RP-ＨＰＬＣ法测定盐酸胺碘酮注射液的含量

RP-ＨＰＬＣ法测定盐酸胺碘酮注射液的含量

李犁牛慧云武爱民

李犁牛慧云武爱民（包头医学院第三附属医院内蒙古包头014030）

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）19-0013-02

【摘要】目的考察高效液相色谱法测定盐酸胺碘酮注射液含量的方法。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，2％三乙胺(磷酸调节pH=4.0)一乙醇(30：70V/V)为流动相，检测波长242nm，流速1.0mL·min-1，检测灵敏度为0.02AUFS,柱温为室温结果在5.5ug·mL-1～88ug·mL-1范围内，盐酸胺碘酮浓度与峰面积线性关系良好。结论该方法操作简便、重现性好、灵敏度高、专属性强，可用于盐酸胺碘酮注射液的含量测定。

【关键词】盐酸胺碘酮反相高效液相色谱法含量测定

盐酸胺碘酮又名乙胺碘呋酮，是一个广泛用于治疗及预防室性及室上性心律失常的第Ⅲ类抗心律失常药物［1］。《中国药典》2005年版测定盐酸胺碘酮注射液含量使用双相滴定法[2]，查阅近几年文献资料发现多采用HPLC法测定盐酸胺碘酮注射液的含量[3]，本文采用RP-HPLC法，取得了较好的分离效果，该方法简便、准确，可用于该药品的质量控制。

1仪器与试药

日本岛津LC-6A高效液相色谱仪，SPD-6AV紫外检测器，C-R3A数据处理机，pH计（COLE-PARMER，pHWAND，39000-50），盐酸胺碘酮标准品（中国药品生物制品检定所，0040-9109），盐酸胺碘酮注射液（杭州赛诺菲安万特民生制药有限公司,批号：0911103,规格：3mL∶0.15g），乙醇为色谱纯，三乙胺、磷酸均为分析纯，水为二次重蒸水。

2方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱为C18（Alltech，4.6mm×150mm，5um）;流动相为2％三乙胺(用磷酸调节pH4.0)一乙醇(30：70V/V)。流速为1mL.min-1;检测波长242nm;纸速1mm.min-1;检测灵敏度为0.02AUFS;进样量20ul;室温进行测定，盐酸胺碘酮色谱图见图1。

图1盐酸胺碘酮标准品、注射液色谱图：

2.2盐酸胺碘酮标准曲线的制备

精密称取盐酸胺碘酮标准品4.4mg，加水溶解并定容至25ml容量瓶，得0.176mg·ml-1标准储备液，放置冰箱冷藏避光保存备用。加流动相定容配制成浓度为5.5、11、22、44、88ug·ml-1的盐酸胺碘酮标准溶液，每一浓度进样5次，每次20ul记录色谱图，以峰面积为纵坐标，进样浓度为横坐标，得回归方程为：y=333.2.1271c+822.8117r=0.9996，n=5.结果表明，盐酸胺碘酮在5.5～88ug·ml-1范围内线性关系良好。

2.3盐酸胺碘酮精密度试验

取浓度为5.5、22、88ug·ml-1盐酸胺碘酮标准溶液，按上述方法进样，每一浓度测定5次，求得RSD分别为3.72%、3.19%、3.67%。

2.4盐酸胺碘酮稳定性试验

取盐酸胺碘酮注射液适量配置成浓度为5ug·ml-1、20ug·ml-1、80ug·ml-1的供试品溶液，分别在0、1、2、4、6、8h进样20ul，记录色谱图，求得日内变异系数（RSD）分别为1.63%、1.75%、1.81%（n=5）。分别在配置起当日、第1日、第5日、第10日、第30日进样20ul，记录色谱图，求得日间变异系数(RSD)分别为2.13%、2.40%、2.51%，（n=5），结果见表1。

表1盐酸胺碘酮稳定性试验

2.5盐酸胺碘酮回收率试验：

取盐酸胺碘酮注射液以流动相配置3份浓度约为20ug·ml-1的溶液，加入适量盐酸胺碘酮标准储备液，使盐酸胺碘酮浓度分别为30ug/ml，40ug/ml，50ug/ml，测得回收率(n=5）分别为（100.2%±2.31%）、（100.7%±1.65%）、(106.4%±3.21%）。

表2盐酸胺碘酮回收率试验

2.6盐酸胺碘酮注射液含量测定

取本品，按药典方法和本方法分别测定，结果见下表3。改进方法与原方法测定结果基本一致。

表3盐酸胺碘酮注射液含量测定结果

3讨论

盐酸胺碘酮是苯并呋喃类化合物，结构中的各取代基相对较稳定，但由于羰基与取代苯环及苯并呋喃环形成共轭体系，故固态的盐酸胺碘酮仍应避光保存。盐酸胺碘酮结构中有一个强极性二乙基氨基,在C18反相色谱柱上拖尾非常严重,用三乙胺作为扫尾剂可明显改善峰形，三乙胺的浓度不但对药物峰形产生影响,也会影响保留时间,而且易挥发，本试验所用流动相的水相中其含量较高(2%),当长时间使用该水相后因三乙胺挥发导致药物保留时间推后,所以此流动相应现配现用,同时应注意盖紧瓶口保持密封,减小对试验结果的影响。

参考文献

[1]钟志越，何岱昆，黎俊等.阿托品微量泵持续静脉推注在治疗急性有机磷农药中毒中的临床应用[J].中国临床医学.2009,5(16):816-818.

[2]汤光，金有豫.中国药典[M]，2010版.

[3]赵雪娥；谭帮华.HPLC法测定硫酸阿托品注射液的含量[J].华西药学杂志，2000，15（3）：212-214.