电化学发光和化学发光测TSH的方法学比较

电化学发光和化学发光测TSH的方法学比较

董泽娇

宜宾市第二中医医院，四川 宜宾，644000

【摘要】目的探究分析电化学发光和化学发光测TSH的效果和临床应用价值。方法选取130份血清标本（2020年5月—2021年5月于我院门诊接受诊疗的患者所提供）作为本次研究材料，再根据所选血清标本编号的数字奇偶性将其划分为对照组和观察组两组，每组均分到65份标本材料，均需对促甲状腺激素（TSH）的水平进行测定。其中，对照组所在的所有血清标本均采用化学发光免疫法进行检测，而观察组所在的所有血清标本均采用电化学发光免疫法进行检测，连续检测1周，记录检测数据，对比两种不同检测方式的TSH检测效果。结果 （1）就精密度上来看，观察组所用检测方式的低、中、高批内和批间变异系数值（CV）均低于对照组，结果数据经对比显示（P＜0.05）有统计学意义；（2）就准确度上来看，观察组所用检测方式的精准度显著高于对照组，结果数据经对比显示（P＜0.05）有统计学意义。结论电化学发光和化学发光测TSH都可以获得相应的检测结果，但就检测的精密性和准确度来看，电化学发光法更具优势，检测价值更高，可以考虑于后期进一步增强对该检测法的推广应用力度。

【关键字】TSH；促甲状腺激素；电化学发光免疫法；化学发光免疫法；检测效果

促甲状腺激素（TSH）是腺垂体分泌的重要激素，其主要生理功能在于刺激甲状腺细胞的发育、合成和促进甲状腺激素分泌，是平衡甲状腺功能的重要因素。因此，在临床中，TSH是检测评估患者甲状腺功能的重要指标之一。诸多专家根据多年的研究发现，不同的检测方式对于TSH的检测作用不一样，得到的检测结果也具有差异，如何选择合适的检测方式是诊断与TSH水平变化相关疾病的关键[1]。由此可见，研究出科学有效的TSH检测方式具有重要的临床意义。笔者为研究电化学发光和化学发光测TSH的效果和临床应用价值，此次特从院中抽取130例患者提供的血清标本进行分组调研，相关分析报告如下。

1 对象和方法

1.1对象

选取130份血清标本（2020年5月—2021年5月于我院门诊接受诊疗的患者所提供）作为本次研究材料，再根据所选血清标本编号的数字奇偶性将其划分为对照组和观察组两组，每组均分到65份标本材料，均需对促甲状腺激素（TSH）的水平进行测定。其中，对照组中，提供标本为男性者占33例，女性占32例，年龄在25-60岁，均值为（47.22±6.11）岁。甲状腺功能亢进患者有19例，甲状腺功能减退患者有17例，甲状腺瘤患者有8例，甲状腺结节患者有12例，其余标本则为健康体检者提供；观察组中，提供标本为男性者占31例，女性占34例，年龄在25-60岁，均值为（47.51±6.09）岁。甲状腺功能亢进患者有21例，甲状腺功能减退患者有18例，甲状腺瘤患者有10例，甲状腺结节患者有11例，其余标本则为健康体检者提供。两组标本提供的患者就以上检测前的基线资料进行对比，统计结果显示（P＞0.05），研究结论具有可比性。经确认，此次研究已获准医院伦理会研究批准和支持。

纳入标准：（1）收集方式正确且保存完善的血清标本；（2）1周内未服用任何影响本次检查结果的中药或西药药物的患者所提供的的血清标本；（3）家属知情且自愿表示参与研究的患者所提供的的血清标本。

排除标准：（1）合并有多种严重器官功能障碍疾病（包括但不限于恶性肿瘤）者所提供的的血清标本；（2）合并有三高症的患者所提供的的血清标本；（3）精神状态异常，无清晰意识或存在沟通障碍的患者所提供的的血清标本；（4）妊娠或哺乳期妇女所提供的血清标本；（5）不确定可以全程配合完成整个研究流程的患者所提供的的血清标本。

1.2方法

观察组所在的所有血清标本均采用电化学发光免疫法进行检测，首先，按照正确流程采集血液标本，被采集者需要禁饮禁食8h，于清晨空腹时分为最佳采集时间，收取受检者的空腹静脉血6mL，将其划分为两等分，离心分离血清后置于-70℃的环境保存，之后分批按照不同检测方式对血清中的TSH进行检测；其次，选择美国雅培公司生产的型号为雅培i2000全自动电化学发光免疫分析仪作为本次TSH检测系统，实际为该检测仪的配套试剂，具体检测流程严格按照仪器操作手册进行。

对照组所在的所有血清标本均采用化学发光免疫法进行检测，检测前的血液标本采集和血清分离保存参考观察组，而仪器则选择美国Beckman公司生产的Access化学发光检测分析仪作为本次TSH检测系统，试剂为Access化学发光检测分析仪的配套检测试剂，具体检测流程严格按照仪器操作手册进行。

