免疫荧光法在呼吸道病毒快速检验中的临床应用

免疫荧光法在呼吸道病毒快速检验中的临床应用

刘莹

黑龙江省农垦九三管理局中心医院 161441

　　【摘 要】目的：对免疫荧光法在呼吸道病毒快速检验过程中的应用效果进行分析。方法：对来我院呼吸科进行就诊的呼吸道感染患者进行分析，筛选符合要求的患者155例，使用病毒荧光检测试剂盒快速检验鼻咽分泌物标本。结果：在患者当中出现了病毒感染阳性人数为142例，其中，出现副流感病毒I型、II型、III型的病例达到了4.93%、8.45%、5.63%，而流感病毒A、流感病毒B所占的比例分别达到了22.54%和15.49%，呼吸道合胞病毒的人所占的比例达到了14.79%，腺病毒所占的比例达到了28.17%。结论：通过免疫荧光法进行呼吸道病毒快速检验，具有较好的效果，可以推广使用。

　　【关键词】免疫荧光法;呼吸道病毒;快速检验

　[Abstract] Objective: to analyze the application effect of immunofluorescence in rapid detection of respiratory virus. Methods: to analyze the respiratory tract infection patients who come to our respiratory department, select 155 patients who meet the requirements, and use the virus fluorescence detection kit to quickly test the nasopharyngeal secretion samples. Results: the number of patients with positive virus infection was 142, among which 4.93%, 8.45% and 5.63% had parainfluenza I, II and III, while 22.54% and 15.49% had influenza A and B, 14.79% had respiratory syncytial virus, and 28.17% had adenovirus. Conclusion: the rapid detection of respiratory virus by immunofluorescence has a good effect and can be widely used.

[Key words] immunofluorescence; respiratory virus; rapid test

　在实践的过程中，对呼吸道病毒进行检测的方法多种多样，比如说病毒分离培养、电镜检测病毒颗粒及免疫荧光法等。在实际操作的过程中，免疫荧光法主要使用患者的免疫荧光抗体或者血清等，在操作的过程中选材非常方便，而且能够有效的对病人进行鉴别，消耗的人力、物力相对较少，因此获得了广泛的使用。本文具体对收治的155例患者为基础，分析免疫荧光法在呼吸道病毒快速检验过程中的具体操作以及应用，以供参考。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料

　　对来我院呼吸科进行就诊的呼吸道感染患者进行分析，了解他们的资料，筛选符合要求的的患者，选择符合要求的155例患者，使用病毒荧光检测试剂盒快速检验鼻咽分泌物标本。

　　1.2 方法

　　1.2.1 检测试剂 主要使用7项病毒荧光检测试剂盒，主要有单克隆抗体试剂和荧光标志抗体试剂盒等，在检测的过程中能够对流感病毒A、流感病毒B，呼吸道合胞病毒、腺病毒等病毒进行有效的检测，另外还能对副流感病毒I型、副流感病毒II型、副流感病毒III型进行检测。

　　1.2.2 检测方法 在收集和处理标本的过程中，首先收集耳、鼻、喉位置的分泌物，主要使用负压吸引器进行收集，放置在无菌生理盐水当中。与此同时在收集的过程中一定要反复的捶打分泌物，将其放置到离心管当中，在离心管当中进行离心操作，离心操作时速度控制在每分钟500转，另外需要在此转速下控制9分钟时间，进一步去除上清液，通过磷酸盐缓冲液进行进一步的操作，重复离心的步骤，去除上层清液，直到上层清液不再粘稠。另外在离心工作完成之后，需要将沉淀放置在磷酸盐缓冲液当中，逐步产生细胞悬液，在载玻片观察孔当中进行病原体的放置，完成风干和固定工作。

　　1.2.3 荧光染色 将20微升的剂量的荧光抗体向样孔细胞当中滴入，并且在保湿盒当中进行进一步的培育，控制时间在25分鐘左右，另外使用磷酸盐缓冲剂多次洗涤播种细胞，接着使用蒸馏水进行洗涤，在完成风干之后，在封片上进行封固液滴加，盖上盖玻片，通过荧光显微计进行后续的观察。

　　1.3 诊断原理和判断依据

　　在实验测试的过程中，如果已经被荧光标志的抗体和对应抗原之间进行结合，则能够在反应后出现复合物，通过荧光显微镜能够进一步观察到出现的绿色荧光。所以，如果产生了绿色的荧光，则可以认为检测值为阳性。

　　2 结果

　　在患者当中出现了病毒感染阳性人数为142例，其中，出现副流感病毒I型、II型、III型的病例达到了4.93%、8.45%、5.63%，而流感病毒A、流感病毒B所占的比例分别达到了22.54%和15.49%，呼吸道合胞病毒的人所占的比例达到了14.79%，腺病毒所占的比例达到了28.17%。

　　3 讨论

　　如果要通过常规方式对微生物进行检查，主要使用的是多层面综合指标，一些常规检验虽然可以通过生物反应来对部分非病原微生物进行排除，但是这种非病原微生物形态方面和病原微生物比较接近，很容易在实践的过程中出现混淆，所以一定要注意加强快速分离，利用试验的时候添加别的判定指标来进行后续的判断工作。

　　在临床上，免疫荧光检测是非常常见的，逐步开始向机械化、自动化的方面发展，可以通过脉冲激光光源微型电脑等结合的方式做出进一步的检测，由于荧光抗体不会导致其生长繁殖受到限制和影响。在一段时间的孵育之后，除了需要进行判定其特性之外，还需要选用荧光菌球来进行后续的鉴定。然而，在实践的过程中发现免疫荧光定量分析往往较为薄弱，如果只是通过目测，对其特异性荧光进行评估往往会出现偏差，主要使用荧光显微镜来自动扫描免疫荧光标本，速度控制在每秒400步，距离控制在0.25步。另外荧光信息可以通过光电倍增管来进一步放大，这样可以将相关图像送入到图像识别器当中，判断测定其参数，了解微粒的图形、周长、荧光长度等。在研究的过程中通过免疫荧光法来进一步检测上呼吸道感染患者的分泌物，并且提取相关细胞进行相应的细胞标本和抗体的匹配抗原抗体反应，来对后续的病毒种类进行辨别。在操作的过程中结果非常快速，而且准确性较高，一般情况下这种方式只需要两个小时就能通过试剂盒或者荧光显微镜等快速鉴别病毒种类，在操作过程中相对较为简单，而且价格低廉。

　　总而言之，加快免疫荧光技术在微生物的快速检验具有非常重要的意义，和传统形式相比，该技术相对较为成熟，而且应用价值较高，值得进行推广和使用。

　　参考文献

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