简介:目的研究一种改良后HPLC法测定人血浆中高半胱氨酸(homocysteine,HCY)水平的方法.方法取人血浆100μL加10μL水、100μL正戊醇以及单溴二胺在50℃水浴反应12min,经调pH、离心分离后,取10μL进样分析测定.色谱条件采用Nova-PakC18分离柱,流速1.00mL·min-1,梯度洗脱,荧光法检测,激发波长385nm,发射波长515nm.结果高半胱氨酸在4.00~40μmol·L-1浓度(C)与峰面积(Y)呈良好的线性关系,线性方程为Y=1.9237×106C-4.2714×10-2(r=0.9993).本法测定高半胱氨酸最低限浓度为2.67μmol·L-1,平均回收率RSD为4.23%,日内、日间平均RSD分别为3.84%和4.54%.结论本法操作快速、分析时间短,可用于人血浆中高半胱氨酸水平的测定.
简介:目的:建立高效液相色谱法测定血液和脑脊液中头孢吡肟的药物浓度。方法:待测样品经蛋白沉淀处理后,内标法进行高效液相紫外检测,选用三氯乙酸作为蛋白沉淀剂,头孢他啶作为内标:色谱柱采用IntertsilODS-3(5um,4.6mm×250mm)型色谱柱;流动相为:10%乙腈(v/v),20mmol·L^-1醋酸铵,用冰醋酸调pH至4.00;检测波长为254nm;结果:在选定的色谱条件下,头孢吡肟与血液及脑脊液中的杂质分离良好,头孢吡肟的保留时间在6min左右。血液中和脑脊液中头孢吡肟的线性范围分别为0.5~200μg·mL^-1。和0.1~100μg·mL^-1,回收率分别为76.17%~97.55%和82.28%~92.1%,最低检测限分别为0.5μg·mL^-1和0.1μg·mL^-1。结论:该法可以用于测定血液及脑脊液中的浓度,操作简便,灵敏度高,结果准确,重现性好。