两种检测方式需在同一检测环境下进行检测，连续检测1周，记录检测数据，去除离点群，以电化学发光免疫法作为X轴，化学发光免疫法为Y轴，制作分析线性方程和相关系数，以此可以降低或避免外部因素对检测结果造成的偏差，也可进一步提高两种检测方式的检测公平性。具体如下图所示：

从上图中，我们可以分析总结出，本次实验方式与两种检测方式之间有很好的线性模式，排除离群点的情况下，两种检测方式的测定值存在高度相关关系，虽然均存在随结果增高偏差越大的缺陷，但实验结果足够满足临床要求。

1.3观察指标

（1）比较两种不同检测方式的TSH测定精密度，主要根据批内和批间变异系数值（CV）的差异来进行判定比较。实验中取三种浓度不一的质控品进行精密度的检测验证，分别对比低、中、高批内和批间变异系数值。

（2）比较两种不同检测方式的TSH测定准确度。选择甲状腺激素作为实验基质，分别加入低、中、高三种浓度不一的质控品设为样本1、2、3，计算出检测数据的均值，通过对比其检测结算结果来测定精准度。

1.4统计学分析

实验数据以Windows Excel软件建立数据库，数据处理采用SPSS22.0统计学软件进行统计分析，对定量数据做描述性统计分析，用独立样本t检验，对定性数据做频数表、百分率（n，%）描述性统计分析，用独立样本x2检验，检测标准采用双向95%有效区间检验，以P＜0.05表示有统计学差异。

2 结果

2.1两种不同检测方式的TSH测定精密度比较

就精密度上来看，观察组所用检测方式的低、中、高批内和批间变异系数值（CV）均低于对照组，结果数据经对比显示（P＜0.05）有统计学意义，详情见表1：

表1 两种不同检测方式的TSH测定精密度比较（，%）

2.2两种不同检测方式的TSH测定准确度比较

就准确度上来看，选择甲状腺激素作为实验基质，分别加入低、中、高三种浓度不一的质控品设为样本1、2、3，计算出检测数据的均值，结果显示，观察组所用检测方式的精准度显著高于对照组，结果数据经对比显示（P＜0.05）有统计学意义，详情见表2：

表2 两种不同检测方式的TSH测定准确度比较（）

3 讨论

促甲状腺激素（TSH）由垂体前叶分泌，分子量25000-28000，α和β亚基组成，分泌甲状腺激素是其重要生理功能，是调节机体甲状腺功能的主要激素物之一。但该物质的分泌本身受到下丘脑促甲状腺激素（TRH）的兴奋性影响，同时还受到生长抑素的抑制性影响，还关系着外周甲状腺激素水平的调节。一般情况下，甲状腺激素水平变化15%-20%，就会导致TSH水平发生50%-100%的变化，在甲状腺功能发生改变时，TSH的变化迅速而显著，其具体变化能够在很大程度上直接反映甲状腺功能的受损情况，其实验检测敏感度较高[2]。因此，通过检测血清中的TSH水平可以成为临床准确诊断与甲状腺功能病变的有效手段。

目前，TSH水平检测可选择的方式较多，但考虑到检测方法的操作便捷性、准确性、实用性等因素，电化学发光和化学发光检测在临床中的应用较为广泛。电化学发光免疫法是继EIA、RIA、FIA、时间分辨荧光免疫技术（TRFIA）之后的新一代标记免疫测定技术，是当前最先进的标记免疫测定技术之一，其工作原理为用电化学发光剂三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+标记Ab，通过Ag-Ab反应和磁珠分离技术，根据三联吡啶钌在电极上发出的光强度对待测的Ag或Ab进行定量/定性。此外，相较于化学发光免疫法，电化学发光免疫法的标记物可循环利用，发光时间更长，强度更高，更易于TSH的测定，其检测敏感度较高，可达pg/ml或pmol的水平，特异性也更强，变异系数值（CV）低于5%，测定范围更宽，可达7个数量级，实际稳定，无毒无污染，操作简单，耗时短，自动化更高,检测结果也更为稳定可靠[3]。依据本次研究结果显示，相较于对照组，观察组的TSH检测精密度和准确度均更高，数据对比（P＜0.05）。该研究结论充分表明了，在TSH检测中，电化学发光免疫法可以发挥出更巨大的作用，其临床应用价值更显著，能够成为TSH测定的一线检测方式。

综上，电化学发光和化学发光测TSH都可以获得相应的检测结果，但就检测的精密性和准确度来看，电化学发光法更具优势，检测价值更高。在后期关于TSH的检测实验中，可以考虑进一步增强对电化学发光法的推广应用力度。

参考文献

[1]王坤，崔建设，涂学亮. 化学发光免疫分析法检测成年人甲状腺激素参考区间的建立[J]. 中国医学装备, 2020, 17(9):119-124.

[2]徐清芳, 张美华, 姚文杰,等. 不同化学发光免疫分析系统检测亚临床甲状腺功能减退症血清促甲状腺素的对比研究[J]. 实用医技杂志, 2019, 26(9):1140-1141.

[3]李立和, 孙国忠, 张超. 内源性尿素对化学发光法检测TgAb,TPOAb和TSH的干扰研究[J]. 检验医学, 2020, 35(7):682-685.