PD1及PDL1在乳腺癌中的表达变化

PD1及PDL1在乳腺癌中的表达变化

吴程

（成都中医药大学附属医院，四川 成都，610072）

【摘要】目的 探析乳腺癌中PD1及PDL1的表达情况。方法 本次研究病例挑选时间：2022年3月-2023年2月，总例数：80例（均确诊为乳腺癌），分别对乳腺癌组织以及癌旁组织中PD1及PDL1阳性表达情况进行统计后对比。结果 乳腺癌组织中PD1及PDL1阳性表达均高于癌旁组织，阴性表达低于癌旁组织，差异显著（P＜0.05）。结论 PD1和PDL1在乳腺癌组织中呈高水平的高表达，并与病人的临床病理指标和预后有较好的相关性。

【关键词】全程护理；老年患者；衰弱综合征；护理管理

恶性肿瘤的发生有多种原因，从理论上讲，机体免疫系统可以将肿瘤细胞识别并消除，而自身免疫系统很难摧毁肿瘤细胞。有研究显示，肿瘤细胞所处的微环境具有较高的免疫抑制水平，可以从自身免疫反应中逃脱，其主要方式包括：将免疫抑制性细胞因子分泌出去，对负性共刺激信号进行介导等。程序性死亡受体1 （PD1）和细胞程序性死亡配体1 （PDL1）在 T淋巴细胞抑制和免疫耐受诱导中起着极其关键的作用[1]。本次研究对80例乳腺癌患者癌症组织及癌旁组织中PD1及PDL1的表达进行分析。报道如下

1 资料和方法

1.1 一般资料

本次研究病例挑选时间：2022年3月-2023年2月，总例数：80例（均确诊为乳腺癌），年龄32-69岁，均值（52.64±2.54）岁；肿瘤组织最大位置直径为1.6-8.4厘米，均值（3.09±0.24）厘米；肿瘤位置，外上象限49例，外下象限10例，内上象限8例，内下象限6例，中央部7例；临床分期Ⅰ～Ⅱ期58例，Ⅲ～Ⅴ期22例。

1.2 方法

1.2.1PD1及PDL1的表达检测方法

采用免疫组织化学方法，将被切除的乳腺组织和距离其周边5 cm或更高的癌旁正常组织进行清洗，然后将其固定并包埋，形成5微米厚的连续切片。对切片进行常规脱蜡和水化处理。在室温下，用3%H2O2孵育10分钟，用 PBS冲洗三次，一次5分钟，再用95℃的 pH值为6.0的0.01 mol/L柠檬酸钠缓冲液浸泡15~20分钟，以修复抗原。用 PBS冲洗三次，每次5分钟，在37℃的条件下，用普通山羊血清将其封闭10分钟，然后将血清丢弃，在4℃的条件下，加入PD1、PDL1一抗，并在4℃的条件下进行孵育。用 PBS冲洗5分钟，3次后，加入1:200浓度的二抗，于37℃下培养30分钟。用 PBS冲洗5分钟，3次后，加入 HRP标记的链霉素卵白素工作溶液，37℃培养30分钟。经三次 PBS水洗，每次5分钟，取色，复染，脱水，澄清，封片。

1.2.2PD1及PDL1的阳性表达判定方法

PD1蛋白在细胞核内有大量的蛋白，分布于细胞核内，表面淡黄色至棕色；PDL1蛋白表达于胞浆，以淡黄色至棕色的颗粒形式存在。选取5个（200*）的视场，统计各视场中的阳性细胞所占比例，并根据这些比例和着色强度来综合判定PD1和PDL1的阳性表达。阳性细胞所占比例为0,1%至10%,11%至50%,51%至80%,81%至100%，分别为0,1分为1,1分为2,11%至50%,51%至80%,81%至100%；着色力：无色为0，淡黄为1，深黄为2，棕黄为3。两者相加，≤4分和>4分分别为阴性和阳性表达。

