简介:摘要目的探讨肾癌组织中细胞分裂周期相关蛋白3(CDCA3)与细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)的表达水平及临床意义。方法选取2014年7月至2016年3月本院收治的102例肾癌患者作为研究对象,获取肾癌组织和癌旁组织,采用免疫组化法测定细胞中CDCA3、CDCA5的表达水平。分析CDCA3、CDCA5蛋白表达水平与肾癌患者临床病理特征之间的关系,并采用多因素Cox比例风险回归分析影响肾癌患者预后的危险因素。结果肾癌组织中的CDCA3、CDCA5蛋白表达阳性率均高于癌旁组织(均P<0.001)。CDCA3、CDCA5蛋白表达水平与年龄、性别均无相关性(均P>0.05);CDCA3、CDCA5蛋白表达水平与肿瘤最大径、TNM分期、病理级别、淋巴结转移、复发均有相关性(均P<0.05),且肿瘤最大径≥2 cm、TNM分期越高、病理级别越高、有淋巴结转移、有复发时,CDCA3、CDCA5的阳性表达率越高(均P<0.05)。CDCA3、CDCA5阳性肾癌患者的5年生存率均较阴性患者显著降低(均P<0.05)。肿瘤最大径≥2 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴血管浸润、病理级别高、有复发、CDCA3及CDCA5阳性肾癌患者的5年生存率均显著降低(均P<0.05)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、病理级别高、CDCA3及CDCA5表达阳性是影响肾癌患者预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论CDCA3、CDCA5在肾癌组织中过表达,CDCA3、CDCA5的表达水平与肾癌的病理特征有相关性,CDCA3、CDCA5表达阳性是影响肾癌患者预后的独立危险因素。
简介:摘要:本文对ABSL-3/BSL-3生物安全实验室的大动物实验室核心区混凝土围护结构密封面层材料选择及施工工艺进行了阐述和分析,并从混凝土结构缺陷、各类环氧施工工艺分析、大动物实验室特殊消毒耐腐蚀性能要求、规范要求等方面着手,提出了密封面层改进施工工艺。希望通过本文的阐述可以给同类生物安全实验室项目提供有价值的参考和借鉴。
简介:摘要目的探讨腺病毒结合蛋白3(BNIP-3)在肝细胞肝癌中的表达与缺氧及相关临床病理因素的关系。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、荧光定量PCR和免疫组织化学方法检测烟台市烟台山医院2016年11月至2019年8月之间手术的65例肝癌组织、癌边缘组织、非癌组织中BNIP-3和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,分析两者表达的相关性及与相关临床病理参数的关系。不同组织中mRNA表达的差异采用t检验,蛋白表达的差异采用Kruskal-Wallis H检验,BNIP-3和HIF-1α表达之间的相关性及与临床病理参数之间的比较采用Spearman相关性检验。结果肝癌组织与癌边缘组织BNIP-3、HIF-1α mRNA表达显著高于非癌组织,并且两者表达呈正相关(r=0.638、0.532,P<0.05),BNIP-3和HIF-1α在癌边缘组织蛋白表达阳性率分别73.8%、64.6%,显著高于癌组织及非癌组织(χ2=38.587、31.128,P<0.05)。相关性分析发现肝癌组织中BNIP-3蛋白表达与淋巴结转移、癌栓、TNM分期及术后复发时间有关(r=0.631、0.522、0.541、0.714,P<0.05),与性别、年龄、甲胎蛋白(AFP)、肿瘤大小、肿瘤数目、病理分期等无关;肝细胞肝癌(HCC)患者术后无瘤生存时间随癌组织BNIP-3蛋白表达阳性强度增高而延长。结论BNIP-3在肝癌中的表达与缺氧及肝癌复发转移明显相关。
