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  • 简介:摘要目的构建miR-7-1启动子核心序列的真核表达载体,并初步探讨其意义。方法根据5’端缺失实验原理,设计引物,PCR法分别扩增含不同长度启动子序列和相同miR-7-1成熟体序列的产物;纯化、经KPNI和XHOI双酶切后将它们分别亚克隆入pGL3.0-Basic真核表达载体,并进行酶切及测序鉴定;将三个构建成功的pGL3.0-miR-7载体(分别命名为p-1189-miR-7,p-1731-miR-7,p-2192-miR-7)体外瞬时转染小鼠乳腺癌4T1细胞;用Real-timePCR检测各组中miR-7成熟体的表达水平;CCK-8法检测细胞生长的变化;最后,利用TRANSFAC数据库预测结合miR-7-1启动子核心序列的潜在转录因子。结果酶切和测序验证成功构建了p-1189-miR-7、p-1731-miR-7、p-2192-miR-7三个miR-7-1启动子真核表达载体;与表达载体p-1189-miR-7、p-1731-miR-7转染组相比,表达载体p-2192-miR-7瞬时转染4T1细胞后可有效表达miR-7成熟体,并显著抑制4T1细胞的体外生长(p<0.05),提示miR-7启动子序列-1593位点到-2024位点为核心序列;最后,预测结果显示NK2-同源盒-5(NK2-Homebox-5,NKX2-5)和肝细胞核因子4(hepatocytenuclearfactor4homeobox,HNF-4)可能是结合该核心序列的转录因子。结论成功构建了p-1189-miR-7,p-1731-miR-7,p-2192-miR-7三个miR-7-1启动子真核表达载体,并筛选到miR-7-1启动子的核心序列(-1593位点到-2024位点),为后续深入研究miR-7-1在乳腺癌发生中的作用及机制提供了前期实验基础。

  • 标签: miR-7-1 启动子 真核表达 4T1细胞
  • 简介:目的:探讨支气管镜检查患者实行优质护理的效果.方法:我科2010年1月至12月行支气管镜检查85例,以创优质护理服务前行支气管镜检查者为对照组(n=39),以实施优质护理服务后支气管镜检查者为干预组(n=46),比较两组患者术前焦虑程度、健康知识掌握程度、操作时配合情况及对护理过程的满意度.结果:干预组患者接受镜检前焦虑评分、干预组的满意度、健康知识掌握程度和操作时配合情况均明显优于对照组(P〈0.05).结论:优质护理能进一步提高支气管镜检查的护理质量,保证护理效果.

  • 标签: 优质护理服务 支气管镜检查 应用
  • 简介:目的:研究护理工作满意度调查表在骨科优质护理服务示范病区活动中的应用方法及效果.方法:采用自制的护理工作满意度调杳表对病人进行问卷调查,内容包括基础护理、护理安全、护理服务.结果:通过满意度调查,能及时反映病人对护理工作的评价,针对问题提出整改措施,从而提高护理T作质量.结论:应用护理工作满意度调查表对病人进行问卷调查有利于持续改进护理管理体系及提高护理质量,值得在护理工作中推广应用.

  • 标签: 护理工作 满意度 问卷调查 病房