双花解毒口服液药效学研究

双花解毒口服液药效学研究

黄群莲唐灿张轲

黄群莲1唐灿2张轲2（1泸州医学院附属医院药剂科四川泸州646000；

2泸州医学院药学院四川泸州646000）

【摘要】目的：研究双花解毒口服液解热抗炎药理作用；方法：采用耳缘静脉注射啤酒酵母诱导家兔发热模型、二甲苯所致小鼠耳廓肿胀、小鼠腹腔注射0.6%冰醋酸所致毛细血管通透性增加以及10%蛋清生理盐水所致大鼠足趾肿胀等炎症模型来观察双花解毒口服液解热抗炎药理作用；结果：双花解毒口服液小剂量1.7ml/kg组能有效抑制啤酒酵母所致家兔体温升高（P<0.01）；双花解毒口服液中剂量0.2ml/20g组能显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀（P<0.01），双花解毒口服液大剂量0.4ml/20g组能显著抑制0.6%冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高（P<0.01），双花解毒口服液大剂量4ml/200g组能有效抑制10%蛋清生理盐水所致大鼠足趾肿胀（P<0.05）。结论：双花解毒口服液具有显著的解热、抗炎作用，为临床治疗外感风热所致咽喉肿痛提供了较为充分的药理学依据。

【关键词】双花解毒口服液；解热；抗炎ResearchesOnPharmacologyOfDouble-flower-detoxificationOralLiquid

HuangQunlian1TangCan2ZhangKe2

【Abstract】Objective:TostudyonPharmacologyofDouble-flower-detoxificationoralliquid;Methods:Beeryeastinducedfevermodelbyrabbits'earintravenousinjection，xylenecausedmiceauricletumefactionmodel,aceticacidinducedincreaseincapillarypermeabilityandinfluenceofratscausedbytheeggwhiteswelling;Results:Smalldose1.7ml/kggroupofDouble-flower-detoxificationoralliquidcaneffectivelyrestrainrabbitstemperaturerisewhichiscausedbybeeryeastcause(P<0.01),smalldose2ml/20ggroupcansignificantlyinhibitearedemainmiceinducedbyxylene(P<0.01),largedose0.4ml/20ggroupcaneffectivelyrestrainmicecapillarypermeabilityoftheabdominalincreased(P<0.01),largedose4ml/200ggroupcaneffectivelyrestraineggwhiteinducedfootedemainrat(P<0.05);Conclusion:Double-flower-detoxificationoralliquidtakesanimportantroleinantipyreticandanti-inflammatory,whichprovidesfullPharmacologyfoundationinclinicdiseasescausedbywindhotthroatsore.

【Keywords】Doubleflowersdetoxificationmixture；Antipyretic；Anti-inflammatory.

【中图分类号】R276.1【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2011）07-0467-03

双花解毒口服液是泸州医学院附属医院根据清代医家吴鞠通所著《温病条辨》银翘散基础上加减而成的院内制剂，主要由金银花、黄芩、连翘、麦冬、板蓝根等五味中药组成，具有清热解毒、利咽止咳之功效，主要用于外感风热所致咽喉肿痛、口干咳嗽等症。发热和炎症是临床上常见的症状，方中金银花、连翘同为君药，金银花轻宣疏散，连翘轻清透邪，共奏辛凉解表、清热解毒之功，此制剂应用于临床两年来，经临床观察统计，总有效率达92%以上，尤其对各类感染性疾病、病毒性疾病疗效显著，症见发热、咽痛、口干、咳嗽等证。本文采用家兔发热模型、二甲苯致小鼠耳廓肿胀、0.6%冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高模型及蛋清致大鼠足肿胀模型，对双花解毒口服液的解热和抗炎药理作用进行研究，为其在临床上安全有效地应用提供药理学依据［1］。

1材料与仪器

1.1实验材料

1.1.1实验动物:健康家兔30只，体重2.6～3.6kg，雌雄各半；昆明种小鼠100只，18-22g,♂；SD大鼠20只，150-200g，♂，由泸州医学院实验动物中心提供。动物使用许可证:［SYXK（川）2008-065］。

