MyD88和核因子κB(NF-κB)的mRNA和蛋白表达情况，ELISA法检测IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和S100β的浓度变化。结果OGD组第1、2、3天的细胞活性较Sham组明显降低(P<0.05)，LMWH处理后，可显著提高PC12细胞OGD后第2、3天的细胞活性(P<0.05)，但较Sham组低。与Sham组相比，OGD组中TLR4、MyD88及NF-κB的mRNA表达量明显升高(F＝144.9，710.5，79.51，P<0.01)，当用LMWH处理后三种物质mRNA表达量下降，与OGD组比较差异均有统计学意义(P<0.01)，且TLR4/MyD88/NF-κB通路的特异性阻断剂Eritoran、ST2825、PDTC均可强化LMWH的抗炎作用。TLR4、MyD88及NF-κB的蛋白表达量同基因相一致。OGD组IL-1β、IL-6、TNF-α和S100β的表达显著高于Sham组(P<0.05)；LMWH组其表达被抑制，与OGD组比较差异均有统计学意义(P<0.05)，应用Eritoran、ST2825和PDTC分别阻断TLR4、MyD88和NF-κB，炎症因子和S100β的浓度明显降低，但仍高于Sham组(P<0.05)。结论OGD会导致PC12细胞病理性损伤，S100β含量增多，炎症反应加重；应用LMWH可以改善细胞活性，下调炎症反应程度，对细胞有保护作用，同时使用TLR4/MyD88/NF-κB通路各个环节的抑制剂后，OGD上调炎症因子的作用皆被不同程度地抑制，提示LMWH可能通过TLR4/MyD88/NF-κB通路调节OGD诱导的PC12细胞的炎症反应。

简介：摘要目的探讨具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum，Fn)感染促进TNF-α诱导的结直肠癌细胞HCT116炎症改变的机制。方法建立Fn感染细胞及TNF-α炎症诱导模型并分为4组，即未感染对照组、Fn感染组、TNF-α诱导组、Fn+TNF-α组。首先用Fn感染正常结肠上皮细胞hcoEPIC和结直肠癌细胞HCT116、LoVo，分别检测Fn对不同结肠细胞的黏附情况。TNF-α诱导HCT116细胞3 h后加入Fn感染，24 h后分别用CCK8试验和乳酸脱氢酶(LDH)活力测定法检测细胞存活率及细胞损伤情况。ELISA法检测细胞内和细胞培养上清中核转录因子(NF-κB)和细胞因子(IL-6、IL-8、IL-1β)的表达。结果Fn对结直肠癌细胞HCT116和LoVo的黏附性较强(P<0.05)，但基本不表现出侵袭，反而在24 h后对正常结肠上皮细胞hcoEPIC有较高侵袭率。与未感染Fn组相比，Fn感染组细胞存活率显著降低，细胞损伤增加(P<0.001)。在TNF-α诱导3 h后，Fn感染进一步促进了细胞死亡和损伤(P<0.001)。Fn感染和TNF-α单独处理组的NF-κB表达显著高于未感染组(P<0.001, P<0.05)，Fn+TNF-α组的NF-κB表达显著高于对照组和单独处理组(P<0.001)。Fn感染和TNF-α单独处理组中，IL-6和IL-8的表达均显著高于未感染组(P<0.001)，IL-1β无明显改变(P>0.05)。Fn+TNF-α组中IL-6、IL-8、IL-1β的表达均显著高于正常对照组和单独处理组(P<0.05)。结论Fn能够优先黏附于结直肠癌细胞HCT116上，进而促进TNF-α诱导的细胞损伤、死亡和NF-κB及其下游促炎性细胞因子IL-6、IL-8、IL-1β的表达和释放。

简介：摘要目的观察长链非编码RNA(lncRNA)PEBP1P2在肾细胞癌组织中的表达及对肾细胞癌细胞增殖和迁移的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测51例肾细胞癌组织及肾细胞癌细胞株中PEBP1P2的表达。以PEBP1P2表达最低的A498细胞为转染对象，设转染PEBP1P2质粒的细胞为PEBP1P2组，转染阴性对照质粒的细胞为NC组。qPCR检测两组细胞PEBP1P2的表达。MTT法和Transwell迁移实验检测肾细胞癌细胞的增殖能力和迁移能力。qPCR和Western blotting法分别检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶招募域家族分子10(CARD10)基因及NF-κB通路蛋白的表达。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示，组间比较采用LSD-t检验。结果肾细胞癌组织中PEBP1P2的表达低于癌旁组织(t＝4.89，P<0.01)。肾细胞癌细胞中PEBP1P2的表达低于正常肾小管上皮细胞(P<0.01)。PEBP1P2组和NC组A498细胞中PEBP1P2表达分别为(11.01±1.26)和(1.06±0.19)，PEBP1P2组明显高于NC组(t＝7.81，P<0.01)。过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌细胞的增殖能力(P<0.05)和迁移能力(t＝3.65，P<0.05)。过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌A498细胞中CARD10基因的表达(t＝6.83，P<0.01)，抑制NF-κB信号通路蛋白的转导。结论PEBP1P2在肾细胞癌组织表达明显降低，过表达PEBP1P2可显著抑制肾细胞癌A498细胞的增殖和迁移能力，其分子机制可能是PEBP1P2通过下调CARD10基因表达抑制NF-κB信号通路转导。

简介：摘要目的探究高压氧治疗(hyperbaric oxygen therapy，HBOT)对病毒性脑炎患儿神经功能、血清辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells，Treg)水平以及Toll样受体2(Toll-like receptor 2，TLR2)/核因子κB(nuclear factor-kappa-B，NF-κB)通路的影响。方法选择重庆市大渡口区人民医院儿科2017年4月至2019年4月收治的病毒性脑炎患儿76例作为研究对象，按随机数字表法分为对照组和HBOT组(每组38例)。对照组患儿接受常规治疗，HBOT组在对照组基础上联合HBOT。对比2组的临床治疗效果、脑电图(EEG)检查结果、简易智力状态检查量表(mini-mental state examination, MMSE)、血清炎性因子、中枢神经特异性蛋白(central nerve specific protein，S100β)、神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase，NSE)、外周血Th17/Treg以及TLR2/NF-κB通路水平。治疗前2组各项指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结果HBOT组临床症状持续时间均显著短于对照组(P<0.05)，HBOT组癫痫发作次数显著少于对照组(P<0.05)。治疗后HBOT组中度和重度EEG异常的比例显著少于对照组(P<0.05)，EEG恢复正常的比例显著高于对照组(P<0.05)，HBOT组EEG恢复时间显著短于对照组(P<0.05)。治疗后HBOT组的MMSE评分(28.16±8.29)高于对照组(20.21±4.40)(P<0.05)。HBOT组的白细胞介素1(IL-1)、C反应蛋白(CRP)、S100β和NSE水平显著低于对照组(P<0.05)。HBOT组的Th17[(0.024±0.004)%]显著低于对照组[(0.028±0.001)%](P<0.05)，Treg[(0.016±0.003)%]显著高于对照组[(0.014±0.004)%](P<0.05)。HBOT组的TLR2、Myd88和NF-κB蛋白水平均显著低于对照组(P<0.05)。HBOT组未发现HBOT相关不良反应。结论HBOT可提高对病毒性脑炎患儿的疗效，减少癫痫的发生，并发挥脑保护作用，这可能与HBOT具有抑制TLR2/NF-κB通路、调节Th17/ Treg平衡的作用有关。