精子DNA完整性与精液参数及辅助生殖技术临床结局的关系

精子 DNA完整性与精液参数及辅助生殖技术临床结局的关系

张霖 王琰 朱大林 李佳 王莉 冯帆（通讯作者）

甘肃省妇幼保健院 生殖医学中心，甘肃 兰州 73005 0

【摘要】目的：分析辅助生殖技术（ART）临床结局及精液参数与精子DNA完整性的关系。方法：以不孕夫妇104对为例，助孕手段均采取ART术，时间为2019.05-2020.01之间，按照精子DNA碎片指数（DFI）分为2组，即A组（高DFI，40例）和B组（低DFI，64例）。按照不同体外受精方式分为卵泡浆内单精子注射（ICSI）组和体外受精-胚胎移植组（IVF-ET）组。对比分析2组妊娠率、种植率、优胚率、受精率、裂卵率、精液参数等指标。结果：2组IVF亚型对比优胚率、受精率等数据后显示B组更高，组间达到统计差异要求（P＜0.05）；但2组其余亚型见对比优胚率、裂卵率、受精率等指标的数据差异较小（P＞0.05）。结论：精液形态、活动力、密度等与精子DNA完整性之间呈负相关，且后者对优胚率和受精率影响显著，但与妊娠结局无关，但对于DFI在30%及以上者，以ICSI为优先受精方式。

【关键词】精子DNA完整性；辅助生殖技术；精液参数；临床结局；关系

【Abstract】Objective: To analyze the clinical outcome of assisted reproductive technology (ART) and semen parameters and sperm DNA integrity. Methods: Taking 104 infertility couples as examples, ART was performed between 2019.05-2020.01, including sperm DNA fragment index (DFI), namely A (high DFI,40) and B (low DFI,64). Single sperm injection (ICSI) and in vitro fertilization-embryo transplantation (IVF-ET) groups were pided into different in vitro fertilization methods. Two groups of pregnancy rate, planting rate, superior embryo rate, fertilization rate, rupture rate and semen parameters were analyzed. Results: After two groups of IVF embryo and fertilization rate, higher B group and higher statistical difference requirements (P <0.05), but smaller indexes of superior embryo rate, fracture rate and rate of fertilization (P> 0.05). Conclusion: semen morphology, activity, density and sperm DNA integrity and the latter had significant influence on superior embryo rate and fertilization rate, but not pregnancy outcome, but ICSI for DFI at 30% and above.

[Key words] DNA integrity of sperm; assisted reproductive technology; semen parameters; clinical outcome; relationship

临床在对精子功能进行评定的过程中，目前采取的新型指标即为精子DNA 完整性，且在检查男性不育症应用十分广泛^[1-2]。有临床研究显示，除了男性生育能力可通过精子DNA完整性予以评价之外，该指标还与辅助生殖技术（ART）的临床结局存在一定关联^[3-4]。因此本文以不孕夫妇104对为例，助孕手段均采取辅助生殖技术，时间为2019.05-2020.01之间，即探讨了ART临床结局及精液参数与精子DNA完整性的关系，现做下述阐述：

1. 资料与方法

1.1资料

以不孕夫妇104对为例，助孕手段均采取辅助生殖技术，时间为2019.05-2020.01之间，按照精子DNA碎片指数（DFI）分为2组，即A组（高DFI，40例）和B组（低DFI，64例）。按照不同体外受精方式分为卵泡浆内单精子注射（ICSI）组和体外受精-胚胎移植组（IVF-ET）组。对比2组年龄等资料数据显示无较大差异，可研究对比，且P值＞0.05。

入选及排除条件：

1.2方法

按照《WHO人类精液检查与处理手册标准》对所有对象分析精液情况，对其相关参数予以记录，包括精子畸形率、浓度、活动力等。采用SCA法检测精子DNA完整性，此种方法可重复性和敏感度均更高，在酸作用下，精子DNA受损后可变为单链，染色时采用吖啶橙处理，此种染色剂结合单链DNA，则荧光橙红色或者黄色，若结合双链DNA后，则荧光呈绿色，以此可对DNA正常或变形与否进行区分，之后对DNA碎片指数（DFI）采用流式细胞仪进行分析。

1.3评价指标

对比分析2组妊娠率、种植率、优胚率、受精率、裂卵率、精液参数等指标。

1.4分析数据

文中数据由统计人员处理分析并得出结论，工具为SPSS22.0软件，计量、计数等结果资料用 、t检验差异大小，分别用“ ”和（%）表示结果，当P＜0.05时，统计显示差异明显较大。

2. 结果

表1中所示，2组IVF亚型对比优胚率、受精率等数据后显示B组更高，组间达到统计差异要求（P＜0.05）；但2组其余亚型见对比优胚率、裂卵率、受精率等指标的数据差异较小（P＞0.05）。

表1 临床辅助生殖技术结局与精子DNA完整性的关系[例（%）]

注：与A组IVF亚型相比，^*P＜0.05。

3. 讨论

近几年临床上上不孕不育患病人数明显增多，且成为了人类面临的重要问题。此类患者中，与男性因素相关者占比约为50%^[5]。在判断男性不孕不育时，临床目前以分析精液常规为主，但因检验人员、外界环境、时间等影响，分析结果通常存在一些差异^[6]。通常自然受孕率与精子完整性之间关系十分显著，当其DNA发生断裂，且在30%及以上，则宫腔内人工受精和机体自然等受孕几乎无法成功，DNA受损越严重，则胚胎质量和体外受精妊娠率越低^[7]。对精子DNA完整性加强研究和分析尤为重要。一般精子活力与精子DFI之间呈明显负相关，即精子的活力和存活率随着DFI增高而显著降低，当DFI在30%以上，则精子正常形态、不同活力级别的精子、精子存活率显著降低^[8-9]。本文结果显示，2组IVF亚型对比优胚率、受精率等数据后显示B组更高，组间达到统计差异要求（P＜0.05）。这表明精液形态、活动力、密度等与精子DNBA完整性相关。但2组其余亚型见对比优胚率、裂卵率、受精率等指标的数据差异较小（P＞0.05）。在受精时，其影响因素主要为精子活动力，在外界长时间暴露，则IVF患者精子极易受到氧化应激损伤，进一步导致DNA损伤加重。而精子活动度、形态、密度等在高DFI情况下也可受到影响。实际上IVF受精是精子被卵子选择的过程中。组蛋白在精子成熟时可想鱼精蛋白进一步转化，且由于精子形态学改变，其染色质会出现异常缩合，从而导致精子正常形态和精子率受到影响^[10]。

综上，精液形态、活动力、密度等与精子DNA完整性之间呈负相关，且后者对优胚率和受精率影响显著，但与妊娠结局无关，但对于DFI在30%及以上者，以ICSI为优先受精方式。

【参考文献】

[1] 宏苹苹. 精子DNA完整性与精液参数及辅助生殖技术临床结局的关系[J]. 世界最新医学信息文摘,2017,(0a1).

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