厦门大学平潭研究院1 350400 闽南科技学院 2 362332
摘要:目的:探讨人参细胞粉对小鼠的各项机能的作用。方法:选用饲养KM小鼠,共5组,每组12只,雌雄各半,饲养20天,包括小鼠喂食、清洁以及实验后的尸体处理;通过口腔给予小鼠受试物,分0、7、14、18、21g/kg五个剂量;连续观察14天,观察并记录小鼠的神经行为、运动能力、呼吸、泌尿、皮肤和毛色等指标。结果:24h内完成灌胃,小白鼠中剂量、次高和高剂量组大部分出现回吐,所有小白鼠灌胃后无明显异常或死亡。除了23号和24号有两只腹胀死亡,其余鼠14天内均从神经行为、运动能力、呼吸、泌尿、皮肤和毛色上未见异常。泌尿能力无法直接观测,通过垫料的潮湿侧面反映泌尿无异常。结论:利用人参细胞粉对小鼠展开实验后得知,通过观察动物的反应,能进一步估算出人体用量,从而对其安全性作出估价,为日后临床用药提供参考。
关键词:人参细胞粉;研究
前言:人参在传统中医学中具有扶正固本、生津止渴以及大补元气等效用。其中人参皂苷在现代化药理中兼具着双相免疫调节作用,对实验动物特异性免疫以及非特异性免疫有明显改善,主要是用于免疫系统紊乱疾病的治疗。但在临床中,应用人参细胞粉的用量无法准确估计,需要利用小鼠来开展实验,通过观察小鼠用药后的反应,明确人体用药倍数,从而为临床安全用药奠定基础。本实验将针对人参细胞粉和小鼠用药后各项功能之间关系展开深入研究,详情如下。
1实验原理
最大耐受量是指动物能够耐受的而不引起动物死亡的最高剂量。对于某些低毒的受试物可采用最大给药量法进行药物的急性毒性试验,即最大给药量试验。在合理的最大给药浓度及给药容量的前提下,以允许的最大剂量给予实验动物,观察动物的反应,估计其能达到人用量的多少倍,从而对其安全性作出估价,为临床用药提供参考,也为开展药效学的研究提供科学依据。
2实验目的
测试人参细胞粉在给予KM鼠最大使用浓度和最大灌胃容量时,观察并记录小鼠的神经行为、运动能力、呼吸、泌尿、皮肤和毛色等是否异常或出现死亡。
3材料与仪器
注射器,灌胃针,75%酒精,离心管,离心管架,生理盐水,客户提供的人参细胞粉。
4实验方法
方案:饲养小鼠,共5组,每组12只,雌雄各半,饲养20天,包括小鼠喂食、清洁以及实验后的尸体处理;通过口腔给予小鼠受试物,分0、7、14、18、21g/kg五个剂量;连续观察14天,观察并记录小鼠的神经行为、运动能力、呼吸、泌尿、皮肤和毛色等指标。实验过程:由于人参细胞粉很轻,较粗,配制混悬液需要较多的无菌生理盐水,经客户协商,以可以灌胃的程度配制,最大灌胃容量提升到1mL左右(40ml/kg),灌胃尽量不超过3次。每组灌胃情况如表1和表2所示:
表1每组灌胃详情
组别 | 对照组 | 低剂量组 (g/ml) | 中剂量组 (g/ml) | 次高剂量组 (g/ml) | 高剂量组 (g/ml) |
灌胃液浓度 | 0.9%NaCI | 0.0875 | 0.117 | 0.15 | 0.13125 |
灌胃容量 | 40mL/kg | 40mL/kg | 40mL/kg | 40mL/kg | 40mL/kg |
灌胃次数 | 雌3雄4 | 2 | 3 | 3 | 4 |
间歇时间 | 3h以上 | 3h以上 | 3h以上 | 3h以上 | 3h以上 |
表2 4月20号小鼠体重(g)及一次灌胃量(ml)情况
雌性 | 0 | 7g/kg | 14g/kg | 18g/kg | 21g/kg | |||||
编号 | 体重 (g) | 灌胃量 (mL) | 体重 (g) | 灌胃量 (mL) | 体重 (g) | 灌胃量 (mL) | 体重 (g) | 灌胃量 (mL) | 体重 (g) | 灌胃量 (mL) |
1 | 25.08 | 1.003 | 25.79 | 1.032 | 27.71 | 1.108 | 26.65 | 1.066 | 28.41 | 1.136 |
2 | 26.66 | 1.066 | 26.96 | 1.078 | 26.83 | 1.073 | 27.22 | 1.0888 | 26.73 | 1.069 |
3 | 24.6 | 0.984 | 22.9 | 0.916 | 26.3 | 1.052 | 26.46 | 1.0584 | 22.72 | 0.909 |
4 | 28.44 | 1.138 | 24.59 | 0.984 | 29.71 | 1.188 | 25.99 | 1.0396 | 26.28 | 1.51 |
