艾滋病检验技术现状及应用

艾滋病主要是因为人免疫缺陷病毒感染导致的，造成人体免疫功能缺陷，疾病后期会继发肿瘤、中枢神经系统病变以及多重感染。HIV可以通过血液传播、性传播、母婴传播、静脉吸毒等途径进行传播，艾滋病可以对人体的免疫系统造成严重破坏，从而使患者反复的发生感染性疾病，目前，对于艾滋病来说，均无疫苗预防，无特效药物解决该疾病，只能够根据不同的方案延长患者的生命，提升其生活质量，对HIV的感染程度进行控制，这也是临床中艾滋病的主要研究重点。而想要控制艾滋病的病情进展速度，最重要的是做好及时检验，目前现有的检验方法较多，目前应用的常用方法包括以下几点。

临床中通过对患者的血清中的HIV抗体的检测是主要的一种检查是否存在艾滋病毒感染的一种方法，但是，检测方法的准确度也不尽相同，酶联免疫法是一种传统的艾滋病抗体的检测方法，化学发光免疫分析法是一种新兴的检测方法。

酶联免疫法：抗原或者抗体和固相载体表面结合，使其免疫活性得以维持。抗原以及抗体可以和酶连接和酶标抗原、抗体，其免疫活性、酶活性均得以保留，在测定时，受体标本以及酶标抗原按不同步骤和固相载体表面抗原或抗体发生反应，通过洗涤，分开抗原抗体复合物和其他物质，最后可结合在固相载体上的酶量以及标本中的受检物质的量呈一定比例。然后加入酶反应底物后，底物会被酶催化成有色产物，产物的量和标本中的受检物质的量具有直接联系，故可以观察颜色深浅进行定量分析。

化学发光免疫分析法：该方法的灵敏度以及特异性均较高，光信号持续时间长、检验方法简单、结果稳定性高、误差率低、安全性高、使用周期长，可监测各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶等，属于最新免疫测定技术，目前该技术广泛应用于临床免疫检测中。

HIIV抗体确证实验：①免疫印迹试验:《艾滋病检测技术规范》中,免疫印迹试验是常用的确证HIV的方法,被认为是对其他检测方法效能检验的金标准,免疫印迹试验相较酶联免疫法,针对不同H1V抗原组分检测,故特异度和灵敏度均居较高水平,但相较酶联免疫法,免疫印迹试验的步骤有较高的复杂性,少数会因误判和操作不当,引发假阳性。此外,HIV初筛复检采用此技术,阳性样本有一定的不确定率存在,故判断最终结果,需有经验医师操作。②条带/线性免疫试验可以采用间接法对样品中的特异性抗体进行检测，其原理为：加入待测样品之后，相应的抗体和抗原会出现特异性免疫反应，然后加入抗人IgG，和HIV特异性IgG抗体相结合，加入显色底物以后，受到碱性磷酸酶催化，特异性抗体的结合处会产生肉眼可见的条带，然后按照试剂盒说明书对待测样品的阳、阴性进行评估。

HIV病原学检测方法:HIV感染后,病毒RNA可最先检出,后为 p24抗原,抗体居最后。p24抗原检测多在窗口期及HIV-1抗体不确定期辅助诊断中应用,并可参与病情进展的判断和抗病毒治疗效果的评估,对婴儿是否存在早期母婴传播进行确定等。HIV急性感染期时,p24抗原即可出现,可对病毒复制情况间接反映。在确诊HIV感染后,应评估每位感染者的临床和实验室指标,以对HIV感染阶段确定。目前应用ELISA双抗体夹心法检验,但有较差的灵敏度,仅为备选辅助诊断方案,需随访和再行RNA检测确证。目前的敏感酶免疫测定技术、免疫复合物裂解检测法、线性免疫酶检测等技术,使p24蛋白检出水平极大提高。

核酸检测：核酸检测是HIV目前最为敏感的检测方法，就是明确检查是否有病原体。该技术的优势包括：灵敏度高、特异性强。分析其检测原理，是在聚合酶链反应基础上，测定RNA拷贝数，拷贝数越高，病情进展越迅速。可用于HIV感染筛查、诊断、病情发展评估和抗病毒治疗效果监测。特别是在婴儿感染早期诊断、急性期诊断和作为补充试验用于筛查试验有反应但抗体确证试验不确定或阴性样本的判定等方面有重要参考意义。HIV核酸检测可以定量检测体内HIV病毒载量。抗病毒药物可以降低HIV病毒的载量，从而减轻对CD4+T淋巴细胞的攻击，使CD4+T淋巴细胞恢复至正常。通过HIV病毒载量检测，可评估抗病毒治疗效果和病程进展。

HIV自我检测：HIV自我检测分为血液检测以及唾液检测，前者的准确率高于后者，故建议通过血液检测，具体方法为：可以采集指尖静脉血，滴到艾滋病检测试纸上。如果试纸上显示红色线是两道杠，高度怀疑艾滋病。①HIV自我检测能够增加HIV检测覆盖面：HIV自我检测试剂能够通过线下药店以及线上药店购买，以便于不愿意到医疗卫生机构进行咨询检测的人群自行购买，其可以居家进行自我检测，得知自己是否被HIV感染。这种检测方法既包括以往从未接受检测的人群，也可以应用在检测过的人群中，帮助未检测的人群克服歧视，进而及时发现更多HIV感染者。HIV自我检测和现场检测比较，对于群交、商业性性行为等人群更倾向使用自检试剂。根据调查统计表明：十分之一的调查对象以往从未做过HIV检测，由此可见，通过互联网提供自检服务可以为现场检测提供补充，并容易被疑似人群所接受。②使检测更加便捷：自检试剂的自检操作相对简单，可以在半小时内获取检测结果

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