检测糖化血红蛋白有什么意义？

检测糖化血红蛋白有什么意义？

崔建业

夏邑县人民医院  检验科

近年来，随着人们生活水平的提高，糖尿病患者的数量明显上升，糖化血红蛋白的数据比较稳定，可以非常客观地反映人体的血糖控制程度，为临床医生调整药物剂量或者治疗方案提供简单且实用的参考。

什么是糖化血红蛋白

糖化血红蛋白是血液中红细胞内的血红蛋白和血糖结合的产物，结合生成的糖化血红蛋白是不可逆的，不会流出细胞外，合成周期是红细胞的平均寿命，大约120天。在人体中，糖化血红蛋白包含HbAlc（与葡萄糖结合）、HbAla(与磷酰葡萄糖结合)、HbAlb(与果糖结合)三种糖成分，在正常生理状态下，血液中的葡萄糖自由扩散，与血红蛋白中的糖基化位点结合，当非酶促蛋白糖基化反应时，糖化血红蛋白也随之生成。糖化血红蛋白在正常人体内存在的时间与红细胞的寿命是相同的，正常情况下，红细胞的寿命大约在120D，因此，糖化血红蛋白水平检测得到的结果，可以看作是患者4个月机体的平均血糖水平，与受检状态及受检时间没有任何关联，对测量结果造成的影响也相对较少。人们在检测血糖水平的时候，糖化血红蛋白含量是重要的检测指标，在检测糖尿病患者中，糖化血红蛋白是主要的诊断指标。

糖化血红蛋白的诊断指标

2010年，HbA1c大于6.5%被ADA纳入糖尿病的诊断标准，在2011年，WHO（世界卫生组织）推荐有条件的地方将HbAlc检测作为糖尿病的辅助治疗手段，糖尿病诊断的临界值为6.5%。种族不同，HbA1c数值也存在着差异，我国的HbAlc的切点跟国外标准存在差异，多项研究表明，我国成年人HbA1c诊断糖尿病的切点在6.3%~6,,5%，6.4%相对较多，因此，6.4%是我国HbA1c诊断糖尿病最佳的切点。至于HbA1c检测，如果条件允许，在刚开始治疗的时候，3个月至少检测一次，如果达到治疗的目标，可以调整为6个月检测一次，这样就可以了解很长一段时间血糖控制的总体情况。使用胰岛素的患者，血糖波动较大，建议每2~3月至少检查一次。

糖化血红蛋白的检测方法

糖化血红蛋白的检测方法：（1）离子交换层析法，离子交换层析法中的HPLC法是HbAlc检测的“金标准”，有专家在研究指出，离子交换层析法的应用原理是处在pH7.0的环境下，HbA1c的末端頡氨酸糖基化之后几乎不携带正电荷，没有非糖基化的HbA携带正电荷，通过上述现象，可以通过离子交换层析法对HbAlc、HbAla、HbAlb、HbF、HbAO进行区分。（2）电泳法，电泳法的主要原理为在电场力作用下，溶质在电泳介质中的移动速度是不同的，通过不同的移动速度把血红蛋白进行分离。毛细管电泳分析技术的抗干扰能力和精密度都是非常好的，被国各大医院广泛应用。（3）酶法，酶法的应用原理主要是通过利用特殊蛋白酶对HbJ进行分解，将果糖及氨基酸从Hb中分离出来，果糖基氨基酸产生H2O2,当受到过氧化物酶的影响时，与特定色原藕连，通过对H2O2颜色变化来明确糖化血红蛋白的含量。此法在测定糖化血红蛋白方面有3个比较大的突破，第一，差生的果糖基氨基酸和血浆中的球蛋白和清蛋白等，对测定的结果不会造成影响；第二果糖基氨基酸氧化酶只有在特定的蛋白酶体系中才会和果糖基氨基酸发生反应；第三，使用过氧化氢测定敏感度，能够减少分解色素原引起的副反应。（4）免疫传感器法，免疫传感器法结合了场效应管传感器和免疫检测。首先把抗体固定在电极表面，随后将电极放入已经处理过的血清中，表面固定的抗体和糖化血红蛋白特异性结合，产生抗体（抗原复合物），最后对电极表面界面均产生影响，使其发生改变，最终对场效应管阈值电压产生影响，当传感器输出的信号与糖化血红蛋白的浓度形成一定比例时，就能得到检测结果。（5）床边检测，在我国，对HbA1c检测时床边检测方法有2种，一种是利用抗体免疫反应原理进行检测；另外一种是快速检测法，主要是利用亲和层析层原理进行检测。以上两种检测的精确度和精密度不够精细，不能在糖尿病诊断中应用，仅在临床检测中使用。（6）质谱分析法，国际临床化学联盟（IFCC）提出了一直“质谱分析”新方法，是通过质谱分析特异性检测HbA1c。具体方法是先用生理盐水清洗红细胞，然后再去除醛亚胺，用水将红细胞溶解；溶血产物经内蛋白酶作用，可产生HbAlc和HbAO的N断6肽；经反相色谱分离，即可用电喷雾电离质谱法进行测定。此法对HbA1c标准化测定有指导作用，但是操作起来比较复杂，费时费力。

