简介：摘要目的探讨巨噬细胞胱天蛋白酶募集域蛋白9(card9)在胰腺腺泡细胞导管组织转化中的作用。方法构建3条靶向card9的小分子干扰RNA(siRNA-card9)，荧光显微镜下观察转染巨噬细胞的荧光强度，采用实时定量PCR法检测巨噬细胞card9 mRNA表达量，筛选巨噬细胞的最佳转染效率。将5×105巨噬细胞和100 μg/ml β葡聚糖体外常规培养12、24 h后，分成阳性细胞组(巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9－/－巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阴性细胞组，采用蛋白质免疫印迹法检测各组巨噬细胞card9蛋白表达水平。取1×105巨噬细胞、1×105胰腺腺泡细胞加入Transwell小室上下层共培养120 h后，分为阳性细胞组(巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9－/－巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阴性细胞组，取下室的胰腺腺泡细胞，采用免疫荧光化学染色法检测腺泡细胞导管组织转化标志物CK19蛋白表达。结果siRNA-card9转染巨噬细胞24 h荧光强度最强，浓度为200 nmol/L时抑制效率最高。阳性细胞组、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组、β葡聚糖刺激阴性细胞组培养24 h后，巨噬细胞card9蛋白表达量分别为0.81±0.05、1.46±0.05、0.42±0.06、0.46±0.06，β葡聚糖刺激阳性细胞组较阳性细胞组显著升高，差异具有统计学意义(P<0.05)。100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阳性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光较阳性细胞组明显增强，且呈β葡聚糖剂量依赖性；而阴性细胞组、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阴性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光强度均较阳性细胞组显著降低。结论巨噬细胞card9表达水平升高可诱导腺泡细胞导管组织转化，提示可能存在card9介导的胰腺癌发病机制。

简介：摘要目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9（caspase recruitment domain protein 9，CARD9）基因多态性与脓毒症相关肝损伤风险的相关性。方法采用病例对照研究方法，招募重症监护室122例脓毒症患者，将其中伴有肝损伤者设为肝损害组（66例），不伴肝损伤者设为对照组（60例）。采用TaqMan法检测患者外周血CARD9基因的6个单核苷酸多态性位点，观察两组患者基线资料，比较两组基因型分布、等位基因频率的差异，计算其优势比（odds ratio，OR）。正态分布检验采用Kolmogorov-Smirnov检验，不符合正态分布的计量资料以M（Q1，Q3）表示，两组间比较采用Mann-Whitney U检验。计数资料组间比较采用χ2检验和Fisher精确概率法。采用χ2检验判断基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡检验。结果与对照组相比，肝损害组患者CARD9基因rs10781500位点的CC基因型分布明显增加（19与36，χ2=6.87，P=0.033），携带C等位基因的脓毒症患者诱发肝损伤的概率更大（OR=1.375，95% CI 1.024~1.846，P=0.023），CC基因型患者诱发肝损伤的风险更高（OR=2.696，95% CI 1.238~5.869，P=0.012）。肝损害组CC基因型者丙氨酸氨基转移酶、序贯性器官功能衰竭评分明显升高［310（213，648）U/L与187（114，304）U/L，Z=3.32，P=0.001和9（6，14）分与7（5，9）分，Z=2.49，P=0.013］。结论CARD9基因rs10781500位点多态性与脓毒症相关肝损伤有关，其C等位基因可能为易感基因。

简介：摘要目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9（caspase recruitment domain protein 9，Card9）基因多态性与急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）及生长抑素临床疗效的关系。方法选取2019年6月至2020年5月上海市松江区中心医院就诊的86例AP患者为研究对象，同期选择健康志愿者81名为对照组，进行前瞻性队列研究。查阅国家生物技术信息中心（National Center for Biotechnology Information，NCBI）核苷酸数据库，筛选Card9的10个常见单核苷酸多态性位点。SNapShot微测序法检测Card9单核苷酸多态性位点。AP患者均给予生长抑素治疗，观察Card9单核苷酸多态性与AP患者临床症状、辅助检查指标的关系。正态分布的计量资料两组间比较采用独立样本t检验；非正态分布计量资料以M（Q1，Q3）表示，组间比较应用秩和检验。计数资料组间比较采用χ2检验。结果AP组患者Card9 rs10870077 C>G单核苷酸多态性位点频率较健康对照组显著增加，差异有统计学意义（OR=1.934，95% CI =1.011~3.700，P=0.046）。与CC基因型相比，Card9 rs10870077 C>G中重症AP患者生长抑素治疗组腹痛腹胀消失时间明显延长［（5.64±2.06）d与（3.76±1.23）d，t=2.98，P=0.006］，Card9 rs10870077 C>G重症AP患者生长抑素治疗组住院时间增加［（13.25±5.31）d与（9.00±3.68）d，t=1.51，P=0.170］。结论Card9 rs10870077 C>G是AP的易感因素，与重症AP生长抑素临床疗效的个体差异存在一定相关性。