简介:摘要目的探讨miR-767-3p参与结直肠癌发病的确切机制。方法收集临床原发性结直肠癌患者的结直肠癌组织及其相应癌旁正常组织标本60对,采用miRNA-RTPCR检测miR-767-3p在人结直肠癌组织和细胞系中的表达水平。采用MTT、克隆形成检测miR-767-3p对细胞增殖的影响。通过transwell实验分析确定其迁移和侵袭能力。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-767-3p与其靶基因的直接相互作用。采用qRT-PCR检测细胞中的相关分子。通过χ2检验及SPSS 17.0软件分析miR-767-3p与结直肠癌患者临床病理特征之间的关系。结果miR-767-3p在人结直肠癌组织中的表达明显低于癌旁组织,而且其在人结直肠癌细胞系中也是低表达。miR-767-3p的表达与结直肠癌TNM分期(χ2=6.07,P=0.014)、肿瘤大小(χ2=7.59,P=0.006)及淋巴结转移(χ2=6.49,P=0.011)相关。在结直肠细胞系中(HCT116和SW480)过表达miR-767-3p后,细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显降低。UGT2B17在人结直肠癌组织及细胞系中高表达。miR-767-3p能够靶向调控UGT2B17的表达。在结直肠细胞系中(HCT116和SW480)低表达UGT2B17后,细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显降低。在体内实验中,过表达miR-767-3p能够抑制结直肠癌。结论miR-767-3p的过度表达可通过下调结直肠癌中UGT2B17的表达来抑制细胞增殖、迁移和侵袭,提示其可能是结肠癌患者的潜在治疗靶点。
简介:摘要目的探讨壳多糖酶3样蛋白质1(chitinase-3-like protein 1,CHI3L1)对软骨细胞生物学功能的影响在关节突关节退行性病变中的作用。方法收集人关节突关节软骨组织标本,检测CHI3L1基因的mRNA相对表达量,分析关节突关节退变等级与患者性别、年龄、CHI3L1基因mRNA相对表达量的相关性。体外培养人软骨细胞,检测CHI3L1组与对照组软骨细胞增殖、周期、凋亡和相关炎症因子表达的差异,以信号传导通路蛋白芯片分析CHI3L1调节软骨细胞退变的作用机制。结果关节突关节退变等级与CHI3L1基因mRNA相对表达量呈正相关(r=0.76,P<0.001),与性别不相关(r=-0.12,P=0.500),与年龄呈正相关(r=0.47,P=0.005)。退变组CHI3L1基因mRNA表达量升高,且随退变等级加重表达量升高(F=18.90,P<0.001)。与对照组比较,CHI3L1组软骨细胞在培养48 h(OD490/fold=7.132)、72 h(OD490/fold=4.803)、96 h(OD490/fold=2.431)和120 h(OD490/fold=0.009)的增殖倍数显著降低。CHI3L1组软骨细胞处于G1期、S期和G2/M期的比例分别为85.03%±3.05%、12.78%±2.29%和0.90%±0.76%,对照组分别为73.93%±2.73%、22.81%±1.93%和0.99%±0.87%;两组软骨细胞G1期比例(t=4.70,P<0.001)和S期比例(t=5.80,P<0.001)的差异均有统计学意义;两组软骨细胞凋亡百分比分别为8.64%±0.76%和5.68%±1.13%,差异有统计学意义(t=4.47,P<0.001);CHI3L1组软骨细胞IL-6的表达量为(49.60±0.01) pg/ml,大于对照组的(47.88±0.01) pg/ml(t=132.72,P<0.001),TNF-α的表达量为(95.93±0.02) pg/ml,大于对照组的(90.69±0.02) pg/ml(t=376.10,P<0.001)。蛋白芯片检测到表达量显著差异的蛋白共53个,蛋白磷酸化水平显著差异的蛋白43个。通过生物信息学分析筛选出差异蛋白可能参与的信号通路共16个。MAPK信号通路中,CHI3L1组软骨细胞MAPK1和RAF1蛋白的表达量(分别为1.094±0.00、0.988±0.00)较对照组(分别为0.814±0.00、0.786±0.00)升高(t=103.16,P<0.001;t=54.32,P<0.001)。结论CHI3L1的表达与关节突关节退行性病变相关:CHI3L1可抑制关节软骨细胞增殖,抑制软骨细胞周期由G1期进入S期,促进软骨细胞凋亡,促进软骨细胞表达IL-6和TNF-α;可通过调节MAPK信号通路调节软骨细胞的生物学功能,是关节突关节退行性病变临床诊疗的潜在生物标志物。
