火焰原子吸收光谱法测定血清中锌

火焰原子吸收光谱法测定血清中锌

韩东海1钱保勇1梅剑娟2

韩东海1钱保勇1梅剑娟2

(1江苏省泰兴市疾病预防控制中心225400；2江苏省泰兴市中医院225400)

【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）30-0121-02

【摘要】血清经三氯乙酸沉淀蛋白后，并用TritonX-100作基体改进剂，导入原子化器中，原子化以后，213.8nm波长,其吸光值在一定范围内与锌含量成正比，与标准系列比较定量。结果表明：加入三氯乙酸后，血清中的锌很容易游离出来，通过离心避免了燃烧头堵塞的现象，提高了检测的准确性和回收率，TritonX-100作基体改进剂起增敏和抗干扰的作用。方法最低检出限（3s/k）为0.015mg/L，相对标准偏差（n=7）为3.12%。应用此法测定血清中锌，加标回收率在90.8%～96.7%之间。

【关键词】火焰原子吸收光谱法血清锌三氯乙酸TritonX-100

Flameatomicabsorptionspectrometrydeterminationofserumzinc

【Abstract】Theserumproteinprecipitationbytrichloroaceticacid，andTritonX-100usedasmatrixmodifierintotheatomizer，theatomsofthefuture，213.8nmwavelength，theabsorbanceofzincwithinacertainrangeproportionaltothecontentandstandardsseriesofquantitativecomparison.Theresultsshowedthat:byaddingtrichloroaceticacid，theserumzinciseasytofreethem，thefirstbycentrifugationtoavoidcloggingofthephenomenonofcombustiontoimprovetheaccuracyofdetectionandrecovery，TritonX-100asmatrixmodifiersandanti-sensitizingeffectinterference.LOD(3s/k)was0.015mg/L，therelativestandarddeviation(n=7)was3.12%.Shouldthismethodofzincinserum，therecoveryin90.8%～96.7%.

【Keywords】FlameatomicabsorptionspectrometryserumZincTCATritonX-100

在我国锌缺乏现象相当普遍，特别是青少年及儿童缺锌较为严重，锌是体内数十种酶的主要成分。锌还与大脑发育和智力有关。美国一个大学发现，聪明、学习好的青少年，体内含锌量均比愚钝者高。锌还有促进淋巴细胞增殖和活动能力的作用，对维持上皮和粘膜组织正常、防御细菌、病毒侵入、促进伤口愈合、减少痤疮等皮肤病变及校正味觉失灵等均有妙用。血清锌检测是当前公认的锌缺乏诊断试验，但目前很少有关于血清中锌检测方法的报道，本法就通过用三氯乙酸游离出血清中锌，经过简单的处理后，用TritonX-100作基体改进剂，通过火焰原子吸收光谱法测定。方法提高了检测的准确性和回收率，使用的试剂较少，便于操作，有利于普通实验室开展检验工作。

1实验部分

1.1试剂三氯乙酸（10%）；三氯乙酸（5%）；TritonX-100(0.1%)；锌标准储备液（1000μg/ml,有证标准物质）；锌标准使用液（10μg/ml）,牛血成分分析标准物质[GBM（E）090062-090063]。

1.2仪器及工作参数80-Ⅱ型电动离心机；岛津AA-6800原子吸收分光光度计，灯电流：8mA，狭缝：0.5nm，火焰类型：空气-乙炔，流量：2.0L/min，背景校正：D灯。

1.3步骤分别吸取0.00，1.00，3.00，5.00，7.00，10.00ml锌标准使用液于100ml容量瓶中，加入10ml三氯乙酸（10%），用TritonX-100(0.1%)定容至刻度，配成0.0，0.1，0.3，0.5，0.7，1.0μg/ml的标准系列。

取1.0ml血清样品于离心管中，加1.0ml10%三氯乙酸溶液，轻轻振荡混匀，静置15min，放于离心机中，1500rpm离心5min，上清液移入10ml容量瓶中，再向离心管中加入1.0ml5%三氯乙酸溶液同前面一样操作，反复2次，用TritonX-100(0.1%)定容至刻度，备用。

设定好仪器的条件，待仪器稳定后，分别测定标准和样品的吸光度，绘制标准曲线，求得血清样本中锌的含量。

2结果与讨论

2.1人体血清中锌含量为0.67～1.83μg/ml之间，用火焰原子吸收光谱法测定血清中锌完全能满足要求。

2.2血清中有许多有形成分，当分析样品较多时，会堵塞火焰燃烧头，使火焰分叉断裂，影响测定结果，而锌在血清中的存在形式是与蛋白相结合的，加入三氯乙酸后，锌很容易游离出来，通过离心分离，可避免燃烧头堵塞的现象，便于检测。

2.3TritonX-100作为基体改进剂，起到增敏和抗干扰的作用，提高了方法的灵敏度和准确性。

2.4标准曲线和方法检出限在试验条件下，配制0.0，0.1，0.3，0.5，0.7，1.0μg/ml的标准系列，其回归方程为Y=0.386X+0.01，r=0.9997，实验证明方法具有良好的线性关系。对空白溶液连续测定20次，以3倍标准偏差除以曲线斜率计算方法检出限为0.015mg/L。

2.5下表是10组血清样品加三氯乙酸与不加三氯乙酸的结果的比较：

以上可以看出加入三氯乙酸后测定结果有了一定的提高并更接近于真值。

2.6方法精密度和回收率对样品进行精密度试验，测得RSD=3.12%(n=7)；并对样品进行回收率试验，分别加入低、中、高三种浓度的标准，测得回收率在90.8%～96.7%之间。

2.7本法采血所用抗凝管中的抗凝剂可用EDTA，也可用肝素钠，两者均不干扰测定结果。

本法通过用三氯乙酸沉淀蛋白，游离出血清中的锌，离心分离，用TritonX-100作基体改进剂进行检测，提高了方法的灵敏度、准确性和回收率，而且操作简便，成本消耗小，适合于基层实验室进行血清中锌的检测。

参考文献

[1]方荣主编.原子吸收光谱法在卫生检验中的应用.北京大学出版社,1991:216.

[2]郭明才著.原子吸收光谱分析应用指南.2006:232.