简介：目的调查耐药鲍曼不动杆菌菌株问的亲缘关系。方法收集2012年1月至2013年12月该院住院患者痰标本中分离的耐药鲍曼不动杆菌共20株，采用聚合酶链反应（PCR）的方法分析3种与耐药相关的看家基因（carO、gyrA、parC）和54种水平转移获得与β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药相关基因以及12种接合性质粒、转座子、插入序列、整合子等可移动遗传元件遗传标记，再对检测结果作样本分析。结果20株耐药鲍曼不动杆菌共检出3种与耐药相关的看家基因carO、gyrA、parC突变，6种获得性β-内酰胺类耐药基因（TEM-1、PER、ADC-30、ADC-58、ADC-59、OXA-23），5种获得性氨基糖苷类耐药基因（aac（3）-Ⅰ、aac（6’）-Ⅰb、ant（3”）-Ⅰ、aph（3’）-I、armA），2种抗菌制剂外排泵基因（adeB、qacE△1），7种可移动遗传元件的遗传标记（intⅠ1、tnpU、tnp513、IS26、IS903、ISabal、ISabag）。样本聚类分析提示，20株耐药鲍曼不动杆菌可分为A与B二个簇，A簇为多耐药鲍曼不动杆菌，B簇为泛耐药鲍曼不动杆菌。结论A簇1，2，13，17，20号株与10，14，16号株之间亲缘关系较近；B簇4-6-8-9-15-19号株为同一克隆，即为克隆传播。获得菌株之间的亲缘关系对院内感染实时监测和控制院内感染意义重大。

简介：摘要胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，流行病学发现，男性胃癌明显多于女性((2～3)1)。有研究发现，女性胃癌发生时间较男性推迟10～15年，绝经期后发病率与男性相近

简介：目的：探讨TFPI-2基因在胃癌组织中的表达及其临床意义.方法：收集临床胃癌患者术后大体标本64例,采用免疫组织化学方法检测TFPI-2蛋白在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达,采用RT-PCR法检测TFPI-2mRNA在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达.结果：TFPI-2蛋白在正常胃黏膜组织中的表达高于胃癌组织（P＜0.05）,无淋巴结转移胃癌组织的TFPI-2蛋白表达高于有淋巴结转移的胃癌组织（P＜0.05）.TFPI-2mRNA在正常胃黏膜组织中的表达明显高于胃癌组织（P＜0.05）,无淋巴结转移胃癌组织的TFPI-2mRNA表达高于有淋巴结转移的胃癌组织（P＜0.05）.结论：TPFI-2基因是胃癌发生、侵袭和转移的重要调节因子,其低表达与胃癌淋巴结转移的生物学行为密切相关.

简介：目的了解我国铜绿假单胞菌的氨基糖苷类耐药基因分布状况。方法计算机检索CBM、CNKI、VIP和WanFangData数据库，收集报道我国铜绿假单胞菌耐氨基糖苷类基因的研究，检索时限均从建库至2012年12月。由2位评价员按照纳入与排除标准筛选文献、提取资料后，采用SPSS17．0软件进行统计分析。结果共纳入10个省市1144株耐氨基糖苷类铜绿假单胞菌。氨基糖苷类修饰酶基因aac（3’）-Ⅰ、aac（3’）-Ⅱ、aac（6’）-Ⅰ、aac（6’）-Ⅱ、ant（2”）-Ⅰ、ant（3”）-Ⅰ和aph（3’）-Ⅵ在淮河以北地区的检出率分别为13．3％、40．1％、21．6％、40．3％、38．1％、23．7％和2．9％，而淮河以南地区的检出率分别为3．2％、20．2％、15．9％、37．6％、28．3％、28．5％和9．1％。16SrRNA甲基化酶基因rmtA、rmtB和armA检出率分别为20.4％、19．4％和0．7％，而其余16SrRNA甲基化酶基因均未检出。结论氨基糖苷类修饰酶是我国铜绿假单胞菌耐氨基糖苷类药物的主要机制，而16SrRNA甲基化酶是其次要机制。

