生殖道沙眼衣原体假阴性结果分析

生殖道沙眼衣原体假阴性结果分析

刘定山

扬州东方医院检验科，江苏 扬州 225000

摘 要: 目的 通过对该院215例妇科及泌尿外科患者的生殖道沙眼衣原体检测，分析造成假阴性结果的原因。方法 收集该院2022年1～6月215例妇科及泌尿外科患者的生殖道分泌物标本，分别进行超高倍显微镜镜检和核酸扩增试验检测沙眼衣原体DNA。结果 超高倍显微镜检查活体衣原体和核酸扩增试验检测沙眼衣原体DNA的阳性率分别11.2%和15.3%；男性患者镜检法和核酸扩增法检测沙眼衣原体阳性率分别10.1%和15.2%、女性患者镜检法和核酸扩增法检测沙眼衣原体阳性率分别为11.8%和15.4%，女性患者阳性率略高于男性患者；超高倍显微镜镜检结果与核酸扩增结果符合率为87.4%，不符合率为12.6%；215例标本超高倍显微镜镜检阴性191例、核酸扩增试验阴性182例，有9例假阴性结果。结论 加强检验人员的相关专业知识培训，提高镜检识别能力，减少假阴性结果的发生率，为临床的诊疗提供快速、准确的指导。

关键词：沙眼衣原体；假阴性；结果分析

False-negative Chlamydia  trachomatis analysis of the genital tract

Ding-shan liu

Yangzhou eastern hospital  Clinical laboratory , jiangsu yangzhou 225,000

Abstract: Objective To analyze the causes of false negative results by detecting chlamydia trachomatis of reproductive tract in 215 gynecological and urological patients in our hospital. Methods The samples of genital secretions from 215 gynecological and urological patients in our hospital from January to June 2022 were collected, and the DNA of chlamydia trachomatis was detected by ultra high magnification microscopy and nucleic acid amplification test. Results The positive rates of chlamydia trachomatis DNA were 11.2% and 15.3% respectively by ultrahigh magnification microscopy and nucleic acid amplification test. The positive rates of chlamydia trachomatis detected by microscopy and nucleic acid amplification were 10.1% and 15.2% in male patients, and 11.8% and 15.4% in female patients, respectively. The positive rates of chlamydia trachomatis detected by microscopy and nucleic acid amplification were slightly higher in female patients than in male patients. The coincidence rate of ultrahigh magnification microscope results with nucleic acid amplification was 87.4%, and the non-coincidence rate was 12.6%. Among the 215 specimens, 191 were negative by ultrahigh magnification microscopy, 182 were negative by nucleic acid amplification test, and 9 were false negative. Conclusion Strengthen the professional knowledge training of the examiners, improve the identification ability of microscopic examination, reduce the incidence of false negative results, and provide rapid and accurate guidance for clinical diagnosis and treatment.

Keywords: Chlamydia trachomatis, false negative, analysis of results

生殖道沙眼衣原体是引起男性附睾炎、尿道炎，女性盆腔炎、宫颈炎等多种疾病的重要病原菌之一，合并感染淋球菌时可加重疾病的发展，严重威胁患者的健康[1]。性传播是生殖道沙眼衣原体的主要传播途径[2]，近年来我国发病人数呈逐年上升的趋势[3]。 由于在受感染的患者中，表现为无症状感染的男性占50%、女性占70%左右，或仅出现轻微的尿路刺激症状[4]，隐蔽性强，很多病例因无典型症状或症状较轻而漏诊[5]，易引起患者之间相互传播，必须尽早采取针对性措施进行干预[6]。因此，实验室快速、准确的检出病原体对临床的诊断和对症治疗都具有十分重要的意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集该院2022年1～6月215例妇科及泌尿外科患者的生殖道分泌物标本，其中男性79例，女性136例，年龄20～58岁。分别进行超高倍显微镜镜检和核酸扩增试验检测沙眼衣原体DNA。

1.2标本采集 严格按照卫生部全国临床检验操作规程操作，采样时，尽量不要接触阴道壁，          不能采集有脓血污染的分泌物。

1.3检测方法

1.3.1超高倍显微镜镜检：直接在洁净的玻片上涂湿片，加盖玻片，用超高倍显微镜放大倍数调制8000倍左右动态观察，若发现柱状上皮细胞内含形态呈圆形空泡状衣原体包涵体，或明显观察到游离的包涵体释放原体，可判断为衣原体阳性。

1.3.2核酸扩增试验：生殖道拭子加入生理盐水充分震荡混匀，离心弃上清液，加提取液混匀，在室温下静置后上取上清液加入PCR扩增体系，同时做阴阳性对照各一管,同标本一起置入PCR 仪中进行扩增。按说明书要求进行结果判读，同时每批次阴、阳性对照和内标曲线的结果需符合相应要求。

