TRUST和ELISA法检测供血浆者血液梅毒结果的比较

TRUST和ELISA法检测供血浆者血液梅毒结果的比较

孙莉群王军

孙莉群王军（宜春市上生单采血浆有限公司江西宜春336024）

【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）18-0237-02

【摘要】目的通过比较甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体双抗原夹心法试验（ELISA）两种方法的灵敏度、特异性，为单采血浆站选择适宜检测方法时提供依据。方法对2009年12月份我站采集的4214份供血浆者血清标本分别用甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体双抗原夹心法试验（ELISA）两种方法进行检测后对结果进行统计。结果4214份被检血清中，TRUST法阳性者6份，阳性率为0.14%，ELISA法阳性13份，阳性率为0.31%。4214份被检血清中，两种方法结果不一致的标本数为7份，比例为0.17%，结果一致的标本数为4207份，比例为99.83%，其中：TRUSA法和ELISA法均为阴性者为4201份，阴性率为99.69%，TRUSA法和ELISA法均为阳性者为6份，阳性率为0.14%。结论血液安全是我们必须重视的一个问题，加强血液安全，选择一个灵敏度高的方法是我们单采血浆站为确保血液制品安全应有的责任，因此，笔者建议选择ELISA法为献血（浆）者样本的筛查检测。

【关键词】TRUSTELISA检测供血浆者梅毒

1.引言

梅毒是由苍白密螺旋体的苍白亚种即梅毒螺旋体所引起的一种性传播疾病，其传播途径为性接触、母胎、输血、注射等。而供血浆者作为血液制品生产用人血浆的供应者，相关法律法规要求为了血液制品安全，单采血浆站必须每次在采浆时对供血浆者进行梅毒等项目的检测[1]以确保血液制品的安全。目前各单采血浆站多采用甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体双抗原夹心法试验（ELISA）两种方法检测[2]。通过比较甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体双抗原夹心法试验（ELISA）两种方法的灵敏度、特异性，为单采血浆站选择适宜的检测方法时提供依据。

2.材料与方法

2.1标本来源2009年12月份我站采集的4214份供血浆者血清标本。

2.2检测方法应用TRUSA法和ELISA法对4214份供血浆者血清分别进行梅毒常规筛查检测，操作及判读结果均严格按照试剂说明书进行。

2.3检测试剂TRUST试剂采用上海荣盛生物技术公司的产品，ELISA试剂采用北京万泰生物药业股份有限公司，均经国家药检所批批检合格，在有效期内使用。

2.4使用设备TRUSA法：苏州医疗器械公司生产的型号为XK96-6的梅毒旋转振荡器、芬兰雷勃生产的20-200ul单孔移液器。ELISA法：北京天石医疗用品厂生产的ZMX988B洗板机、芬兰雷勃生产的MK3酶标仪、芬兰雷勃生产的20-200ul单孔移液器、芬兰雷勃生产的50-300ul8孔移液器、天津三水仪器公司生产的HBB11-360电热恒温培养箱，以上设备均经计量部门检定合格。

2.5检测环境室温控制在18℃-25℃，湿度控制在30%-70%，符合实验室要求。

3.结果

3.14214份供血浆者血液标本两种方法结果对比表见表1

表14214份供血浆者血液标本两种方法结果对比表

从表2可以看出：4214份被检血清中，两种方法结果不一致的标本数为7份，比例为0.17%，结果一致的标本数为4207份，比例为99.83%，其中：TRUSA法和ELISA法均为阴性者为4201份，阴性率为99.69%，TRUSA法和ELISA法均为阳性者为6份，阳性率为0.14%。

4.讨论

(1)从表1和表2可以看出，TRUST灵敏度低于ELISA，存在一定假阴性率。主要原因为:1）试验原理差异：TRUST试验为甲苯胺红不加热血清试验，是非特异性螺旋体抗原试验，采用牛心磷脂作为抗原的非特异性检测，主要用于测定血清中的反应素，即类脂质非特异性抗体。非特异性反应素在三期梅毒时有部分会逐渐降低甚至可能转阴[3]，因此TRUST可导致假阴性。而ELISA试验为双抗原夹心法，是特异性螺旋体抗原试验，是在微孔条上预包被基因表达梅毒抗原试验，是在微孔条上预包被基因表达梅毒抗原，用HRP标记基因重组梅毒抗原，与血清中的梅毒螺旋体特异性抗体结合，最后用TMB底物作用显色。该方法能检测血液中的梅毒特异性抗体，可同时检测血清中梅毒抗体IgG和IgM。特性性抗体在梅毒的潜伏期即产生（约感染后2周），在梅毒各期甚至治疗后仍保存阳性[3]，血清反应仍然阳性，能够做到准确、不漏检、较高地避免阴性的出现。2）结果判读差异：因TRUST试验为非特异性血清学实验，手工操作，肉眼判读结果，敏感性及特异性均较差。而ELISA方法结果判定更科学，可在酶标仪上直接读取数据，并可将数据输入计算机贮存处理减少了人为操作和判断失误，检验原始数据和结果可长期保存和追溯，尤其适合采供血机构献血者大批量样本的筛查处理，更能确保血液制品原料血浆的安全性。3）影响因素差异：另外多种疾病如急性病毒感染、自身免疫性疾病（病毒性感染、麻风、疟疾、妊娠反应等）[3]等诸多因素的影响，致使TRUST法常出现生物学假阳性，而ELISA法受其它因素的影响较小。

(2）两种方法的优缺点：TRUST法操作简便；检测试剂价格便宜；反应时间快，只需几分钟；所需仪器设备简单；较适用于基层实验室，但因结果为肉眼观察，因实验者个体差异及主观判断，存在漏检的可能，且对三期梅毒检测可能呈阴性。ELISA法操作较之稍复杂，检测试剂价格稍贵一些，反应时间为2小时左右，结果判读在酶标仪上直接读取数据，并可将数据输入计算机贮存处理减少了人为操作和判断失误，检验原始数据和结果可长期保存和追溯，尤其适合采供血机构献血者大批量样本的筛查检测。

血液安全是我们必须重视的一个问题，加强血液安全，选择一个灵敏度高的方法是我们单采血浆站为确保血液制品安全应有的责任，因此，笔者建议选择ELISA法为献血（浆）者样本的筛查检测。

参考文献

[1]《中华人民共和国药典》.（2010版）血液制品生产用人血浆.

[2]《单采血浆站技术操作规程》.（2011版）附录Ⅵ.

[3]刘海田.梅毒螺旋体血清学检验技术.《血液制品采集检测技术标准及质量控制实务全书》.北京中软电子出版社.2003年3月.