简介：目的：分析孕产妇中珠蛋白生成障碍性贫血（地贫）基因类型和频率，为优生优育提供参考和指导。方法采用跨越断裂点聚合酶链反应（GAP‐PCR）技术和反向斑点杂交（PCR‐RDB）技术对361例地贫初筛阳性的孕产妇进行α、β‐地贫基因检测。结果361例受检孕产妇中检出地贫165例，检出率45．71％。其中，检出α‐地贫76例（21．05％），检出3种缺失类型，分别为－SEA／αα（64．47％）、－α3，7／αα（32．89％）、－α4，2／αα（2．63％）；检出β‐地贫89例（24．65％），检出6种基因突变类型，依次为CD17（39．33％）、CD41‐42（30．34％）、IVS‐Ⅱ‐654（16．85％）、CD43（6．74％）、－28（4．49％）、－29（2．25％）。结论基因检测有利于地贫的检出，开展孕产妇人群地贫基因检测，对指导优生优育，有效防止重型地贫患儿的出生有重要意义。

简介：诱导多能性干细胞（iPSC）技术具有临床应用前景，但iPSC的遗传稳定性和成瘤性阻碍了其可能的临床应用。非整合质粒（Episomal）方法无外源基因整合到宿主基因组上并且方法简单，适宜推广，是目前保证iPSC遗传安全性的最佳方案之一，但其诱导效率偏低，严重阻碍了其应用。本研究旨在优化Episomal方法，将脐血单个核细胞（CBMNC）重编程为诱导多能性干细胞（iPSC），建立无基因整合的iPSC的高效生成技术体系，为以后建立疾病iPSC奠定基础。利用CBMNC，通过比较不同氧含量，诱导质粒，MNC培养方法和预刺激时间等条件对Episo—mal方法进行优化。结果表明：CBMNC采用红系培养液，培养8d，使用启动子为sFFV（spleenfocusformingvirus）的Episomal载体，在低氧（3％）条件下诱导，CBMNC重编程效率最高，可达到0．12％。通过分析最佳条件下供体细胞成分发现，表型为CD36＋CD71＋CD235alow的有核红细胞是重编程最主要的供体细胞来源。结论：本研究成功建立并优化出一种可推广的高效安全的，可以用于临床应用研究的iPSC诱导技术。

简介：欧盟将基因治疗产品、细胞治疗产品和组织工程产品定义为先进医疗产品（Advancedtherapymedicinalproducts,ATMP）,以专门的规定对此类产品进行管理,包括此类产品的技术要求、获准上市的程序、临床试验要求和生产要求.目前,我国对于此类产品还没有明确的监管法规.本文将介绍欧盟在此类产品上的监管法规,为我国探索和实践此类产品的监管提供参考.

简介：目的观察γ线放射后FLCN缺失的肾癌细胞与高表达FLCN的肾癌细胞凋亡及自噬水平上的差别,并进一步确定γ线放射在FLCN缺失的肾癌细胞中诱导自噬的分子机制。方法本实验使用UOK257/UOK257-2及ACHN-sc/ACHN5968两组细胞,通过Westernblot、GFP-LC3及MDC荧光方法观察细胞内自噬现象,通过TUNEL方法测定细胞凋亡,通过克隆存活实验测定细胞对γ线放射的敏感性,并利用3-MA或Beclin1siRNA抑制自噬后,再次观察细胞内自噬、凋亡以及细胞对γ线放射敏感性的变化。结果相对于ACHN-sc/UOK257-2细胞,UOK257/ACHN5968对γ线放射较敏感,且γ线放射可以在UOK257/ACHN5968细胞中诱导更明显的自噬反应。应用自噬诱导剂雷帕霉素可以增强γ线放射对UOK257和ACHN5968细胞的杀伤作用。Westernblot结果表明,γ线放射通过激活MAPK信号通路并上调Beclin-1蛋白表达从而在UOK257/ACHN5968细胞中激活自噬反应。结论FLCN可以降低肾癌细胞对γ线放射的敏感性,无FLCN表达的UOK257肾癌细胞对γ线放射较敏感。与单独的γ线放射相比,联合应用自噬诱导剂和γ线放射对FLCN缺失或下调的肾癌细胞有更强的杀伤效果,而这可能为BHD伴发的肾癌或其它相关肿瘤的治疗提供一种更有效的治疗途径。