简介:摘要:目的 报道3例经皮椎间孔镜下腰椎间盘切除术中导丝断裂的病例,并提出相应的预防和处理措施。方法 本组3例患者术中导丝断裂均发生在置入软组织扩张器械时且均听到了明显的异响。导丝的断裂均经C-臂透视得以证实。结果 3例患者中断裂的导丝均被完整取出。第1例患者断裂的导丝尾端位于切口附近筋膜层位置,用血管钳沿穿刺方向予以钳夹取出;第2例患者断裂的导丝尾端在C臂透视下用常规髓核钳予以完整取出;第3例患者断裂的导丝尾端在椎间孔镜直视下用镜下髓核钳予以完整取出。结论 操作不规范、器械老化及患者个体肥胖、肌肉发达等均是椎间孔镜术中发生导丝断裂的危险因素。一旦发生导丝断裂,首先要确认导丝断端尾端的位置,根据具体情况选用合适的途径及方法将断端予以取出。
简介:摘要目的探究组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在肾缺血再灌注诱导的急性肾损伤中的作用及其机制。方法2021年4月至2021年10月于武汉大学人民医院使用C57BL/6雄性小鼠60只建立肾缺血再灌注损伤(I/R)模型,等量随机分为假手术(Sham)组、缺血再灌注(I/R)组、I/R+二甲基亚砜(DMSO)组、I/R+HDAC3抑制剂AES-135低、中、高剂量组。用苏木精-伊红(HE)染色评估肾损伤情况;血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)定量肾功能水平;蛋白质印记(WB)法检测HDAC3及凋亡蛋白表达水平;过氧化氢(H2O2)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)评估氧化应激水平。组间比较采用方差分析和Tukey-Kramer检验。结果HDAC3的蛋白表达水平随着缺氧时间的延长逐渐增高,在缺氧45 min组蛋白组表达水平明显高于Sham组(2.147±0.166比1.013±0.023,F=173.4,P<0.01)。高剂量抑制剂组小鼠BUN及Cr水平明显低于I/R组(BUN:26.54±1.16比60.43±3.06;Cr:68.67±6.02比161.70±4.16,F=161.8,P<0.01)。高剂量抑制组小鼠的凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)的水平明显低于I/R组(bax:3.483±0.136比2.273±0.064;cleaved Caspase-3:1.827±0.069比1.347±0.028,F=7.2,P<0.05),高剂量抑制组小鼠的氧化应激相关H2O2、MDA及SOD的水平明显低于I/R组(H2O2:3.82±0.21比5.89±0.19;MDA:1.34±0.11比2.12±0.09;SOD:154.56±7.21比71.33±6.51,F=243.9,P<0.01)。结论HDAC3在肾缺血再灌注损伤中上调,抑制HDAC3通过减少细胞凋亡及氧化应激水平,减轻肾缺血再灌注损伤。
简介:摘要目的探索使用胸骨全切或部分切除术治疗胸骨孤立性浆细胞瘤的有效性及使用3D打印聚醚醚酮(PEEK)置入物对胸壁缺损进行重建的可行性。方法本研究共纳入胸骨孤立性浆细胞瘤患者6例,其中男5例,女1例,年龄(57.7±9.4)岁(42~71岁),所有患者接受了胸骨全切或部分切除术治疗胸骨浆细胞瘤,并在切除后使用3D打印PEEK置入物对胸壁缺损进行重建。随访观察收集患者的围手术期相关数据及人口学特征,对所得数据进行统计学分析。结果所有患者均为胸骨孤立性浆细胞瘤。所有患者完成胸壁重建后均能维持正常胸壁结构,缺损面积(102.7±18.8)cm2,术后未发生反常呼吸等并发症。6例患者均顺利出院,围手术期内未发生相关并发症。术后平均随访(31.2±15.4)个月,未发生置入物相关并发症,且术后无复发、转移及死亡。结论使用胸骨全切或部分切除术能有效治疗胸骨浆细胞瘤,结合3D打印PEEK置入物完成胸壁重建效果良好,是一种可靠的临床治疗方法。
