SysmexXE-5000血细胞分析仪检测血小板计数正常而其他相关参数缺失的原因探讨及解决办法

SysmexXE-5000血细胞分析仪检测血小板计数正常而其他相关参数缺失的原因探讨及解决办法

黄丽丽

黄丽丽

（华东疗养院检验科214065）

【摘要】目的探讨SysmexXE-5000血细胞分析仪检测血小板计数正常而其他血小板相关参数缺失的原因及解决办法。方法将200例SysmexXE-5000血细胞分析仪血小板计数正常而其他血小板相关参数缺失的标本进行涂片，瑞氏染色后显微镜观察红细胞和血小板的异常形态。结果在200例SysmexXE-5000血细胞分析仪血小板计数正常而其他血小板相关参数缺失的标本中，镜检发现有不同程度的异常形态红细胞或（和）异常形态血小板增多。结论当遇到SysmexXE-5000血细胞分析仪血小板相关参数缺失时，应将标本涂片，瑞氏染色后进行显微镜复检，并对镜检结果作相应备注描述。

【关键词】SysmexXE-5000血细胞分析仪；血小板相关参数缺失；红细胞，血小板异常形态；镜检；血小板计数

【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）34-0014-02

Sysmex系列全自动血细胞分析仪计数血小板的方法有两种，即鞘流电阻抗法（PLT-I）和激光流式荧光法（PLT-O）。国内曾有XS-1000i、XE-2100系列血细胞分析仪血小板相关参数缺失的报告[1，2]。我室SysmexXE-5000血细胞分析仪一般采用电阻抗法计数血小板。在日常工作中经常发现有部分血小板计数正常但血小板相关参数包括平均血小板体积（MPV），血小板比容(PCT)，血小板体积分布宽度(PDW)，大型血小板比率(P-LCR)显示为“----”且红细胞、血小板直方图异常（如图1、2）。报警信息提示包括：红细胞与血小板直方图分布异常，小红细胞，红细胞大小不等，红细胞碎片，大血小板，血小板聚集，血小板增多等。这给临床疾病的诊疗带来诸多不便。随机抽取2014年2月至2014年8月来我院体检者，PLT正常[参考范围（100-300）x1012]，无MPV、PCT、PDW、P-LCR参数的标本200例进行推片，瑞氏染色，显微镜检查。现将检测结果报告如下：

1.材料与方法

1.1标本来源取自2014年2月至2014年8月来我院健康体检者的静脉血。严格按照有关标准操作程序文件和《全国临床检验操作规程》[3]进行真空采血管采集静脉血，标本采集后颠倒混匀10次，肉眼可见标本无凝块。

1.2仪器与试剂SysmexXE-5000血细胞分析仪，Olympus-CX51显微镜。XE-5000血细胞分析仪原装配套试剂和指控品，EDTA-K3抗凝管由德国Greinerbio-one公司提供，瑞氏染液由珠海BASO公司提供。

1.3方法对XE-5000血细胞分析仪检测血小板正常，但相关参数MPV、PCT、PDW、P-LCR缺失的标本立即按照《全国临床检验操作规程》推片，瑞氏染色，经严格培训有实践经验的检验人员进行细胞学检查，用油镜观察血膜体尾交界处的细胞形态[4]。阳性以红细胞均匀分布的情况下每个油镜视野均可见到一个以上的异常形态血小板或异常形态红细胞为标准。根据RDW、MCV结果分为4组。A组MCV<80fl，RDW正常；B组MCV<80fl，RDW增高；C组MCV>80fl，RDW正常；D组MCV>80fl，RDW增高（MCV和RDW为XE-5000血细胞分析仪的红细胞检测参数）。

1.4统计学方法所有数据用SPSS20.0统计软件进行统计

2.结果

注：—表示无数据

血小板相关参数MPV、PCT、PDW、P-LCR缺失的A组占8.5%，B组占75.5%，C组占12.0%，D组占4.0%。在这4组数据中，红细胞形态异常占15.5%（31/200），血小板异常占29.0%（58/200），受红细胞和血小板双重异常形态影响的标本占55.5%（111/200）。红细胞形态异常的标本中42.5%（85/200）来自贫血患者。显微镜所见红细胞异常形态主要是：裂红细胞（红细胞碎片）、红细胞形态不整；血小板形态异常主要为：（巨）大血小板、畸形血小板（如图3）。