简介：摘要目的系统评价白细胞介素6（IL-6）基因-174G／C多态性与慢性阻塞性肺疾病（COPD）发病风险的相关性。方法计算机检索PubMed、EMbase、CNKI、WanFangData、CBM和VIP数据库有关IL-6基因-174G／C多态性与COPD发病风险的病例-对照研究，检索时限均为从建库至2013年6月。由2位研究者按纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料后，采用RevMan5．2软件进行Meta分析。结果最终纳入5个研究，共计487例COPD患者和786例对照。Meta分析结果显示IL-6基因-174G／C多态性和COPD发病风险无相关性：GC＋CC垤GGOR=I．01，95％CI（O．76，1．34），P=0．95；CCvs．GC＋GG：OR=I．04，95％CI（0-70，1．54），P=0．85；CCl：5．GG：OR=1．05，95％CI（0．69，1．61），P=0．81；GCw．GG：OR=I．00，95％CI（O．74，1．35），P=0．99；Cvs．G：OR=I．02，95％CI（0．83，1．24），P=0．88。结论IL-6基因-174G／C多态性可能不是COPD发病风险的危险因素。

简介：目的对亚洲健康人群CYP2C19基因型发生率进行合并分析，为个体化药物治疗和药物基因组学研究提供依据。方法计算机检索PubMed、EMbase、TheCochraneLibrary（2013年第2期）、CNKI、WanFangData、VIP和CBM数据库，文献检索时限均从建库至2013年8月，纳入研究CYP2C19亚洲健康人群基因型发生率的相关文献。按照纳入与排除标准筛选文献、提取数据后进行合并分析。结果共纳入36篇文献，包含15个国家的9693例亚洲健康人CYP2C19基因型的信息。按东亚（中国、韩国、日本）、东南亚（泰国、缅甸、越南、新加坡、马来西亚和印度尼西亚）、南亚（印度）和西亚（巴勒斯坦、黎巴嫩、伊朗、土耳其和约旦）分区域进行分析。研究结果显示CYP2C19＊1/＊1、＊1/＊2、＊1/＊3、＊2/＊2、＊2/＊3和＊3/＊3基因型发生率：在中国人群（n=4105）中分别为37.2%、41.4%、6.7%、9.9%、4.1%和0.7%；在东亚人群（n=6198）中分别为36.4%、39.1%、8.8%、9.5%、4.9%和1.3%；在东南亚人群（n=1933）中分别为44.9%、41.1%、4.7%、7.0%、1.8%和0.6%；在南亚人群（n=361）中分别为43.5%、42.9%、0.3%、12.7%、0.6%和0.0%；在西亚人群（n=1201）中分别为77.8%、18.9%、0.3%、2.6%、0.1%和0.3%；在亚洲全部人群（n=9693）中分别为43.5%、37.1%、6.6%、8.3%、3.5%和1.0%。结论CYP2C19各基因型发生率在我国及亚洲不同区域之间均存在较大差异，且遗传变异受地域或环境的影响。

简介：本研究旨在分析正常核型急性髓系白血病（acutemyeloidleukemia,AML）CEBPA基因突变患者的临床特征和疗效.回顾性分析我中心55例初诊AML患者CEBPA基因突变率、临床特征及治疗疗效.结果表明：本组患者CEBPA突变患者20例,发生率为36.4％,其中17例为双侧突变,3例为单侧突变;与CEBPA无突变AML患者相比,CEBPA突变患者具有以下临床特征：75.0％患者为M1与M2;初诊时表现为高血红蛋白[（98.30±20.33）g/L对（81.69±23.74）g/L;t=2.625,P=0.011]及低血小板[（33.30±38.27）×109/L对（64.79±61.60）×109/L;u=2.062,P=0.044];白血病细胞高表达CD7及CD34.近期疗效显示,CEBPA突变患者CR率72.2％,高于CEBPA无突变患者68.6％,但无统计学差异（P＞0.05）.结论：CEBPA突变AML多见于AML-M1和M2,且伴高血红蛋白和低血小板症,表达CD7及CD34;近期疗效尚好.国人AML患者CEBPA突变率可能高于国外报道.