简介:摘要目的观察长链非编码RNA母系表达基因3(MEG3)通过Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力的影响。方法将胶质瘤细胞(购自美国典型菌种保藏中心细胞库)分为3组,空白对照组(NOR)、基因转染组(MEG3)和基因抑制组(siMEG3)。空白组不做处理,正常培养。基因转染组转染MEG3基因,基因抑制组进行基因干扰处理。应用蛋白质印迹法(Western blot)测定蛋白表达量,应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测基因表达量。方差齐性检验后,组间比较应用t检验,用Pearson Correlation检验相关性,组间比较采用χ2分析。结果在细胞转染MEG3基因以后,随着培养时间的延长,细胞的凋亡率升至61.05±2.77,高于对照组和基因抑制组(F=23.543,P<0.05)。MEG3基因被敲除以后,胶质瘤细胞的细胞凋亡率高于空白对照组(P<0.05)。在细胞转染MEG3基因48 h以后,细胞的迁移数量为105.36±15.27低于对照组和基因抑制组(F=33.350,P<0.05)。当MEG3基因被抑制后,细胞的迁移数量为989.41±11.06,高于空白对照组(F=40.667,P<0.05)。在细胞转染MEG3基因以后,细胞的侵袭数量为251.25±35.85,低于对照组和基因敲除组(F=31.167,P<0.05)。MEG3基因被敲除后,细胞的侵袭数量为1 500.00±84.76,高于空白对照组(F=63.762,P<0.05)。与基因抑制组相比,对照组和基因转染组的c-Jun基因降低,其中基因转染组低于空白对照组(F=15.426,P<0.05)。结论长链非编码RNA MEG3可以通过Wnt/β-catenin信号通路来抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭。
简介:摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) GSTM3TV2对肝癌细胞增殖、侵袭和转移的影响,并探讨其与微小RNA(miR)-597的相互作用。方法选取郑州大学附属南阳市中心医院、南阳市宛城区第一人民医院和郑州大学第一附属医院2016年5月到2018年5月收集的126例肝癌和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析癌旁和肝癌组织中GSTM3TV2和miR-597表达水平;在肝癌细胞系HepG2建立lncRNA对照组和GSTM3TV2 KD组细胞系,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell和体内异体移植瘤实验检测GSTM3TV2的体内外功能;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析GSTM3TV2与miR-597的关系;将miRNA抑制剂转染HepG2细胞,分析其作用机制。计量数据比较采用t检验。结果肝癌组织中GSTM3TV2表达水平(2.96±0.34)明显高于癌旁组织(2.96±0.34),差异有统计学意义(t=4.819,P<0.05)。lncRNA对照组细胞48 h吸光度(A)值(2.17±0.22)明显高于GSTM3TV2 KD组(1.09±0.20),差异有统计学意义(t=3.429,P<0.05)。lncRNA对照组细胞侵袭数量[(154.82±13.83)个]明显高于GSTM3TV2 KD组[(87.29±10.43)个],差异有统计学意义(t=5.018,P<0.05)。lncRNA对照组细胞体内成瘤体积[(1 048.45±251.30) mm3]明显大于GSTM3TV2 KD组[(759.49±142.09) mm3],差异有统计学意义(t=4.719,P<0.05)。lncRNA对照组细胞体内肿瘤重量[(1.09±0.21) g]明显高于GSTM3TV2 KD组[(0.61±0.15) g],差异有统计学意义(t=3.185,P<0.05)。lncRNA对照组细胞淋巴结转移数量[(15.29±3.39)个]明显多于GSTM3TV2 KD组[(8.22±2.09)个],差异有统计学意义(t=3.103,P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶活性结果显示miR-597是GSTM3TV2的靶基因。lncRNA对照组细胞miR-597表达水平(1.09±0.21)明显低于GSTM3TV2 KD组(2.80±0.26),差异有统计学意义(t=3.529,P<0.05)。结论lncRNA GSTM3TV2通过调节miR-597促进肝癌细胞增殖、侵袭和转移等恶性细胞生物学行为。