5 | 23.11 | 0.923 | 27.62 | 1.105 | 27.46 | 1.098 | 25.11 | 1.0044 | 26.19 | 1.048 |
6 | 25.02 | 1.001 | 25.39 | 1.0.16 | 25.43 | 1.017 | 26.86 | 1.0744 | 26.04 | 1.042 |
雌性 | 0 | 7g/kg | 14g/kg | 18g/kg | 21g/kg | |||||
编号 | 体重 (g) | 灌胃量 (mL) | 体重 (g) | 灌胃量 (mL) | 体重 (g) | 灌胃量 (mL) | 体重 (g) | 灌胃量 (mL) | 体重 (g) | 灌胃量 (mL) |
1 | 29.95 | 1.198 | 30.24 | 1.21 | 32.25 | 1.29 | 29.95 | 1.198 | 28.81 | 1.152 |
2 | 27.56 | 1.102 | 30.53 | 1.221 | 30.91 | 1.236 | 27.56 | 1.1024 | 26.73 | 1.069 |
3 | 29.33 | 1.173 | 29.74 | 1.19 | 30.53 | 1.221 | 29.33 | 1.1732 | 28.07 | 1.123 |
4 | 29.67 | 1.187 | 32.95 | 1.318 | 30.22 | 1.209 | 29.67 | 1.1868 | 32.07 | 1.283 |
5 | 27.2 | 1.088 | 31.05 | 1.242 | 29.79 | 1.192 | 29.2 | 1.168 | 30.28 | 1.211 |
6 | 28.56 | 1.142 | 33.17 | 1.327 | 29.97 | 1.199 | 28.56 | 1.1424 | 29.04 | 1.162 |
24h内完成灌胃,小白鼠中剂量、次高和高剂量组大部分出现回吐,所有小白鼠灌胃后无明显异常或死亡。
5实验结果
灌胃后观察14天结果如表3和表4所示:
表3灌胃后观察14天后的结果
4月23日 | 神经行为 | 运动能力 | 呼吸 | 泌尿 | 皮肤 | 行色 | 死亡 | 备注 |
0g/kg | - | - | - | - | - | - | - | |
7g/kg | - | - | - | - | - | - | - | |
14g/kg | - | - | - | - | - | - | - | |
18g/kg | - | - | - | - | - | - | + | 1号雌鼠腹胀 |
21g/kg | - | - | - | - | - | - | - | |
28g/kg | - | - | - | - | - | - | - | |
4月24日 | 神经行为 | 运动能力 | 呼吸 | 泌尿 | 皮肤 | 行色 | 死亡 | 备注 |
0g/kg | - | - | - | - | - | - | - | |
7g/kg | - | - | - | - | - | - | - | |
14g/kg | - | - | - | - | - | - | + | 1号雌鼠腹胀 |
18g/kg | - | - | - | - | - | - | - | |
21g/kg | - | - | - | - | - | - | - | |
28g/kg | - | - | - | - | - | - | - |
表4除去4月23和24号各时间段试验统计
4月20日 | 4月21日 | 4月22日 | 4月25日 | 4月26日 | 4月27日 |
- | - | - | - | - | - |
4月28日 | 4月29日 | 4月30日 | 5月1日 | 5月2日 | 5月3日 |
- | - | - | - | - | - |
备注:-代表正常
除了23号和24号有两只腹胀死亡,其余鼠14天内均从神经行为、运动能力、呼吸、泌尿、皮肤和毛色上未见异常。泌尿能力无法直接观测,通过垫料的潮湿侧面反映泌尿无异常。
结束语:
综上所述,通过利用人参细胞粉对小鼠展开实验后从结果中可以得知,在合理的最大给药浓度及给药容量的前提下,以允许的最大剂量给予实验动物,利用观察动物用药后机体各方面的反应,进一步估计出人用量的倍数,从而对日后临床中使用人参细胞粉的安全性奠定基础,为开展药效学更为深入的研究提供科学依据。
参考文献:
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