简介：目的对表达hTERT基因的大鼠骨髓间充质干细胞（Bonemesenchymalstemcells,BMSCs）进行成瘤风险评估及类肝样细胞分化能力的鉴定.方法将表达hTERT基因的大鼠BMSCs进行裸鼠致瘤试验评估成瘤风险,通过序贯法诱导成肝分化,于诱导后观察细胞形态变化、检测ALB和AFP的表达、糖原染色鉴定糖原储备能力.结果裸鼠致瘤实验提示表达hTERT基因的大鼠BMSCs无成瘤风险.成肝诱导后,细胞形态逐渐变为圆形;ALB仅在诱导第21天部分阳性表达,AFP在诱导第14天起阳性表达;糖原染色阳性.结论表达hTERT基因的大鼠BMSCs无致瘤风险,且具有类肝样细胞的分化能力.

简介：1、蛋白名称都按照国际文献常用的拼写法，使读者一看就懂。名称中的英文字母一般较多地采用英文大写正体字母拼写，例如BCL-2蛋白，不要写成bcl-2或Bcl-2蛋白；又例如TfR2蛋白（转铁蛋白受体2），按国际文献的惯例，其名称拼写中兼有大小写字母。

简介：本研究通过对急性白血病病人及体外肿瘤细胞株的DNA甲基化及基因表达的实验,探讨死亡相关蛋白激酶（death-associatedproteinkinase,DAPK）基因在急性白血病中的表达情况及其启动子区域甲基化的状态,并分析两者之间的相关程度.应用RT-PCR检测DAPK基因在白血病细胞及正常骨髓细胞中的表达;用巢式甲基化特异性PCR（n-MSP）法检测急性白血病患者及细胞株DAPK基因启动子甲基化状况;从第二轮巢式MSP扩增出的随机产物中挑选2个随机引物,交予专业机构克隆后进行序列分析.结果表明：DAPK基因在10例正常对照者骨髓标本中均有表达,DAPKmRNA在急性白血病病人骨髓标本中表达平均值为0.61±0.40,低于正常对照者,差异有显著性（P＜0.05）,其中52.94％（9/17例）的急性淋巴细胞白血病病人骨髓标本DAPKmRNA表达降低或缺失,急性髓系白血病病人数据为41.18％（42/102）;细胞株U-937显示基因表达正常,HL-60表达缺失;102例急性髓系白血病病人骨髓标本中33例存在DAPK启动子区甲基化,甲基化率为32.4％（33/102）;17例急性淋巴细胞白血病病人骨髓标本中8例存在DAPK启动子区甲基化,甲基化率为47％（8/17）;7例正常人骨髓标本DAPK启动子区均为非甲基化;细胞株U-937DAPK启动子区非甲基化,HL-60DAPK启动子区甲基化.ALL组与AML组患者骨髓细胞DAPKmRNA表达与其启动子甲基化均呈显著负相关（ALL组r=-0.855,P＜0.05;AML组r=-0.343,P＜0.05）,提示两者有密切的关联.结论：急性白血病患者中DAPK基因启动区甲基化与其mRNA的异常表达或失表达有关.

简介：目的探讨hVEGF165基因修饰的BMSCs在SD大鼠急性牙周缺损模型中对牙周组织再生的作用.方法人工构建SD大鼠急性牙周缺损模型.设以下6组（36只SD大鼠,n=6）：空白对照（A组）;单纯e-PTFE膜（B组）;BME＋e-PTFE膜（C组）;BMSCs＋BME＋e-PTFE膜（D组）;空转BMSCs＋BME＋e-PTFE膜（E组）;hVEGF165基因修饰的BMSCs＋BME＋e-PTFE膜（F组）.分别将转染hVEGF165基因的BMSCs与未转染的BMSCs接种于胶原膜BME-10X后,按各分组植入人工牙周缺损内,并以空白胶原膜和空载体为对照.4周后取材作病理切片,HE染色观察牙周组织再生情况,测量新生牙槽骨面积、新生牙骨质面积以及新生牙周膜宽度,结果进行统计学分析.结果各组均可见不同程度的牙周组织再生,A组、B组和C组三组新生牙槽骨面积（NB）、新生牙骨质面积（NC）和新生牙周膜宽度（NP）均无明显差别（P＞0.05）;与A组相比,D组、E组、F组的NB、NC均有显著增加（P＜0.05）;与E组相比,转染有hVEGF165基因组（F组）的NB、NC和NP均有显著增加（P＜0.05）.结论hVEGF165基因转染BMSCs与胶原膜复合物可促进大鼠牙周组织再生.

