机采血小板与手工浓缩血小板活性的比较

机采血小板与手工浓缩血小板活性的比较

张广波1曹笠1王晓伟1李立1王见敏2

张广波1曹笠1王晓伟1李立1王见敏2

1辽宁省大连市第三人民医院输血科辽宁大连116033；

2辽宁省大连市血液中心供血室辽宁大连116001

【中图分类号】R331.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）41-0100-02

【摘要】目的比较机采血小板和手工浓缩血小板活性。方法测定机采血小板和手工浓缩血小板的聚集反应性和体外激活程度。结果手工浓缩血小板与机采血小板的聚集反应性和激活程度无显著性差异,P>0.05。结论两种采集血小板的方法均可以应用于临床治疗和研究中。

【关键词】机采血小板手工浓缩血小板

目前，临床上所用的血小板主要通过机器单采术和手工法从全血中分离制备而成。手工法采集血小板的优点是简单易行,缺点是血小板(PLT)数量少,而白细胞(WBC)含量较多。机采血小板具有保存效果好、保存时间长、质量高、混合白细胞少等优点，具有客观的实用价值，所以受到患者、医务工作者以及血液工作者的欢迎。

作为一成人剂量，单采血小板和手工浓缩血小板具有很相似的临床疗效[1-3]。然而，最近一项临床实验研究表明，不同的血小板制备方法可能影响其输注后活性[4]。保存期为5d的单采血小板已在临床普及应用。为了避免全血中血小板的浪费，白膜法手工浓缩血小板已在欧洲大部分国家推广，但在我国还刚刚起步，相关标准也还未出台。未见有关白膜法手工浓缩血小板和单采血小板制备后体外聚集反应和激活程度差别的系统报道。在此，我们对手工浓缩血小板和机采血小板的聚集反应性和体外激活程度进行了研究分析。

1材料与方法

1.1样本来源400mL全血，大连市血液中心60名志愿献血者(身体健康，男女各半，平均年龄35岁)提供。

1.2试剂(1)血小板聚集反应诱导剂ADP（sigma公司生产）。(2)荧光标记抗血小板表面糖蛋白单克隆抗体（BD抗体，BD公司生产）：CD62p-PE，CD61-Percp，PAC-1-FITC。

1.3主要仪器(1)兰波APACT2血小板聚集仪(美生实业有限公司生产)；(2)FACS流式细胞仪(美国BD公司生产)。

1.4方法将血液样本平均分为手工组和机采组。手工组：抽取30名无偿献血者当天捐献的400ml全血，血液采集6h内进行成分分离。将HEMO-TRANSFERplus全血成分分离机分离制备的白细胞层22℃条件下隔夜放置16h后汇集成袋。30袋白细胞层经轻离心制备手工采集血小板。机采组：随机抽取用Trima血液单采机分离制备的B型当天机采血小板30袋，隔夜放置16h。

按照仪器厂家提供的方法测定最大聚集率和血小板CD62p和PAC-1的表达率。

1.5统计学处理两组血小板的实验参数采用配对t检验，应用chiss统计软件分析。

2结果

2.1两组血小板对ADP聚集率的比较，见表1。两组比较无显著性差异(P>0.05)。

表1血小板对ADP聚集率（%）的比较

注：P>0.05。

2.2两组血小板CD62p和PAC-1表达率的比较，见表2。两组血小板CD62p和PAC-1表达率均无显著性差异(P>0.05)。

表2血小板CD62p和PAC-1表达率（%）的比较

注：P>0.05。

3讨论

目前，临床对两种血小板制剂的选择主要依赖于血小板产品本身的质量[5]。血小板分离、制备、储存后的活性可部分从血小板的体外实验得到解释，具体表现在血小板形态、激活状态、代谢能力和生理反应，总称为血小板储存损伤。国外文献报道，由于机采血小板与一次性塑料血小板分离管道剪切循环，机采血小板膜表面CD62p的表达率略高于手工法采集血小板。本文结果显示，手工法分离制备的混合血小板体外激活程度较低，与Trimaaccel血小板单采机分离制备的血小板体外激活程度无显著性差别。由于白细胞层汇集在一起，使其具有稳定的压积(Hct)，离心时血小板经受的离心力更均匀，离心时血小板以红细胞和白细胞形成的“生物垫子”做铺垫，而不是被压积在一个“非生物的塑料袋表面上”，从而减少了血小板的制备损伤。也减少了以CD62p为代表的活性标志物在血小板膜表面的表达。目前在欧洲大部分国家，患者输注两种血小板制剂的比例相近。

血小板聚集是血小板参与止血和血栓形成的重要环节，是血小板的主要功能。血小板聚集试验果显示，手工法分离制备的血小板同机采血小板聚集功能均保持良好，这可能与白细胞层隔夜放置后制备的手工血小板激活损伤程度较低有关。新鲜采集的全血中血小板活性较高，对体外刺激的敏感性较强，在一系列分离、制备、储存白细胞层和浓缩血小板的操作过程中易发生体外激活损伤，新鲜自膜层较易形成由血小板和白细胞构成的微聚体，这些微聚体中的白细胞和血小板相互黏附聚集，随白膜层储存时间延长(血小板隔夜放置16h)，血小板对外界刺激的敏感性低，使本已形成微聚体的血小板充分解聚，又重新发挥血小板的聚集功能。与机采血小板相比，手工血小板的体外激活和聚集反应性并未因白细胞层过夜放置而产生显著性改变。

通过对手工法和机采法得到的两组血小板进行聚集率和激活程度的统计学分析，本文认为：

（1）手工浓缩血小板与机采血小板的聚集反应性和激活程度无显著性差异,P>0.05；

（2）两种采集血小板的方法均可以应用于临床治疗和研究中。

参考文献

[1]粱晓林，王桂君，王仲泉．机采和手工分离血小板临床疗效探讨[J].北京医学，2007，29：369—371．

[2]HealJM，BlumbergN．0ptimizingplatelettransfusiontherapy[J].BloodBev，2004，18：149-165.

[3]Akk6kCA,BnnchkLauritzsenGF，eta1．Clinicaleffectofbuffy—coatapheresisplateletconcentratesinpatientswithseverethrombocytopeniaafterintensivechemotherapy[J].VoxSang,2007,93：42—48．

[4]HeddleNM，BlajchmanMA,MeyelRM，eta1．ArandomizedControlledtrialcomparingthefrequencyofacutereactionstoplas-ma-removedplateletsandprestorageWBC-reducedplatelets[J].Tramfusion,2002．42：556—566．

[5]VasconcelesE，FigueiredoAC，Seghatchian.Qualityofplateletconcentratesde,rivedbyplateletrichplasma,buffycoatandApheresis[J].TransfusApherSci，2003，29：13-16．