3.讨论

SysmexXE-5000血细胞分析仪采用鞘流电阻抗法，在同一通道中计数红细胞和血小板。其判断红细胞和血小板的一个基本原则是利用两者细胞之间明显的体积差异来进行区分即界标法（通常是2～6，12，12～30fl）。由此可见，当仪器计数血小板受到各种因素影响时，MPV、PCT、PDW、P-LCR的计算就会受到相应的影响，从而在仪器上出现“----”。

从表1可以看出单纯血小板形态异常对PLT相关参数的影响占29.0%（58/200），红细胞形态异常对PLT相关参数的影响占15.5%（31/200），而55.5%（111/200）的标本MPV、PCT、PDW、P-LCR的检测受红细胞形态异常和血小板形态异常的双重影响。红细胞形态异常的标本中42.5%（85/200）来自贫血患者。红细胞参数MCV<80fl，RDW>0.15时称为不均一性小红细胞，一般出现在缺铁性贫血，慢性失血性贫血，铁粒幼细胞贫血，HbH病等。RDW正常常见于轻型?-珠蛋白生成障碍性贫血。这些增生性贫血易出现裂红细胞（红细胞碎片），极易干扰血小板检测[5-6]。在脾亢、SLE、ITP及一些白血病缓解期会有大型血小板增多，畸形血小板等[4]。国内李晓玲研究认为缺血性脑血管病患者在脑梗发作前血小板形态就发生了变化，血小板体积显著增高[7]。这些都会影响仪器对血小板相关参数的检测与计算。异常形态红细胞、异常形态血小板、细胞碎片以及相关疾病治疗用药等均会引起血小板计数误差及相关参数缺失，在血小板计数尚在正常范围内时尤其容易被忽略。

Sysmex建议小红细胞和细胞碎片增多引起血小板检测误差可用手工计算法，或用含有RET通道的仪器和试剂，使用DNA/RNA核酸荧光染色技术，进行CBC+RET计得PLT-O。针对我室SysmexXE-5000血细胞分析仪出现血小板计数正常而血小板相关参数缺失的情况，笔者认为可以根据检测数据、异常图形或阳性报警展开分析，判断是否进行复检，采用RET通道和试剂，使用DNA/RNA核酸荧光染色技术，利用血小板和红细胞荧光强度大小的差异而将两类细胞分开计数。此种方法当出现红细胞碎片、小红细胞和大血小板时可以有效的避开其造成的影响，从而得出准确的结果。目前国际血液学标准委员会（ICSH）推荐的血小板计数参考方法为流式细胞仪法间接计数血小板：EDTA抗凝全血加特异性荧光标记单抗（CD41和CD61）染色血小板，被染色血小板在流式细胞仪上根据荧光强度和散射光，得出血小板和红细胞比率，通过准确计数红细胞，就可算得准确的血小板值。计算至少50000个血小板，精度可达2%。刘成玉等[4]认为血液分析仪检测结果手工涂片复查的真阳性标准为：红细胞形态异常，2+/中等量或更多；血小板形态异常（巨大血小板），2+/中等量或更多；血小板凝块，偶见或时而可见。2005年国际实验室血液学学会（ISLH）提出了血细胞分析仪检测结果显微镜复查的41条建议性标准，其中的第27条红细胞碎片阳性报警，第30条血小板聚集报警和第31条除血小板凝块外的PLT和MPV报警复检均要求涂片镜检，镜检复合确认后方可发出检验结果。必要时复核的具体情况应该在检验报告单上备注说明。

参考文献

[1]许业栋等.XS-1000i全自动血液分析仪血小板相关参数缺失的原因分析和解决方法[J].检验医学与临床，2012，9（22）：2830-2833.

[2]陈玉兰.10例伴白细胞、血小板减少的缺铁性贫血血小板参数缺失的原因分析[J].中国伤残医学，2014，22（9）:175-176.

[3]叶应妩.全国临床检验操作规程[M].南京：东南大学出版社，2006:121-143.

[4]刘成玉.临床检验基础[M].北京：人民卫生出版社，2012:27，69-70，110-112，123-124.

[5]邹汉良等.XS-800i血细胞分析仪对地中海贫血患者血小板参数检测的影响分析[J].国际检验医学杂志，2009，30（7）：639-640.

[6]钟青等.部分血小板参数缺失时小红细胞/裂红细胞对XS-1000i血细胞分析仪血小板计数的影响[J].实验与检验医学，2014，32（3）：264-266.

[7]李晓玲.缺血性脑血管病血小板形态变化的临床观察[J].疑难病杂志，2007，6（8）：460-462.