荧光定量PCR检测解脲脲原体,沙眼衣原体效果

(整期优先)网络出版时间:2023-09-12
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荧光定量PCR检测解脲脲原体,沙眼衣原体效果

张二朋雷秋香赵建英陈科

邢台市人民医院 河北邢台 054000

摘要目的分析荧光定量PCR检测解脲脲原体,沙眼衣原体效果。方法选择我院2021年1月-2022年1月疑似解脲脲原体80例和沙眼衣原体感染患者80例,进行荧光定量PCR检测,并用传统检测技术作为对照,比较两种方法差异。结果用荧光定量 PCR法测定解脲脲原体、沙眼衣原体的时间比传统方法短,阳性检出率与传统方法相比,差异有显著性(P<0.05)。结论与传统的检测方法相比,荧光 PCR检测时间短,检出率高,可以满足临床快速、准确、简便的检测需求。

【关键词】荧光定量PCR检测;解脲脲原体;沙眼衣原体;效果

根据 WHO报告,沙眼衣原体和脲脲原体是性病的主要致病因子。我国 沙眼衣原体和 解脲脲原体感染率逐年上升,主要是由于反复感染和不合理使用抗生素所致。男性感染会引起尿道炎、附睾炎、前列腺炎等疾病;除了宫颈炎之外, 沙眼衣原体感染还会导致子宫内膜炎、子宫内膜炎、盆腔炎性疾病,还会引发异位妊娠、不孕、肛周炎、慢性盆腔痛等,此外, 沙眼衣原体、 解脲脲原体所致的慢性子宫颈炎也是宫颈癌的诱因之一。荧光定量PCR技术的问世,使得 PCR技术在分子生物学中已成为一种常用的检测手段,在遗传病、肿瘤和微小病变的诊断、临床标本中的病原体检测中也有广泛的应用[1]。荧光定量PCR是一种从定性到定量的跨越,它突破了传统 PCR技术所面临的诸多困难。荧光定量PCR技术具有高灵敏度、高准确性、高灵敏度和高特异性等特点,可以有效地解决传统方法中的高错误。本研究分析了荧光定量PCR检测解脲脲原体,沙眼衣原体效果,如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选择我院2021年1月-2022年1月疑似解脲脲原体80例和沙眼衣原体感染患者80例,进行荧光定量PCR检测,并用传统检测技术作为对照,比较两种方法差异。其中,对照组男45例,女35例,年龄31-65(47.55±2.21)岁。观察组男44例,女36例,年龄32-67(47.23±2.67)岁。两组统计学比较显示P大于0.05。本研究经伦理批准。

1.2方法

1.2.1样品制备(1)女患者。对患者的尿道和阴道进行消毒,用无菌棉签插入尿道口和阴道口。(2 cm)收集分泌物,并在10秒内拧出。如果出现外阴糜烂、溃疡等症状,可用棉拭子擦拭保留。(2)男患者:对患者的尿道进行消毒,然后将包皮翻过来,用抹布擦干净。每个患者都准备了两份样品,以备以后的检验。

1.2.2常规检查(1) 解脲脲原体组,对患者进行培养,取标本后立即放入培养液中进行常规培养。珠海丽珠试剂公司对该产品进行了临床检验。(2) 沙眼衣原体组,对患者进行了胶体金法检测,也就是取样品后,由上海美艾利尔仪器公司提供的沙眼衣原体抗原检测试剂盒进行常规的检验。

1.2.3采用荧光定量 PCR技术对样品进行了提取,并对样品进行了洗脱。然后,进行离心(大约5分钟),萃取、沉淀,添加50微升的 DNA萃取溶液,沸腾(大约10分钟),然后再次离心,最终萃取5微升的上清液。利用达安公司的解脲脲原体和沙眼衣原体,使用荧光定量扩增仪(ABI-7500型)和相应的 PCR试剂,按照使用说明书反复循环,然后由仪器进行分析和测试。

1.3观察指标

分析检查时间和特异性、灵敏度等指标。

1.4统计学方法

在SPSS22.0软件中,计数x2统计,计量t检验,P<0.05表示差异有意义。

2结果

2.1两种方法检测时间比较

用荧光定量 PCR法测定解脲脲原体、沙眼衣原体的时间比传统方法短,P<0.05,见表1.

表1两种方法检测时间比较(x±s,h)

组别

解脲脲原体

沙眼衣原体

常规方法

48.56±3.91

24.25±3.18

荧光定量 PCR法

2.21±0.12

3.19±0.51

t

8.045

7.981

P

0.000

0.000

2.2阳性检出率比较

荧光定量 PCR阳性检出率与传统方法相比,差异有显著性(P<0.05)。如表2.

表2检出率比较[例数(%)]

组别

解脲脲原体阳性检出率

沙眼衣原体阳性检出率

常规方法

64(80.00)

59(73.75)

荧光定量 PCR法

72(90.00)

77(96.25)

X2

6.934

10.421

P

0.012

0.000

3讨论

解脲脲原体和沙眼衣原体是性传播疾病以及许多生殖系统、泌尿系统疾病的主要感染病原体之一。一般而言,解脲脲原体感染容易诱发非淋菌性尿道炎等疾病,而沙眼衣原体感染则容易引发宫颈炎、盆腔炎、子宫内膜炎、尿道炎、前列腺炎等。目前,对解脲脲原体、沙眼衣原体的检测已经成为上述相关疾病临床诊断的首选方法和途径,其中解脲脲原体多采用细胞培养法检测,沙眼衣原体多采用胶体金法检测。但这些常规方法存在检出率低、周期长、灵敏度差等问题,容易使得临床诊断出现错诊、漏诊等情况[3]。荧光定量 PCR是临床上新兴起的一类检测方法,目前主要应用于分子生物学、肿瘤疾病、遗传疾病、微小病变等多个领域的临床检查诊断中。相较于常规检测方法,它的临床操作简便、检测时间短,且检出率、准确率以及灵敏度均较高,能够满足临床诊断的主要需求,为临床提供准确、科学的诊断依据。

从本次结果可见,用荧光定量 PCR法测定解脲脲原体、沙眼衣原体的时间比传统方法短,阳性检出率与传统方法相比,差异有显著性(P<0.05)。

因此,与传统的检测方法相比,荧光 PCR检测时间短,检出率高,可以满足临床快速、准确、简便的检测需求。

参考文献:

[1]周玉航,江涛,黄玉林,查仕方,苏萍. 荧光定量PCR检测解脲脲原体、沙眼衣原体效果分析[J]. 深圳中西医结合杂志,2021,31(10):122-123.

[2]刘涛,伍宁,胡立平. 荧光定量PCR检测解脲支原体沙眼衣原体及淋病奈瑟氏菌结果分析[J]. 中国艾滋病性病,2019,25(07):732-734+750.

作者简介:张二朋(1984-10-),男,汉族,河北邢台人,研究生,主管检验师,研究方向:从事临床检验,急诊工作多年,血细胞的检测,凝血实验,白血病的检测,生化项目的检测。