影响药品微生物限度检验结果的因素分析

影响药品微生物限度检验结果的因素分析

张红丹

张红丹

（吉林省长春市食品药品检验所130012）

【摘要】本文对影响药品微生物限度检验结果的多种因影响素进行分析探讨，以减少或消除检验误差，确保检验结果的科学性和准确性。

【关键词】微生物限度影响因素药品

【中图分类号】R927【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）28-0180-02

药品是一种特殊的商品，其安全性关系到每个人的生命健康，《药品生产质量管理规范》是药品生产和质量管理的基本准则[1]。药品微生物限度检查操作繁琐，要求严格，以下对容易引起误差的影响因素进行分析。

1操作环境

1.1微生物限度检查应有单独的洁净实验室，每个洁净实验室应有独立的净化空气系统。洁净度不低于10000级，局部洁净度为100级，光照度不低于300LX，温度范围18～26℃，相对湿度40％～60％。操作间或净化工作台的洁净空气不低于10Pa，操作间与缓冲间不低于5Pa。每次实验操作前用0.1％苯扎溴铵溶液或其它适宜的消毒液擦拭操作台及洁净室其它可能污染的死角，然后启动层流净化装置，紫外灯照射1h。定期对洁净实验室内的紫外灯的辐射强度及沉降菌进行检查，以保证洁净室的技术指标达到相应的标准规定。

1.2洁净室内应固定存放药物天平、碘伏棉、75％酒精棉球、剪刀、镊子、乙醇灯、火柴等实验用具。实验人员进入无菌室前进行手卫生处理，然后进入缓冲间，换鞋。再用适宜的消毒液洗手，穿戴无菌衣、帽、口罩、手套等。进入洁净室后不宜频繁走动，所需物品应通过传递舱传递，以减少任何可能污染的途径。

1.3涉及实验室监控菌株的分离鉴定、样品阳性菌株的分离分析、方法验证试验中的阳性菌操作等实验活动，应在专门的阳性菌实验室进行。阳性菌实验室还应符合国家Ⅱ级生物安全标准，阳性菌实验室应配备生物安全柜。以减少菌种交叉污染。

2培养基

培养基的质量对检验结果极为重要。商品脱水培养基极易吸潮，出现凝块，影响实验结果的准确性，因此必须严格按照使用说明存放，并在规定的有效期内使用。培养基只能进行一次蒸汽灭菌，灭菌结束后及时取出培养基，避免温度过高时间过长，营养成分过度受热而破坏。灭菌后的培养基在2～25℃保存，3周之内使用。培养基注入平面皿时的温度应控制在45℃，实验过程中可用45℃水浴保温。

3菌落计数

药典规定：菌落蔓延生长成片的平板不宜用于计数。供试液制备时一定要使药品分散均匀、培养基的质量要符合要求，不能影响实验结果；在规定培养条件下，应严格遵守培养温度和时间，菌落计数可从平板背面直接以肉眼点计，计数时要注意供试品药物颗粒、沉淀物、气泡等因素的影响。当供试液中有不溶性颗粒或沉淀物存在对计数有影响时，可用低倍显微镜和放大镜观察，如仍难以区分时，可在培养基平板上加入5～10ml的0.001％TTC，30min后菌落菌落染成深红色，利于菌落计数的准确性。含蜂蜜和王浆的液体制剂检查时，玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌的计数，同时增加酵母浸出粉胨葡萄糖（YPD）琼脂培养基来检查酵母菌菌落数。霉菌菌落计数时，如初次计数后还需继续观察，在初次计数时平板不易反复翻动，要轻拿轻放，防止霉菌孢子散落长成新的菌落影响实验结果。

4供试液的制备

供试液的制备是微生物限度检查的关键步骤之一，为保证结果的准确真实，进行微生物限度检查时，应先进行方法的适用性验证实验，以确保供试品在该试验条件下无抑菌活性或抑菌活性可忽略。所用的检查方法及检验条件应与验证的方法条件一致。检验的全过程必须符合无菌操作的要求，制备过程中若需要用水浴加温时，温度不应超过45℃。使用的所有用具都要经过灭菌处理，使用过程中不要接触可能污染的任何物品，操作应在近火焰处进行。对供试液进行稀释或注入器皿时，应将供试液振摇混匀后进行操作，从供试液制备到加入培养基的全程操作应在1h内完成。实验过程中，供试品、培养基、稀释剂的量，要严格定量加入，不可估计量取，保证结果的准确性。供试液制备时，如需要使用乳化剂、分散剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物的生长和存活无影响。

5设备及用具

对于检验设备与工具必须定期进行检定，所用的器皿均应在泡酸处理后用蒸馏水洗涤干净，牛皮纸包扎严密，高压灭菌，高压灭菌后物品取出后置于恒温培养箱中烘干，待用。各种恒温恒湿培养箱应定期进行检定，每天观察箱内温度湿度作好记录。以保证仪器设备正常使用。

6药品性质

由于药品的特殊性质及微生物的活体特征，所以既要保持供检样品污染菌的存活又不能大量增殖是尤为重要的。

7人员

检验人员必须具备微生物学专业背景，经培训考核后上岗。检验人员要严格要求自己不断加强学科技术能力，树立科学检验精神，提高自身素质，不断提高检验体制机制，这就要求我们把“服从监管需要、服务公众健康”作为工作宗旨。应以高度的责任心和严谨的工作态度对待每一个细小的实验操作环节。药品微生物限度检验是一项复杂的系统工程，检验前要做好充分的准备工作，实验过程要求科学、严谨、加强室验保障、完善方法验证和标准化操作规程（SOP）等，保证结果的准确、科学。

参考文献

[1]王定贵.药品微生物限度检查与药品质量研究[J].中国现代药物应用，2012，6(23)：125.