探讨微小 RNA-365和靶向 E74样受体 4在宫颈癌细胞的增殖及其临床意义

探讨微小 RNA-365和靶向 E74样受体 4在宫颈癌细胞的增殖及其临床意义

努尔满古力 ·肉孜

新疆维吾尔自治区人民医院 新疆 乌鲁木齐 830001

【摘要】目的 研究分析微小RNA-365和靶向E74样受体4在宫颈癌细胞的增殖以及临床意义。方法 以2018年1月~2019年12月我收录的总计103例进行宫颈活检并进行手术治疗的患者为对象，对患者治疗后的正常宫颈组织、宫颈上皮瘤变组织、宫颈鳞癌组织以及宫颈癌细胞中的miR-365的表达情况进行检测，并对ELF4的表达情况以及变化进行检测，分析miR-365与ELF4在宫颈癌细胞中的临床关系。结果 miR-365与ELF4 mRNA在正常宫颈组织、宫颈上皮瘤变I级、宫颈上皮瘤变II级和III级、宫颈鳞癌中的表达分析发现，miR 365与ELF4 mRNA在正常宫颈组织组与宫颈上皮瘤变I级中表达无相关性，而在宫颈上皮瘤变II级、III级与宫颈鳞癌中表达呈负相关，同时研究表明肿瘤大小、肿瘤分级等与miR-365以及ELF4 mRNA的表达水平有关。结论 通过激活miR-365或者抑制ELF4的方式，可作为治疗宫颈癌的有效手段，可作为该病进一步治疗研发的临床基础。

【关键词】微小RNA-365；靶向E74样受体；宫颈癌细胞；临床意义

宫颈癌是常见的一种妇科恶性肿瘤，患者在临床上通常会出现阴道出血、尿频尿急、下肢肿痛以及便秘等症状，晚期会出现贫血、恶病质等症状，对患者的生命健康造成了危害^[1]。本次研究通过我收录的103例进行宫颈活检并进行手术治疗的患者为对象，分析miR-365与ELF4在宫颈癌细胞中的临床关系如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

收录我2018年1月~2019年12月总计103例进行宫颈活检并进行手术治疗的患者为对象，经手术治疗后正常宫颈的患者23例，宫颈上皮瘤变的患者总共55例，其中宫颈上皮瘤变I级的患者21例，宫颈上皮瘤变II级和III级的患者24例，宫颈鳞癌的患者25例。

1.2纳入标准

纳入标准：出现病变患者皆符合宫颈上皮瘤变以及宫颈鳞癌的相关诊断标准^[2]；患者和家属皆愿意积极参与本次研究；所有患者均无其它严重的身体疾病。

排除标准：排除严重器官疾病的患者；排除不积极参与治疗的患者；排除患有精神方面疾病的患者；排除患有其它恶性肿瘤的患者；排除哺乳期或妊娠期的患者。

1.3 方法

实施PCR检测miR-365的表达情况，将患者的宫颈组织以及宫颈癌细胞分别用液氮进行保存，用Trizol试剂将其总RNA提取，对miRNA进行分析，检测miR-365 的表达水平，对每组细胞组织重复进行3次测试；采用双荧光素酶报告基因对miR-365 与ELF4的调节效果进行分析；实施细胞裂解法提取细胞总蛋白，用BCA法对总蛋白含量进行检测，记录基因相对蛋白的表达水平，对每组细胞组织重复进行3次测试；对宫颈组织中的ELF4蛋白表达进行免疫组织化学检测，并通过图像对其所占百分比情况进行分；对宫颈组织细胞进行细胞培养，取对数生长期细胞进行测验；最后对正常宫颈组织细胞、宫颈上皮瘤变组织细胞以及宫颈鳞癌组织细胞的增殖情况实施CCK8法检测，对每组细胞组织重复进行3次测试，将其光密度值的平均数值作为试验结果^[3]。

