简介：目的我们前期的实验结果显示A20mRNA和蛋白在人脑胶质瘤组织及细胞系（U251、U87、BT325）中高表达，本研究拟构建A20RNAi载体，并检测其对U251细胞A20表达的抑制作用。方法构建三种针对人A20基因的真核干涉表达载体，以脂质体法将其分别转染人脑胶质瘤细胞系U251，以RT-PCR、蛋白印迹法检测各干涉载体对U251细胞中A20mRNA和蛋白表达的抑制作用。结果成功构建三种针对A20基因的RNAi载体，经RT-PCR、蛋白印迹检测筛选出对A20基因干涉效果最佳的载体，命名为pSilencer3．1-A20R1。结论成功构建A20基因干涉载体，为进一步探讨A20与脑胶质瘤恶性增殖、血管形成以及抗凋亡的关系奠定实验基础。

简介：目的探讨构建携带人pre—mir181a基因的重组腺病毒载体，为基因治疗研究提供一种新的方法，并观察其在神经胶质瘤细胞U251细胞中的表达。方法以从Genesil公司购买的含有mir181a的质粒为模板扩增pre—mir181a基因，将回收的PCR产物片段克隆入pGenesil载体，获得重组质粒pGenesil—pre—mir181a。从pGenesil—pre—mir181a上通过LR体外同源重组将mir181amicroRNA表达框转移至pGSadeno腺病毒表达载体上。在体外用不同感染复数（M·O·I）值rAd5-mir181ab分别转染神经胶质瘤细胞U251细胞。采用流式细胞仪、RT—PCR方法检测目的基因的转染效率和表达。结果PCR、酶切鉴定以及序列测定与比对分析表明，重组腺病毒rAd5-mir181a构建正确。神经胶质瘤细胞U251细胞转染rAd5-mir181a的最高效率可达99％，转染后的神经胶质瘤细胞U251细胞表达相应的mir181a。结论本实验成功构建了含mir181a基因的重组腺病毒rAd5-mir181a载体，在体外能高效转染神经胶质瘤细胞U251细胞。

简介：目的构建大鼠神经营养因子3（NT-3）基因真核表达载体并观察其在真核细胞内的表达情况。方法采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术从大鼠脑组织总RNA中扩增NT-3基因cDNA序列,将其克隆到真核表达载体pcDNA3中,经酶切鉴定和序列分析后,以阳离子脂质体Li-pofectamine2000介导转染L929细胞,应用免疫细胞化学和westernblot鉴定NT-3在细胞内的表达。结果RT-PCR产物为822bp的特异片段,重组质粒pcDNA3/NT-3酶切后产生822bp和5.2kb的片段,DNA测序证实822bp片段的碱基序列与大鼠NT-3基因序列完全一致,成功构建了pcDNA3/NT-3重组质粒。将其转染真核细胞后,免疫细胞化学、westernblot结果表明NT-3能在真核细胞中正确表达。结论成功构建了重组真核表达质粒载体pcDNA3/NT-3,为后续的研究奠定基础。

简介：目的研究提高和阻断端粒酶活性对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖及分化的影响。方法采用直接贴壁法分离、培养SD大鼠BMSCs．流式细胞仪检测BMSCs表面标记。阳离子脂质体介导hTERT正、反义表达载体转染BMSCs．RT—PCR和免疫组化方法检测TERT表达，并对转染前后BMSCs的生长增殖能力、神经细胞方向的分化能力和大鼠颅内移植存活情况进行研究。结果大鼠BMSCs表面CD29、CD44、CD90阳性，CD31、CD34、CD45阴性，转染正义hTERT后BMSCs增殖速度明显提高，而其向神经元和星形胶质细胞诱导分化及异体海马移植后的存活能力未受影响，转染反义hTERT后BMSCs增殖速度减慢，5-6周内死亡。结论BMSCs存在端粒酶低表达，提高或阻断端粒酶活性对BMSCs的增殖分别起到促进或抑制作用。

简介：目的构建人源性Notch1胞内段（NICD）真核表达载体pIRES2-EGFP—NICD，并观察其在真核细胞中的表达。方法通过反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）从人脑胶质母细胞瘤细胞系U251细胞中获得编码NICD的cDNA，定向克隆至真核表达载体pIRES2-EGFP；经酶切和测序鉴定正确后，应用脂质体法转染HeLa细胞，并通过蛋白免疫印迹法检测细胞内NICD的表达。结果构建了真核表达载体pIRES2-EGFP—NICD，将其转染HeLa细胞72h后，蛋白免疫印迹法检测到细胞内NICD的表达显著增高。结论成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP—NICD，为研究Notch信号通路在人脑胶质细胞瘤发生发展中的作用机制奠定了基础。

