蒙药新Ⅱ号联合酒石酸美托洛尔通过内质网应激保护扩张型心肌病大鼠心功能的机制分析

蒙药新Ⅱ号联合酒石酸美托洛尔通过内质网应激保护扩张型心肌病大鼠心功能的机制分析

乌日罕1 ,刘萨仁2

1.内蒙古民族大学蒙医药学院 内蒙古 通辽 028000 2.内蒙古民族大学附属医院 内蒙古 通辽 028000

摘要 目的：探讨分析蒙药新Ⅱ号联合酒石酸美托洛尔通过内质网应激保护扩张型心肌病大鼠心功能的机制。方法：选取20只雄性SD大鼠作为研究对象，并将其分为对比组和试验组（蒙药新Ⅱ+酒石酸美托洛尔）（每静脉注射注射阿霉素2mg/kg，4周后口服蒙药欣Ⅱ30mg/kg，每天1次，共4周）共2组（n=10）。8周后用高频心脏超声和血流动力学检测各组大鼠心脏结构和心功能指标，检测后处死大鼠，取出心脏进行HE染色、VG染色和电镜观察，检测心肌细胞凋亡TUNEL法检测心肌细胞内质网应激，Real-timePCR法检测心肌细胞GRP78、GRP94、促凋亡因子CHOP和caspase-3mRNA的表达水平。结果：同酒石酸美托洛尔组进行比较后，试验组大鼠心脏结构、心功能和血流动力学指标都获得了明显的好转（P＜0.05）。试验组大鼠心肌病理积分有效减轻 （P＜0.01）。蒙药新 II 号组大鼠心肌细胞内质网应激伴侣蛋白GRP78、GRP94 及促凋亡因子chop、caspase-3 mRNA 表达减少，细胞凋亡显著下降（P＜0.01）。结论：蒙药新Ⅱ号联合酒石酸美托洛尔能够通过缓解内质网应激及其介导的心肌细胞凋亡，减轻心肌病理改变，逆转心室结构重塑保护心功能。

关键词：蒙药新II号；酒石酸美托洛尔；扩张型心肌病；内质网应激

引言：

  扩张型心肌病（dilated cardiomyopathy，DCM）因十分容易发生充血性心理衰竭，又被称之为充血性心肌病，扩张型心肌病是最常见的心肌病，预后差，死亡率低，已引起研究者的广泛关注。该病在中国的患病率约为13-84/100000。近年来，它有上升的趋势。原因有很多，其中大约一半是未知的。5年生存率约为50%，10年生存率约为25%。扩张型心肌病（DCM）是导致单心室或双心室扩张的疾病之一，并在心肌收缩时产生心肌肥厚和血泵功能障碍，从而发展为CHF。近年来，中西医结合治疗扩张型心肌病已被越来越多的临床医生所认可，但蒙药治疗方面的报道尚缺乏。蒙药新 II号是由白云香、野牦牛心、人工牛黄等17种蒙药制成的蒙药传统处方。对“气虚”引起的胸痹、心悸等症状有良好的强心作用[1]。临床上主要适用于治疗扩张型心肌病和冠心病，对逆转扩张型心肌病和冠心病的心室重构有显著作用，但其机制尚不十分清楚，其价值有待进一步探讨。为此，本文将重点探讨蒙药新Ⅱ号联合酒石酸美托洛尔通过内质网应激保护扩张型心肌病大鼠心功能的机制，希望能为临床上 DCM 的治疗供应更多理论依据。详细实验数据如下：

1、材料与方法

1.1实验材料

  选取20只雄性SD大鼠作为研究对象，并将其分为对比组和试验组，每组各10只。大鼠身体活动良好，毛色光泽，生长条件22℃，常规饮食，日照时间14h/d，实验室通风良好，湿度53%。在无干扰条件下进行实验、清洁水平（II级）和适应性喂养中，大鼠自由繁殖和生长。

1.2实验方法

  对对比组SD大鼠行0.9%NaCl溶液灌胃，试验组（蒙药新II号联合酒石酸美托洛尔）行腹腔注射 ADR2mg/kg，1次/周，4周后将蒙药新 II 号变为粉状，溶在 0.9%NaCl 溶液中，蒙药新II号30mg/kg，1次/日灌胃，共4周。随后对大鼠的一般情况进行观察。