糖化血红蛋白的应用意义

利用HbA1c对糖尿病早期患者进行筛查，有利于发现早期糖尿病患者。当检测者空腹和餐后2H血糖正常，但是却有糖尿病症状，可以检测HbAlc，就可以做出明确诊断。比单独检测2次空腹和餐后2H血糖更准确。如果HbA1c>6.5%,（正常值的极限）是可疑对象，可能是早期糖尿病患者，需要提高警惕，持续追踪观察。HbA1c是控制血糖的重要指标，HbAlc不受偶尔的血糖升高或者降低的影响，而且与患者是否打胰岛素，是否空腹和采血时间等因素无关；餐后2H血糖或者空腹只能反应采血瞬间的血糖水平，血糖很容易受进食，药物，糖代谢，及应激等多种因为影响，HbA1c的数据相比较更加客观。因为HbAlc可作为糖尿病长期控制的指标，是临床医生调整药物剂量和治疗方案的重点因素。

HbAlc在心脑血管病的临床应用，通过研究表明，HbA1c可以提高红细胞的黏度，使流动性变小，降低变形能力。HbAlc还可以减慢氧合血红蛋白的离解速度，红细胞双阳亲和力增加，造成组织和细胞缺氧。HbA1c堆积在血管壁，使胶原纤维间过度共价交联，这种交联使胶原纤维的机械强度增加，顺应性降低，血管硬化；如果HbAlc水平升高，反应持续高血糖状态，血管内壁系统受损伤，一方面减少NO、前列环素的释放，增加内皮素释放，让血管的收缩能力变差；另一方面高浓度的葡萄糖具有毒性作用，能使内皮细胞复制减少，修复能力下降，导致内皮细胞被损伤，引起动脉粥样化，从而形成心脑血管疾病，脑梗死、急性心肌梗死、冠心病等疾病就是这样形成的。通过控制GHbAlc的水平能有效地预防心脑血管疾病，因此，HbAlc可以作为心脑血管疾病发病的重要监测指标。

妊娠糖尿病的应用，妊娠期糖尿病是指由于妊娠后母体糖代谢异常而首次发生的糖尿病，是妊娠期常见的并发症之一。如果病情严重或者血糖控制不好，对母亲和孩子伤害都非常大。妊娠期糖尿病是妇产科常见的高危疾病，很容易造成羊水过多，妊娠高血压、畸形胎巨大胎或者死胎，增加难产发生率和母婴围生期死亡率。因此一定要重视妊娠期糖尿病的筛查和诊断。据相关部门调查显示，HbAlc水平的增高，各种母婴并发症发生率也随之增高，其中妊娠高血压症和高胆红素血症增加最为严重。测定HbAlc有利于改善妊娠糖尿病患者母婴预后。因次，HbAlc是筛查妊娠糖尿病和监测母婴并发症的重要指标。

其他方面应用，蛋白质的非酶促使糖化作用可以使DM患者一系列病理生理变化，是DM各种并发症的基础。HbA1c可以使红细胞黏度升高，流动性变小，变形能力降低；HbA1c可以减慢氧合Hb的解离速度，红细胞对氧亲和力增加，红细胞2,3二磷酸甘油酸（2,3-DPG）量下降，是DM组织缺氧的主要因素；同时患有G-6-PD缺乏的DM患者，红细胞平均寿命是正常细胞的1/4，影响了HbAlc形成，所以同时患有G-6-PD缺乏的患者中，如果用HbAlc作为DM监控指标就会产生偏差，应该用FPG监控。总之，及时做好糖化血红蛋白检测工作，能够对糖尿病预后起到一定的预防作用，也能够为医生的临床治疗提供理论依据。