简介：目的探讨不同血清型对成熟肌纤维的转导效率.方法我们用不同的血清型AAV(rAAV-1,rAAV-2,rAAV-3和rAAV-5)表达LacZ和GDNF基因研究在小鼠骨骼肌转导效率,转基因表达用组化方法或ELISA来评定.结果在3周龄的小鼠中,LacZ组化染色显示rAAV5在慢和快的肌纤维中都有效的转导,而rAAV2和rAAV3优先在慢纤维中转导.在8周龄的小鼠(成年鼠)中,rAAV3和rAAV5在慢纤维和快纤维中都有效的转导.用rAAV3-LacZ或rAAV5-LacZ优先转导的慢纤维与rAAV2相比没有显著性差异.用8周龄的小鼠肌肉注射不同血清型的rAAV-GDNF后,结果显示rAAVl-GDNF表达最高;rAAV2、rAAV3和rAAV5在骨骼肌的表达也有效.结论在肌肉基因转导中,rAAV3和rAAV5介导的载体都是有效的,能克服rAAV2所受到的限制.

简介：目的构建Wilson病基因ATP7B的重组腺病毒载体.方法分别以BamHⅠ+SalⅠ双酶切pcDNA3.0/ATP7B和pDC315,将ATP7BcDNA目的基因片段和线性化的pDC315连接,定向克隆构建pDC315/ATP7B,以PCR和酶切的方法鉴定.pDC315/ATP7B与腺病毒骨架共转染293细胞构建Ad-ATP7B,PCR进行鉴定.结果经PCR和酶切鉴定证实pDC315/ATP7B构建成功.pDC315/ATP7B与腺病毒骨架共转染293细胞后见明显的毒斑,说明二者在293细胞中同源重组并包装成功.经PCR证实重组腺病毒Ad-ATP7B构建已完成.结论本实验成功构建了ATP7B外源目的基因序列完全正确的重组腺病毒载体Ad-ATP7B,为下一步采用ATP7B基因重组腺病毒载体对Wilson病进行基因治疗打下了基础.

简介：目的构建arhgap39基因真核过表达载体并初步研究arhgap39蛋白表达的相关问题。方法提取小鼠海马组织总RNA，逆转录合成cDNA，根据GeneBank中基因信息设计引物，高保真PCR扩增arhgap39基因的编码区，随后将其转移到真核载体上，转染NG-108细胞并观察其在细胞内的表达情况。结果经酶切和测序鉴定表明成功构建arhgap39基因的相关真核过表达载体；将其转染NG-108细胞，免疫印迹试验证实arhgap39成功过表达，arhgap39的分子量约为140kD。结论我们的实验结果确认了arhgap39蛋白的分子量，并对其可能存在的存在形式做了验证性研究，可以为进一步的研究提供理论基础和研究工具。

简介：澳洲人的寿命越来越长。从1999年～2011年．70岁以上的人口将增加55％．80岁以上的人口增长率将是社会中最高的。待到2020年后．战后出生的人们将进入老年；那时的老年健康问题将会更加引人注目。老年人是健康服务的最大应用者，生命的普遍延长．增加了晚年残疾及慢性疾病的人口．增加了生活孤独和多种并发残疾的可能性．据最新

简介：维多利亚省的精神康复服务是被政府公认为全国领先的。自其1992年建立以来，整个系统正在趋于完善，使用它的服务人从1992年的2000人增至2002年的20000人，从今年起，此服务的全名被改为精神康复及支援服务（PsychiatricDisabilityRehabilitationandSupporrService），精神康复及支持服务的目的是协同临床精神健康服务，在社区中提供精神社会评估，康复和精神上的支援服务。

简介：目的探讨绿色荧光蛋白(GFP)特异性发夹结构RNA(shRNA)对人类胶质瘤BT325细胞系GFP基因表达的抑制作用.方法设计并合成针对GFP基因的shRNA序列,与报告基因质粒pEGFP-N1共转染,选择最佳转染比例,荧光显微镜下观察GFP表达的效率和对GFP的抑制效应.结果质粒pSIREN-RetroQ-RNAi经双酶切得到6kb和100bp条带,结合测序验证,与实验设计的shRNA长度相符.质粒DNA与XP-1转染比例为1:25时GFP表达最强.BT325细胞干扰48h时GFP表达显著减少.结论BT325细胞系中存在RNA干扰现象,且干扰效果特异、稳定;本实验为研究基因功能提供了新的策略.