1.3检测指标

  八周后，经胸壁于每组大鼠行心脏超声检查。采纳 GE Vivid E9 彩色超声仪经胸壁高频超声 ML6-15 探头，图形深约设置在 3.5cm，频率为 13MHz。10%水合氯醛0.2g/kg 腹腔注射麻醉大鼠，于二维影像指导下用 M 超检测胸骨旁左心室长轴切面左室腱索水平左室收缩末期内径( left ventricular internal diameter at end-systole， LVIDs)和左室舒张末期内径(left ventricular internal diastolic diameter， LVIDd)。所有指标均在3个延续完好的心动周期中丈量并选均匀值，且根据 Teichholtz公式推算 ；LVEF={（100-Y） ×0.15}+Y； Y={（LVIDd²-LVIDs²）}×100/LVIDd²； FS=（LVIDd-LVIDs）×100/LVIDd，计算出左室射血分数（Left ventricular ejection fraction，EF）及左室短轴缩短率（fractional shortening，FS）。

1.4统计学方法

  采用SPSS21.0统计软件包分析研究，计量资料采用（）表示，两组间比较采用t检验，计数资料采用相对数表示，两组间比较采用x2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1对两组大鼠高频心脏超声测定结果进行对比

  经对俩组大鼠对比，试验组的LVEDd 和 LVEDs明显上升（P＜0.05），FS及EF降低（P＜0.05），说明试验组大鼠心室增大，收缩功能降低符合 DCM 心脏超声变化。详见表一。

表一为两组大鼠高频心脏超声测定结果对比（，n=10）

3、讨论

根据世卫组织的分析，全球每年约有1700万人死于心血管疾病，占世界疾病死亡人数的30%。扩张型心肌病属于原发性心肌病的一类。它是一种以进行性心功能不全为特征的心肌病变。根据病因可分为获得性、遗传性和混合性。其主要特点是室壁变薄，心脏增大，常伴有严重心律失常，常发展为晚期难治性心力衰竭。扩张型心肌病常因心肌成分纤维化而呈局灶性分布，心肌工作细胞减少，导致心肌收缩力减弱。在心室等容收缩早期，心输出量下降，左心室内压迅速减弱， 射血速度也减弱，心腔内余血增加，使舒张期压上升，逐步发展为心力衰竭[2]。

  因DCM的病因和发病机制尚不明确，难以对该疾病进行一级预防，甚至无有效地治疗方法，导致病死率一直居高，对人类的健康和患者的身心带来了严重影响。目前，只能针对于心力衰竭进行治疗。蒙药新II号是国家医学大师苏荣扎布数十年临床经验证明的治疗心血管疾病的良方[3]。其主要成分包括白云香、野牦牛心、广枣、沉香、阿魏、肉豆蔻、藏红花、麝香、丁香、人工牛黄、白檀香、紫硇砂和木香等合成。对某些心血管疾病有明显疗效，安全、绿色、价廉，具有较大的应用和推广价值。但蒙药新Ⅱ号治疗扩张型心肌病心力衰竭尚无报道。蒙医遵循整体观的原则。其扩张型心肌病属蒙医鸡乳昌虚证范畴。心脏是合一的总体位，也是合一异常操作的方式。宇宙之心位于心脏。它扩散到全身。它有身体的支柱，心脏的收缩，血液的循环，以及将精华输送到身体的各个部位[4]。

  在本文研究中，经对俩组大鼠对比，试验组的LVEDd 和 LVEDs明显上升（P＜0.05），FS及EF降低（P＜0.05），说明试验组大鼠心室增大，收缩功能降低符合 DCM 心脏超声变化。

结语：

  通过综上，蒙药新II号联合酒石酸美托洛尔通过缓解心肌细胞内质网应激, 抑制内质网应激凋亡信号通路，减轻细胞凋亡及心肌纤维化，逆转心室重塑，进而改善扩张型心肌病大鼠心功能。

参考文献：

[1]谢甜甜,曾秋悦.扩张型心肌病中医药研究进展[J].徐州医科大学学报,2019,39(07):547-550.

[2]王亮.分析慢性心力衰竭应用酒石酸美托洛尔联合卡托普利治疗的疗效及不良反应[J].当代医学,2019,25(11):20-23.

[3]陈少青,王伊林,曹宪玉,张青山,柴花,陶谢鑫,赵明.蒙药新Ⅱ号对扩张型心肌病大鼠心功能、心肌细胞内质网应激及凋亡的作用[J].中国应用生理学杂志,2016,32(05):419-423+483.

[4]梁庆,李自成,邝素华,黄伟青,黄敏坚,林俊敏,梁子敬.美托洛尔抑制NE诱导的大鼠心肌细胞凋亡及缝隙连接蛋白43的磷酸化[J].中国病理生理杂志,2013,29(11):2024-2029.