1.3 观察指标

分别对乳腺癌组织以及癌旁组织中PD1及PDL1阳性表达情况进行统计后对比。

1.4 统计学分析

用SPSS22.0软件处理数据，计量资料为（±s），计算所得为t，计数资料为（%），计算所得为²，计算后P＜0.05则有统计学意义。

2 结果

80例乳腺癌组织PD1表达中阳性例数为62例，占比为77.5%，80例乳腺癌组织PDL1表达中阳性例数为62例，占比为77.5%，80例癌旁组织PD1表达中阳性例数为39例，占比为48.75%，80例癌旁组织PDL1表达中阳性例数为19例，占比为23.75%，80例乳腺癌组织PD1表达中阳性例数为18例，占比为22.5%，80例乳腺癌组织PDL1表达中阳性例数为18例，占比为22.5%，80例癌旁组织PD1表达中阳性例数为41例，占比为51.25%，80例癌旁组织PDL1表达中阳性例数为61例，占比为76.25%。乳腺癌组织中PD1及PDL1阳性表达均高于癌旁组织，阴性表达低于癌旁组织，差异显著（P＜0.05）。

3 讨论

PD1属于CD28家族，是一种由288个氨基酸组成的跨膜蛋白，其分子量50~55 kD。在参与抗原识别的免疫细胞中，PD1的表达升高，可以成为一种免疫细胞激活标志。PDL1和PDL2是PD1的两个配体，它们都属于B7家族，都是一种穿膜的小分子，PDL1在IFN-伽马的刺激下，主要在肿瘤细胞和造血细胞等的细胞表面进行表达；PDL2对IL-4更敏感，仅出现于Th2型抗原提呈细胞。文献报道PDL2与PD1的结合强度高于PDL1，且PDL1的调节效应更为显著

[2]。通常，PD1通过与配体的相互作用，可以通过与其受体的相互作用来抑制自身免疫，从而达到防止自身免疫性疾病的目的。然而，在许多肿瘤细胞中，PDL1的表达会减弱人体对肿瘤细胞的免疫应答，路径为和淋巴细胞表面的PD1相互作用，进而为肿瘤细胞的免疫逃避提供了有利条件，导致了肿瘤发生发展。已有报道显示，在肿瘤的肿瘤组织中，PD1和PDL1的高表达比例高于癌旁的正常组织。已有文献报道，肿瘤直径，组织学分级，淋巴结转移与肿瘤组织中PD1,PDL1的表达量有关。我们的实验发现，PD1和PDL1在乳腺癌中的表达比癌旁更高，而在肿瘤中的表达则比癌旁更低；PD1在肿瘤中的表达量与肿瘤病理分期为负相关，与肿瘤分期为负相关，PD1在肿瘤中的表达量与肿瘤分期为负相关；我们前期研究发现，PDL1基因在肿瘤细胞中的表达水平较高，且PDL1基因在肿瘤细胞中的表达水平较高，提示PD1基因和PDL1基因在肿瘤细胞中的表达水平较高[3]。前期研究发现，PD1和PDL1在乳腺癌中呈高表达，且与非高表达的肿瘤组织相比，其3年生存率更低，提示其预后更差。PD1/PDL1是一种新型的抗肿瘤药物，其作用机制可能是针对PD1/PDL1的特异性靶向，实现对病人的个性化诊疗，延迟或预防癌症的复发，改善病人的生活品质。

综上，PD1和PDL1在乳腺癌组织中呈高水平的高表达，并与病人的临床病理指标和预后有较好的相关性。

参考文献

[1]李然,曹锦涛,闵锐,孙帅,冯振中,李楠.PTEN、Twist1与肿瘤浸润淋巴细胞PD1的表达在三阴型乳腺癌中的临床病理意义[J].海南医学院学报,2021,27(12):890-897.

[2]马友龙,司景元,延靖蕾,曹振东,祁海艳.HPV16感染乳腺癌MCM7、PD1、PD-L1表达水平及其临床意义[J].中华医院感染学杂志,2021,31(24):3742-3746.

[3]刘金发,陈亚勤,温路生,禹乐,孟加榕,陈艺锦.miR-10b靶向PARK2调控乳腺癌对PD1抑制剂的敏感性[J].中国现代普通外科进展,2023,26(01):13-17+23.