简介：澳大利亚的精神健康服务（MENTALHEALTHSERVICE）和中国的结构有很大的不同，以下我以维省为例，简单地介绍一下。

简介：自2010年初“优质护理服务示范工程”启动以来，各级卫生行政部门和医院高度重视、积极推进。一年多来，优质护理服务已经成为公立医院改革的亮点，取得了可喜的成效。到2011年6月底，全国1343所三级医院和4069所二级医院已开展了优质护理服务。然而，由于可持续发展的长效机制尚未完善，深入发展的动力不足，出现了一些情况和问题。卫生部副部长马晓伟在全国“优质护理服务示范工程”重点联系医院第三次工作例会中指出，“要把优质护理服务做成一个品牌工程，不懈怠、不停滞，在巩固成绩的同时，锐意进取，

简介：随着我国步入老龄化社会和国人寿命的延长，预测至2025年我国60岁及以上老年人将达到2．5亿，占总人口的20．3％。老年人的生活和健康问题已经引起社会各界的广泛关注，2001年北京市政府为北京市民办的60件实事之一，是将北京胸科医院转建为北京老年医院，北京市有了惟一一所市属三级综合性老年医院。如何为老年患者提供方便、优质的服务，给老年护理提出了新的课题。2005年门诊护理在医院孝道文化理论指导下，以老年患者为中心，实施人性化、个性化服务，通过3年的实践，收效良好。

简介：目的：开展中医特色护理,提升优质护理服务。方法：在实行责任制整体护理工作模式基础上,积极开展中医护理,包括中医护理管理组织建立、中医护理技术规范制定与培训、中医护理查房与会诊落实、中医单病种护理、中医诊疗仪器的规范使用与培训考核、中医特色护理项目临床实践、中医护理质量控制标准制定与组织实施、中医特色护理服务举措创新等。结果：从2010年5月至2012年10月,中医护理质量均分由21.63分上升至94.50分;撰写中医护理论文20余篇,立项省厅、局级中医护理课题15项,成功举办省级和国家级中医护理继续教育培训班4次;患者满意度由80.50%上升至96.52%。结论：加强中医特色优质护理服务实践,能有效提升中医护理质量。

简介：“我感到很迷惑和恐怖，我不知道我到底怎么了，我想问题也不如从前清楚了。”

简介：北京市西城区德胜社区卫生服务中心是西城区实施“收支两条线”管理的试点单位，在北京市公共卫生和基本医疗两个网底的基础上，西城区把综合医疗救助、医疗康复、计划生育技术指导和居家养老充实进去形成6个网底进行运行机制、服务理念、服务模式等方面的改革。我们对所辖社区居民实行以人的健康为中心，开展全方位、全人群、全生命周期的健康维护。

简介：随着医改的不断深入，在合理调整配置医疗资源，构建功能互补、有序发展的医疗服务新格局中，护理院作为连接区域医疗中心与社区医疗服务的中间机构，将发挥不同于一般医疗机构的作用，由它连接并构建的“无缝医疗”体系，是医改的重要组成部分。作为北京市卫生局医改的重要举措之一，在2009年初启动了“北京市康复院、护理院试点工作项目”，该项目由市人保局、市民政局、市财政局及西城卫生局共同组成领导小组，委托北京康复医学会和北京大学护理学院有关专家提供全面技术支持，其中护理院试点机构为展览路医院及丰台区长辛店颐乐之家，形成了由政府职能部门、相关专家团队和试点单位构成的研究和实践团队。

简介：临床护理是护理专业服务的主要方式，是民众享有护理服务的主要途径，是护理教育的来源和归结。它代表了一个国家、一个地区护理发展的水平。在党和政府对护理的关怀下，以及社会对护理服务的强烈需求下，我国的临床护理取得极大的发展。特别是启动“优质护理服务示范工程”活动，

简介：作为公立医院改革重要内容之一的“优质护理服务示范工程”实施两年多以来，各医疗机构围绕“改模式，重临床，建机制”的指导思想，健全制度体系，加强科学管理，提高服务能力，取得了一定的成效。如何持续推进优质护理服务，进一步提升护理服务专业内涵成为下一步工作的重点。探索建立长期护理服务体系是《中国护理事业发展规划纲要（2011-2015年）》提出的重点任务之一，要求医疗机构充分发挥专业技术和人才优势，将护理服务延伸到家庭和社区，更加注重患者的延续性护理和康复，拓展护理服务领域。