1.4统计学方法 采用 SPSS17.0统计软件进行数据处理与统计分析。

2 结果

表1  两种方法检测沙眼衣原体结果比较

表2    男性患者沙眼衣原体检测结果

表3    女性患者沙眼衣原体检测结果

表4    镜检结果与扩增结果符合率

注：两种方法符合率为87.4%，不符合率为12.6%

3 讨论

生殖道沙眼衣原体感染是性传播疾病［7］，感染女性患者后入侵宫颈柱状上皮细胞 [8]，引发不孕不育[9]；感染男性患者可引起附睾炎、尿道炎等炎症。目前生殖道沙眼衣原体发病率呈逐年上升趋势，无症状人群的隐匿感染者越来越多，因此快速、准确的检测出病原体至关重要。

目前实验室检测生殖道沙眼衣原体方法都有各自优缺点：免疫层析法可快速检测沙眼衣原体抗原，但敏感性略差；酶联免疫吸附试验和直接免疫荧光法也存在敏感性不够的缺点，可能会造成漏检；细胞培养法特异性最高，但培养周期过长；核酸扩增试验的敏感性和特异性都非常高，但基层医院不能常规开展。

超高倍显微镜采用多媒体计算机技术，配有大屏幕显示器，具有实时图像捕获、动静态存储、回放、查询、检索、打印等多种功能，能清晰观察到沙眼衣原体的包涵体，具有检测快速、操作简便等优点，非常适合门诊患者诊断沙眼衣原体感染的初筛试验，对疑似生殖道沙眼衣原体感染者进行初筛检测，可动态观察标本中是否含有活体沙眼衣原体,具有操作简便、费用低、检测时间短等优点，为临床诊疗提供一种快速、准确、简便的检测方法。但该方法会受标本采集质量、检验人员水平等因素影响，存在一定的假阴性检测结果。

通过以上实验表明，超高倍显微镜检查活体衣原体和核酸扩增试验检测沙眼衣原体DNA的阳性率分别11.2%和15.3%。215例标本超高倍显微镜镜检阴性191例、核酸扩增试验阴性182例，有9例假阴性结果，分析原因：（1）标本采集不合格，脓血污染或粘稠度太高，影响镜检结果。（2）检验人员相关专业知识欠缺，经验不足，造成漏检。男性患者镜检法和核酸扩增法检测沙眼衣原体阳性率分别10.1%和15.2%、女性患者镜检法和核酸扩增法检测沙眼衣原体阳性率分别为11.8%和15.4%，女性患者阳性率略高于男性患者，这可能与女性生殖道特殊的生理解剖结构有关。超高倍显微镜镜检结果与核酸扩增结果符合率为87.4%，不符合率为12.6%，存在一定的误差，应引起实验室检验人员的足够重视。

临床实验室应建立并严格执行生殖道沙眼衣原体检测标准化操作规程，加强检验人员的相关专业知识培训，提高镜检识别能力，提高生殖道沙眼衣原体检测结果的准确性，减少假阴性结果的发生率，为临床的诊疗提供快速、准确的指导。

参考文献

［1］ 叶健滨，王洪琳，蔡于茂，等．性病相关门诊女性就诊者生殖道沙眼衣原体感染危险因素分析［J］．国际流行病学传染病学杂志，2020，47( 5) : 410-414．

［2］宣彬彬，谭美玉，孙寒晓，等．上海市长宁区人乳头瘤病毒与解脲脲原体、沙眼衣原体、淋病奈瑟菌混合感染情况分析［J］．检验医学，2020，35（9）:859-863.

［3］陈祥生,姜婷婷.我国性传播疾病的流行与防治[J].皮肤科学通报,2021,38(1):1-7.

［4］高东花，朱劲涛，邓秋祝，等.清远地区男性性传播性疾病患者沙眼衣原体与淋球菌感染情况分析［J］．临床合理用药杂志，2022.15（12）:172-174.

［5］郑金仙，徐红，陶蓓，等.144824名备孕女性生殖道沙眼衣原体感染情况分析[J].中国计划生育和妇产科,2020,12(9):47-49.

［6］ 张秋鸿，徐小红，金彩娥．生殖道解脲支原体和沙眼衣原体感染对孕晚期胎膜早破的影响［J］．中国艾滋病性病，2020，26(11) :1217-1220．

［7］ 中国疾病预防控制中心性病控制中心撰写组 . 生殖道沙眼衣原体感染检测指南［J］. 国际流行病学传染病学杂志，2020，47（5）： 381-386.

［8］ 黄锡谊,郭保亮,李小燕.266例生殖道沙眼衣原体与解脲支原体标本结果及其与不孕症的关系[J].热带医学杂志,2022,22(5):673-676.

［9］ 李华,刘朝晖.沙眼衣原体感染与输卵管损伤关系研究进展[J].中国实用妇科与产科杂志,2021,37(4):496-498.

作者简介：刘定山，男，1977.4，江苏扬州，汉，本科，主任技师，微生物方向