1.4 统计学方法

此次研究将SPSS 18.0统计软件用来计算，计数以率（%）显示并用x²检验，计量资料以（ ±s）显示并用t检验，统计学意义用P＜0.05表示。

2 结果

相比正常的宫颈组织，miR-365在人宫颈癌组织中的表达水平有所下降；miR-365在C33A细胞、HeLa细胞以及SiHa细胞中的表达均明显下降，差距有意义（P<0.05）。转录因子ELF4是miR-365的直接靶点，miR-365可能直接靶向调节ELF4基因的表达，由此可见，miR 365显著靶向抑制ELF4基因的表达；相比正常的宫颈上皮细胞，ELF4在C33A细胞、HeLa细胞以及SiHa细胞中的蛋白表达水平均有所增加； ELF4为核蛋白发挥转录功能时免疫组织化学染色可见细胞核，与正常宫颈组相比，ELF4在宫颈上皮瘤变II级、III级以及宫颈鳞癌中的表达相比正常宫颈明显增高，差距有意义（P<0.05）。miR-365与ELF4 mRNA在正常宫颈组织、宫颈上皮瘤变I级、宫颈上皮瘤变II级和III级、宫颈鳞癌中的表达分析发现，miR 365与ELF4 mRNA在正常宫颈组织组与宫颈上皮瘤变I级中表达无相关性，而在宫颈上皮瘤变II级、III级与宫颈鳞癌中表达呈负相关，同时研究表明肿瘤大小、肿瘤分级等与miR-365以及ELF4 mRNA的表达水平有关。

3 讨论

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，是人体最常见的癌瘤之一，不仅在女性生殖器官癌瘤中占首位，同时也是是女性各种恶性肿瘤中最多见的癌瘤

^[4]。宫颈癌的发病因素较多，性行为过早、性伴侣过多、多孕多产、吸烟、营养不良以及不注意个人卫生等都有可能导致发病，其中高危型HPV持续感染是该病的最主要危险因素^[5]。宫颈癌患者在临床上通常会出现阴道出血、尿频尿急、下肢肿痛以及便秘等症状，晚期会出现贫血、恶病质等症状，对患者的生命健康造成了危害。根据相关研究显示，miR-365在宫颈癌中表达下调能够降低对ELF4在高等级的宫颈病变及宫颈鳞癌中表达的抑制作用，从而起到抑制肿瘤增殖的作用，可作为对宫颈癌临床治疗上的研究重点^[6]。随着人们物质生活的提升，对于两性之间的逐渐开放与生活方面的不检点，再加上环境污染的恶化，导致宫颈癌的发病率逐年上升，严重危害了患者的生活和健康，因此研究对宫颈癌的影响因素对疾病的治疗有重要意义。

通过本次研究结果得出，相比正常的宫颈组织，miR-365在人宫颈癌组织中的表达水平有所下降；miR-365在C33A细胞、HeLa细胞以及SiHa细胞中的表达均明显下降，差距有意义（P<0.05）。转录因子ELF4是miR-365的直接靶点，miR-365可能直接靶向调节ELF4基因的表达，由此可见，miR 365显著靶向抑制ELF4基因的表达；相比正常的宫颈上皮细胞，ELF4在C33A细胞、HeLa细胞以及SiHa细胞中的蛋白表达水平均有所增加； ELF4为核蛋白发挥转录功能时免疫组织化学染色可见细胞核，与正常宫颈组相比，ELF4在宫颈上皮瘤变II级、III级以及宫颈鳞癌中的表达相比正常宫颈明显增高，差距有意义（P<0.05）。miR-365与ELF4 mRNA在正常宫颈组织、宫颈上皮瘤变I级、宫颈上皮瘤变II级和III级、宫颈鳞癌中的表达分析发现，miR 365与ELF4 mRNA在正常宫颈组织组与宫颈上皮瘤变I级中表达无相关性，而在宫颈上皮瘤变II级、III级与宫颈鳞癌中表达呈负相关，同时研究表明肿瘤大小、肿瘤分级等与miR-365以及ELF4 mRNA的表达水平有关。

综上所述，通过激活miR-365或者抑制ELF4的方式，可作为治疗宫颈癌的有效手段，具有临床研究的价值。

参考文献

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[4]郭颖,马冬,贾世峰, 等.微小RNA-365和靶向E74样受体4在宫颈癌细胞的增殖及其临床意义[J].中国医学科学院学报,2019,41(2):220-227. 

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[6]卢柳媚,周倩珺,李子琳, 等.miR-137通过靶向Wnt5a调控宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2019,26(7):762-767.