精子DNA损伤：独立的精子质量评价指标

精子DNA损伤：独立的精子质量评价指标

何涛苟涛

（甘肃省张掖市甘州区妇幼保健院甘肃张掖734000）

【摘要】目的：探讨精子DNA损伤与精液常规检查指标的关系。方法：回顾分析我院收治的120例男性不育患者的临床资料，并根据精子DNA损伤程度分为两组。结果：DNA损伤率＜25%组患者的前向运动精子、精子活动率、精子正常形态率等指标均显著优于DNA损伤率≥25%组，组间差异显著（P＜0.05）。结论：精子DNA损伤或可成为独立精子质量评价的重要指标，并有助于改善辅助生殖治疗结局。

【关键词】不育；男性；精子；DNA损伤

【中图分类号】R698.2【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2018）06-0103-01

大量研究证实，精子DNA损伤会严重干扰体外受精中精子的受精能力和胚胎发育潜能，从而降低妊娠率和增加意外流产率，因此部分学者认为精子DNA损伤有助于评价精子质量，有助于改善辅助生殖治疗的结局[1]。本研究旨在分析精子DNA损伤在男性不育症中的诊断价值，现报告如下。

1.资料和方法

1.1基本资料

随机选择笔者所在医院收治的120例患者作为研究对象，采用精子染色质扩散法（SCD法）检测男性患者DNA损伤率，并根据损伤程度分为两组，分别为DNA损伤率＜25%组和DNA损伤率≥25%组。DNA损伤率＜25%组中55例；患者的年龄在21～44岁，平均年龄为（32.8±2.3）岁。DNA损伤率≥25%组中65例；患者的年龄在21～44岁，平均年龄为（32.2±2.7）岁。两组患者的资料比较无显著差异（P＞0.05）。试验类型为回顾性分析试验，试验时间为2015年9月至2017年9月。

1.2排除标准

腮腺炎病史者；隐睾症或无精子症者；精索静脉曲张者；性功能障碍者；睾丸及输精管异常者；不能积极配合资料收集者；合并重大疾病者。

1.3方法

1.3.1精液采集参考WTO制定的精液采集标准进行精液采集，首先男方需禁欲2～8天，手淫法进行取精，将收集的精液置于37℃恒温水浴箱内液化，随后对患者的精子进行计数及动态、静态等参数测定。

1.3.2精子DNA损伤检测（1）首先取精液进行充分稀释，稀释后浓度约为5～10×106/mL，取60uL精子稀释液加入到已融化的易熔胶管中，进行充分混匀，37℃条件下进行孵育，待用。（2）DNA变性处理：取30uL精子凝胶混合液包被于预冷的载玻片上，并将其放置于2～8℃的环境下使其充分凝固，随后移去盖玻片。滴入反应液A，室温反应7min左右，将载玻片加入反应液B中充分浸泡25min，随后用清水反复冲洗载玻片1～3次。（3）DNA染色：采用不同浓度梯度的乙醇溶液对样本进行脱水处理，干燥后采用瑞氏染色液覆盖，随后加入瑞氏缓冲液，充分混匀后用清水冲洗1～3次，随后干燥备用。（4）DNA损伤统计：采用SCD法检测男性患者DNA损伤率，根据光晕的大小判断精子DNA损伤程度。

1.4统计学处理

采用SPSS18.0软件进行统计分析，计量资料使用（x-±s）表示，采用t检验，使用χ2检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2.结果

DNA损伤率＜25%组患者的前向运动精子、精子活动率、精子正常形态率等指标均显著优于DNA损伤率≥25%组，组间差异显著（P＜0.05），如表所示。

3.讨论

近年来，受多种因素影响国内不孕不育发病率呈逐年升高趋势，其中部分不育症与精液质量下降有关[2]。精液质量是评价男性生殖能力的重要指标，但在全面评价精子的受精能力方面具有一定的局限性。精子DNA损伤机制相对复杂，目前现有的临床研究认为精子DNA损伤主要受以下几方面影响：精子染色质包装异常；精子生成过程中细胞凋亡；精子运输过程中氧化自由基影响。精子质量直接关系到男性的生殖功能，而DNA损伤会严重降低精子质量[3]。

本研究发现，DNA损伤率＜25%组患者的前向运动精子、精子活动率、精子正常形态率等指标均显著优于DNA损伤率≥25%组，组间差异显著（P＜0.05），表明精子DNA损伤程度与精子活动率、精子正常形态成明显的负相关，提示精子DNA损伤可能会降低男性患者的正常生殖功能，临床上可通过采用精子DNA损伤小的精液精子和睾丸精子来改善生殖结局。

综上所述，精子DNA损伤可能成为独立的精子质量评价指标，对于男性不育病人实施精子DNA损伤检测，可帮助筛选出DNA损伤较小的精子，改善辅助生殖的治疗结局，具有极高的临床推广价值。

【参考文献】

[1]庄锡伟,黎志全.精子DNA损伤与顶体酶活性及精液常规参数的相关性分析[J].现代医药卫生,2016,32(1):14-15.

[2]包华琼,孙岚,伊宏亮,等.精子DNA损伤与男性精液常规质量参数的关系[J].中国男科学杂志,2016,30(2):55-56.

[3]张欢,郑屹,郑九嘉,等.精子核蛋白组型转换对精子DNA损伤程度和精液参数的影响[J].中国男科学杂志,2015,29(6):24-29.