简介：目的探讨Th17细胞和白介素-17（IL-17）在异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）aGVHD中的免疫调控。方法采用野生型（WT）C57BL/6（H-2b）小鼠与C57BL/6（H-2b）IL-17基因敲除（IL-17-/-）小鼠作为供体,采用BALB/C（H-2b）小鼠作为受体,小鼠给予全身照射8.5Gy进行清髓性预处理,移植野生型（WT）小鼠1×107个去除T细胞骨髓细胞（TCD-BMCs）以及WT小鼠1×106个CD4＋IL-17-/-T细胞。移植之后每天对小鼠生存状况进行观察1～2次,每隔5d对aGVHD进行临床评估。收集实验小鼠肝脏、肺、肠以及皮肤,并进行HE染色并进行病理组织学分析,并对移植后Th17细胞组、CD4＋IL-17-/-T细胞组、IL-17-/-BMCs＋IL-17-/-SCs组（KK组）、WTBMCs＋IL-17-/-SCs组（WK组）及WTBMSCs＋WTSCs组（WW组）小鼠的aGVHD积分进行评估。结果1Th17细胞组移植后5d、10d、15d、20daGVHD积分均显著高于IL-17-/-CDD4＋T细胞组（P〈0.05）,且Th17细胞组小鼠平均生存时间显著小于IL-17-/-CDD4＋T细胞组（P〈0.05）；2KK组、WK组及WW组移植后5d、10d、15d、20daGVHD积分差异均具有统计学意义（P〈0.05）,且三组平均生存时间方面的差异也均具有统计学意义（P〈0.05）。结论Th17细胞与IL-17在异基因造血干细胞移植aGVHD中具有较好的免疫调控作用。

简介：目的：观察肾移植术后供肾多药耐药基因（MDR1）外显子26及外显子21的基因型对他克莫司（FK506）急慢性肾毒性和血药浓度的影响。方法回顾51例肾移植术后常规使用FK506＋MMF＋Pred三联免疫抑制用药方案的患者资料。通过基因组测序检测肾移植供者MDR1exon26和exon21的基因型，比较不同供肾基因型的患者FK506的用量、血药浓度及和肾毒性的差异。结果在术后1年时比较内生肌酐清除率时，在exon26中，TT型的内生肌酐清楚率明显低于CC型和CT型（P＜0.05），在exon21中，低表达型（TT型）明显低于高表达型（GG/GT/GA/AT型）（P＜0.05）；在比较术后1个月内的移植肾急性肾中毒发生率时，exon21中低表达型明显高于高表达型（P＜0.05）。结论在保护移植肾功能，减少FK506的急慢性肾毒性上，exon26的CC/CT型和exon21的高表达型明显优于exon26的的TT型和低表达型。

简介：本研究旨在比较微芯片电泳及毛细管电泳在急性髓系白血病（AML）FLT3-ITD基因突变检测中的可靠性.应用PCR-微芯片电泳和PCR-毛细管电泳法同时检测214例初治AML患者DNA样本FLT3-ITD基因突变,并通过直接测序法进行序列分析.PCR-微芯片电泳结果显示,FLT3-ITD突变阴性151例,阳性58例（58/214,27.1％）,可疑阳性5例（5/214,2.3％）;PCR-毛细管电泳结果显示,FLT3-ITD突变阴性147例,阳性67例（67/214,31.3％）.在毛细管电泳结果为阳性的67例样本中,其中4例微芯片电泳结果为阴性,5例为可疑阳性,用直接测序法进行检测,结果均为突变阳性.这一结果揭示,PCR-毛细管电泳法用于检测FLT3-ITD突变更为准确,虽然微芯片电泳组与毛细管电泳组FLT3-ITD突变检测阳性率并无显著差异（卡方检验,P＞0.05）.结论：PCR-微芯片电泳与PCR-毛细管电泳均可作为简便的FLT3-ITD基因突变筛查方法,但作为新的检测手段,PCR-毛细管电泳法准确度与测序法一致、可用,而PCR-微芯片电泳法作为诊断检测的方法,其准确度有待于改进.