简介:目的利用错配杂交和化学发光技术,建立一种检测MGMT基因启动子区过甲基化的定量分析方法.方法基因组DNA经过亚硫酸氢钠修饰,所有未甲基化的胞嘧啶都被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不发生变化.设计特异的PCR引物(不合CpG位点),同时扩增含有CpG位点甲基化或非甲基化目的MGMT基因启动子区,用两条分别与甲基化及非甲基化CpG位点互补的寡核苷酸探针与扩增产物杂交,化学发光检测,通过两条探针的杂交信号强度之比确定样品DNA中MGMT甲基化的程度.结果检测混合样品中MGMT基因的甲基化水平与结果完全相符,并可用于肿瘤组织样品的MGMT甲基化定量检测.结论与现有方法相比,本法是一种检测快速、操作简便的MGMT基因甲基化的定量检测方法.
简介:在规模化种植茅苍术的背景下,为了保证药材的质量,必须对茅苍术种植的关键环节开展研究,规范种植全过程。'种植密度'和'打顶'是茅苍术规范化种植的关键环节,必须开展研究以确定最佳种植密度以及在田间管理的过程中是否需要进行打顶。在确定最佳种植密度的研究中,开展了田间试验研究,采用了2因素3水平的完全随机区组设计方案,共9个处理,27个试验小区;在开展茅苍术打顶的研究中,以不打顶作为对照来研究打顶的可行性。以净产量和净产量率作为评价指标发现最佳种植密度为行株距30cm×15cm,且打顶有利于提高净产量和净产量率。在茅苍术的规范化种植过程中应按照30cm×15cm的行株距进行定植,田间管理中应采取打顶的措施。