清肠合剂对小肠缺血再灌注大鼠肠壁细胞凋亡的影响

清肠合剂对小肠缺血再灌注大鼠肠壁细胞凋亡的影响

张云杰朱勇

（山东中医药大学附属医院山东济南250012）

【摘要】目的:研究清肠合剂对小肠缺血再灌注大鼠小肠细胞凋亡的影响。方法:将Wistar大鼠分为4组:①正常对照组(NOR.);②模型对照组(CON);③抗生素组(ANT);④清肠合剂组(QCHJ)，分别观察术后24h,48h，72h回肠部位，具体部位包括上皮细胞，它所对应的是24h；固有层，它所对应的观察时间是48h，淋巴组织在正常情况下的凋落死亡的指数，它所对应的观察时间是72h。结果:模型对照组术后上皮细胞、薄层结体组织细胞，及淋巴组织在正常情况下的凋落死亡指数，均显著高于正常对照组，清肠合剂所组成的类别与上面所说的各类指标，同模型组来进行对比，其结果明显有所改变与完善。结论:清肠合剂这类组合，可以改善因血少而形成的二次注入，近而导致各组造模后产生凋落与死亡，保护肠屏障。

【关键词】清肠合剂；小肠；缺血再灌注；凋亡

【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2017）24-0373-02

肠道缺血再灌注损伤在全身炎症反应综合征、多脏器功能衰竭的发生中起着重要作用。清肠合剂是我院经验方，临床证实能清除体内毒性物质，本实验通过观察清肠合剂对于缺血再灌注大鼠小肠细胞凋亡的影响，探讨其肠屏障保护机制。

1.实验材料

1.1实验动物

Wistar大鼠（SPF级）120只，雌雄不限，体重250～300g。

1.2实验药品

0.9%生理盐水；先锋VI(250mg/粒)；清肠合剂（每瓶250ml，每ml含生药1g）。

2.实验方法

2.1模型制备

大鼠于模型制备前24小时禁食不禁水，称重后给予腹腔注射10%水合氯醛(30mg/100g体重)麻醉后，腹部脱毛后切口进腹，暴露肠系膜上动脉(superiormesentericartery，SMA)，各组分别用无创夹夹闭其根部45分钟，松夹即为再灌注。待肠系膜上动脉搏动恢复后记录再灌注时间。

2.2分组

随机分为4组：①正常对照组(NOR)；②模型对照组(CON)；③抗生素组(ANT)；④清肠合剂组(QCHJ)。每组30只动物，分3个时间点，每组每个时间点动物为10只。

2.3给药方法

各治疗组造模前30分钟灌胃给药，术后每日同时间点灌胃给药2次/d。按照人的等效剂量经口给予。先锋Ⅺ(13.5mg/100g)、清肠合剂（1ml/100g），分别灌胃，每天2次，正常对照组和模型对照组给等量生理盐水。

2.4标本采集

分别在造模后24小时、48小时和72小时取腹主动脉血5ml，存放待测。

3.结果

3.1回肠粘膜上皮细胞凋亡指数

各组AI造模后均较正常对照组明显升高，造模后逐渐达到高峰，随时间推移逐渐下降；抗生素组造模后24、48、72小时AI较模型对照组显著下降；清肠合剂组造模后24、48、72小时AI较模型对照组、抗生素组显著下降。详见表1。

4.讨论

本研究发现，与对照组相比，模型组上皮细胞、固有层、淋巴滤泡AI均明显升高，说明缺血再灌注可以加剧凋亡的发生，使得小肠机械屏障和免疫屏障均遭受破坏。造模后凋亡的发生由高峰随时间推移逐渐下降，呈现显著正相关，提示在小肠缺血再灌注后早期，肠粘膜细胞的过度凋亡可能是导致肠屏障功能障碍及肠源性内毒素血症的原因之一。

本研究表明，清肠合剂可以有效的降低缺血再灌注后上皮细胞、固有层及淋巴滤泡的凋亡指数，降低血浆内毒素水平，在缺血再灌注早期，清肠合剂可能通过减少肠粘膜上皮细胞和淋巴细胞的凋亡。

【参考文献】

[1]颜光涛，郝秀华，辛宏等，磷脂酶A2阻断剂对缺血再灌注损伤诱导细胞凋亡和坏死的影响[J].中国危重病急救医学，1999；11(12):709.

[2]赵佐庆，朱文侠，张志培等，犬小肠缺血再灌注后NO和SOD的改变及免疫细胞凋亡基因的表达[J].第四军医大学学报，2003；24(18):1700.