1.1.2实验药品与试剂:双花解毒口服液由泸州医学院附属医院提供（内含金银花、黄芩、板蓝根、麦冬、连翘）,生产批号090921，抗病毒颗粒由四川光大制药有限公司生产，生产批号0912243112。家兔给药剂量分别为灌胃为6.6，3.3，1.7ml·kg-1，阳性对照抗病毒组为5g·kg-1。小鼠给药剂量分别为灌胃为0.4，0.2，0.1ml/20g，阳性对照抗病毒组为0.5g/20g；大鼠给药剂量分别为灌胃为4，2，1ml/200g，阳性对照抗病毒组为5g/200g。啤酒酵母由青岛啤酒泸州分厂提供；10%蛋清生理盐水由泸州医学院药学院中药实验室提供；二甲苯（分析纯，南京化学试剂厂）。

1.2实验仪器mc-3体温计（欧姆龙大连有限公司），FA2004N电子天平（上海天平仪器厂），海尔BCD-176DA冰箱，家兔灌胃器,大小鼠灌胃器，打孔器，足体积测量仪（自制）。

1.3统计学处理:所有数据均以(x±s)表示，使用SPSSl1.0数据统计（one-wayANOVA）,组间比较采用LSD检验。以P<0.05为差异有显著性。

2实验方法

2.1对啤酒酵母诱导家兔发热模型的影响取健康家兔30只，测定体温2次，以均值作为正常体温。随机分为6组，每组5只，实验组每天分别以6.6，3.3，1.7ml·kg-1灌胃；阳性抗病毒颗粒对照组每天分别以5g.kg-1灌胃，阴性生理盐水对照组和模型组不给药，5天后，除生理盐水组外其它各组家兔均耳缘静脉注射啤酒酵母1ml·kg-1，立刻测量一次温度，然后给药灌胃。于灌胃后1，2，3，4，5，6，7，8，9小时各测量体温一次，以正常体温为基数，计算各时间点体温变化，作t检验［1］。

2.2对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀影响:小鼠50只，随机分为5组，每组10只。实验组每天分别以0.4，0.2，0.1ml/20g灌胃，阳性对照抗病毒颗粒组每天分别以0.5g/20g灌胃，5天后，各组右耳两侧均匀涂以二甲苯0.1ml，1h后脱颈椎处死，用D0.5cm打孔器在相同位置打下左右耳片称重，计算肿胀度，作t检验。肿胀度(mg)=右耳耳片重量（mg）—左耳耳片重量(mg)。

2.3对0.6%冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加影响:小鼠50只，随机分为5组，每组10只。实验组每天分别以0.4，0.2，0.1ml/20g灌胃，阳性对照抗病毒颗粒组每天分别以0.5g/20g灌胃，5天后，最后一次给药后1h，尾静脉注射1%的依文思蓝生理盐水溶液0.1ml/10g，并于小鼠腹腔立即注射6‰的醋酸溶液0.1ml/10g，20min后处死小鼠，用适量的生理盐水多次冲洗腹腔，收集冲洗液于离心管中，再用生理盐水调至10ml，1000r/min离心5min，取上清液于590nm液长处测定吸光度，作t检验［2］。

2.4对蛋清所致大鼠足趾肿胀的影响:大鼠20只，随机分为4组，每组5只。以标记笔在右后足踝关节处做一标记，用排水法测量容积2次，以均值为正常值。实验组每天分别以4，2,1ml/200g灌胃，阳性抗病毒颗粒对照组分别以5g/kg-1灌胃，5天后，各组大鼠均右后足皮下注射10%蛋清生理盐水0.1ml，注射后1，2，3，4，5h各测一次右后足容积，计算浮肿率，作t检验。足肿浮肿率（%）=(致炎后足跖容积(ml)-致炎前足跖容积(ml))/致炎前足跖容积(ml)×100%。

3结果

3.1对啤酒酵母诱导家兔发热模型的影响:双花解毒口服液小剂量组对啤酒酵母所致家兔体温升高有显著效果，结果见表一。

从表一实验组小剂量组和阳性对照抗病毒组可以看出注射啤酒酵母灌胃后1小时有明显升温过程，而后开始持续降温直至正常温度，再与生理盐水组、模型组比较可以发现双花解毒口服液小剂量解热作用明显。我们选取注射啤酒酵母后1小时到4小时之间的数据进行比较，表明双花解毒口服液小剂量对啤酒酵母致热家兔有明显的降温作用，尤其对啤酒酵母使家兔致热1～4h之内解热效果更好。

