简介:摘要目的研究温石棉对人胸膜间皮细胞MeT-5A细胞毒性与诱导细胞恶性转化的能力。方法于2016年6月,采用乳酸脱氢酶(LDH)法检测温石棉对MeT-5A细胞的细胞毒性;以5 μg/cm2温石棉间断染毒MeT-5A细胞,24 h/次,每周一次,共28次,待细胞呈现锚着不依赖性生长后,用软琼脂集落形成试验判断细胞恶性转化,并计算软琼脂集落形成率,紫外比色法测定糖代谢过程中的关键限速酶活性,包括丙酮酸激酶(PK)、磷酸果糖激酶(PFK)和己糖激酶(HK)。结果温石棉对MeT-5A细胞具有细胞毒性,细胞相对存活率呈浓度依赖性下降。与未染毒时相比,10、20、40、80 μg/cm2温石棉染毒后MeT-5A细胞相对存活率显著下降(P<0.05)。染毒28次后,温石棉转化组细胞生长速度加快、排列紊乱,失去接触抑制,出现叠层生长,并可在软琼脂上生长,细胞集落形成率为18.33‰±2.49‰,与对照组(0)比较,差异有统计学意义(P<0.01);温石棉转化组细胞PK[(19.51±1.52)U/L]、PFK[(0.12±0.02)U/104个细胞]和HK[(0.26±0.01)U/104个细胞]酶活性水平高于对照组细胞[(25.00±1.04)U/L、(0.15±0.01)U/104个细胞和(0.33±0.01)U/104个细胞](P<0.01)。结论温石棉可诱导MeT-5A细胞发生恶性转化,并升高细胞糖酵解相关激酶PK、PFK、HK酶活性水平。
简介:摘要目的探究microRNA-30d(miR-30d)对人恶性胸膜间皮瘤细胞MSTO-211H的增殖、迁移和侵袭的抑制作用。方法于2017年4月,以MSTO-211H细胞为模型,通过转染miR-30d模拟物(miR-30d mimics)建立miR-30d过表达的MSTO-211H细胞模型,利用qRT-PCR检测转染后细胞miR-30d的表达水平,通过CCK-8实验、流式细胞术、细胞划痕实验以及Transwell法分析miR-30d对MSTO-211H细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等表型的影响。结果转染miR-30d mimics后,MSTO-211H+miR-30d组细胞中miR-30d表达水平明显高于MSTO-211H+miR NC组细胞(P<0.01)。MSTO-211H+miR-30d组细胞活性(105.13%±2.35%)显著低于MSTO-211H+miR NC组(115.40%±1.35%),凋亡水平(3.97%±0.36%)显著高于MSTO-211H+miR NC组(1.47%±0.10%)(P<0.01)。MSTO-211H+miR-30d组细胞在12、24 h的相对迁移面积分别为9.35±3.16 μm2和58.19±1.82 μm2,显著低于MSTO-211H+miR NC组(54.42±5.26 μm2和88.32±1.96 μm2)(P<0.01)。与MSTO-211H+miR NC组比较,MSTO-211H+miR-30d组细胞的迁移和侵袭细胞数显著减少(P<0.01)。结论miR-30d能通过抑制MSTO-211H细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭进而调控恶性胸膜间皮瘤的进展。