3.2对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀影响双花解毒口服液剂量组有明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的作用,结果见表二。

从表二实验组和阳性对照抗病毒颗粒组肿胀度均小于生理盐水组可见双花解毒口服液对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用，而以双花解毒口服液中剂量效果最好。

3.3对0.6%冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加影响双花解毒口服液大剂量组有明显抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的增高的作用。结果见表三。

从表三实验组和阳性对照组抗病毒颗粒组吸光度均小于生理盐水组吸光度可见双花解毒口服液能有效地抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的增高，而以双花大剂量组效果最好。

3.4对蛋清所致大鼠足趾肿胀的影响实验组双花大剂量组有抑制蛋清所致大鼠足趾肿胀作用，结果见表四。

从表四实验组双花大剂量组与生理盐水组比较可以看到双花大剂量组大鼠足趾肿胀率在第5h的时候最小，说明双花解毒口服液大剂量组能很好的抑制大鼠足趾肿胀。

4讨论

4.1双花解毒口服液是泸州医学院附属医院根据清代医家吴鞠通所著《温病条辨》的银翘散基础上加减而成的院内制剂，方中金银花、连翘同为君药，金银花轻宣疏散，连翘轻清透邪，共奏辛凉解表、清热解毒之功［2］,此制剂应用于临床两年来，经临床初步观察统计，总有效率达92%以上，尤其对各类感染性疾病、病毒性疾病疗效显著，症见发热、咽痛、口干、咳嗽等证。据文献资料报道，金银花具有明显抗炎、解热作用，其水蒸馏提取液对炎症早期的毛细血管通透性增高及渗出性水肿有明显的抑制作用［3］,与能促进炎性屏障形成的连翘合用，具有较强的抗炎、抗变态反应及提高机体免疫力；配黄芩为臣药，抑制炎性的急性期病变和炎性后期结缔组织生成，作用持续可达6个小时以上［4］，用适宜剂量的黄芩茎叶总黄酮腹腔注射和灌胃给药对实验动物的感染性发热和非感染性发热皆有一定抑制作用，大多数强度高于以临床剂量折算实验剂量阿司匹林、安痛定注射液和柴胡注射液［5］；板蓝根具有增强小鼠免疫功能作用，实验证明，板蓝根提取液能有效地提高小鼠脾指数，对小鼠T.B细胞增值反应有明显增强作用，而且在增强小鼠T细胞增值能力方面比胸腺肽注射液作用更明显［6］。为了阐明其作用的物质基础和作用机制，揭示中药药理与功效主治之间的必然关系，因而有必要对该制剂的有效性、安全性、质量可控性作初步药理研究，并通过本文为临床研究提供质量更稳定、可控、高效低毒的安全中药制剂。

4.2炎症局部组织血管内的液体和细胞成分通过血管壁进入组织间质、体腔、粘膜表面和体表的过程称为渗出。所渗出的液体和细胞总称为渗出物或渗出性。渗出性病变是炎症的重要标志，渗出的成分在局部具有重要的防御作用。急性炎症反应的特征是血管变化和渗出性改变，有三个相互关联的过程：①血流动力学的改变(炎性充血)。②血管壁通透性增高(炎性渗出)。③白细胞游出和聚集(炎性浸润)［7］。而采用醋酸注射小鼠腹腔就是制造炎症反应，让小鼠的腹腔毛细血管的通透性增高，构造一个小鼠腹腔毛细血管通透性增高的炎症模型，然后通过测定实验组和对照组依文思蓝染色剂的吸光度大小来表明双花解毒口服液的抗炎效果，吸光度越小说明小鼠腹腔毛细血管通透性增高得到了抑制，而实验组双花大剂量组与对照组组比较，吸光度最小从而说明双花解毒口服液具有显著的抗炎效果。在用生理盐水冲洗小鼠腹部的时候要特别小心，不能把小鼠身上的血一同洗下，否则会影响依文思蓝吸光度的测定，导致实验结果不准确［8］。

5结论

结果表明双花解毒口服液对由啤酒酵母引起的家兔发热具有显著的解热作用；对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用，对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高有显著的抑制作用，对蛋清所致大鼠足趾肿胀有明显的抑制作用，表明双花解毒口服液有着显著的解热抗炎作用，为临床用药提供参考，也为开展药效学的研究提供科学依据。

参考文献

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