胃癌组织中EGFR的表达与胃癌靶向治疗

胃癌组织中EGFR的表达与胃癌靶向治疗

高明1梁秀菊2陈小兵3马望1张明智1

高明1梁秀菊2陈小兵3马望1张明智1（通讯作者）

（1郑州大学第一附属医院肿瘤科河南郑州450052)

(2济南军区总医院肿瘤科山东济南250001；3河南省肿瘤医院肿瘤内科河南郑州450007）

【摘要】目的研究EGFR在胃癌组织中的表达意义，为以EGFR为靶点的胃癌分子靶向治疗，提供理论依据。方法收集2001年3月-2009年12月胃癌手术石蜡标本78例，免疫组化法检测78例胃癌及20例癌旁正常组织中EGFR的表达情况，分析其高表达与临床病理特征之间的关系。结果78例胃癌组织中EGFR阳性表达率分别为57.7%，20例癌旁正常组织中EGFR表达率为0%，且EGFR蛋白的高表达与胃癌的部位、细胞分化程度、肿瘤的大小、浸润深度、淋巴结转移及临床分期均呈正相关；而与患者的年龄、性别无明显相关。结论在胃癌组织中，EGFR表达增高与胃癌的发生发展密切相关，以EGFR为靶点的胃癌靶向治疗理论意义确切。

【关键词】胃癌EGFR靶向治疗

胃癌是最常见恶性肿瘤之一，目前胃癌死亡病例数仅次于肺癌占第二位。近年来,胃癌的分子靶向治疗研究取得了可喜的成绩。目前这种治疗策略主要包括血管内皮生长因子(VEGF)通道的靶向治疗、表皮生长因子受体（EGFR）靶向治疗、细胞周期抑制剂等。近几年在胃癌的研究中显示EGFR在胃癌中有高表达，与胃癌的发生、发展及生物学行为密切相关。本研究应用免疫组化法检测并分析EGFR在胃腺癌组织和癌旁正常胃粘膜组织中的表达情况，探讨其作为分子靶点指导胃癌分子靶向治疗的临床意义。

1材料与方法

1.1标本

78例胃腺癌组织和20例癌旁正常胃组织来自郑州大学第一附属医院和河南省肿瘤医院病理科2001年3月～2009年12月间石蜡标本，根椐2003年国际抗癌联盟(UICC)和美国肿瘤联合会(AJCC)联合制定的TNM分期标准进行临床分期。

1.2试剂与仪器

EGFR（产品编号:MAB-0196）试剂盒选用即用型MaxVision检测试剂盒，对二甲氨基偶氮苯（DAB）显色剂，均购自福州迈新生物技术开发公司。仪器包括：石蜡切片机、显微镜、电热恒温干燥箱，镜下图像以OlympusDp70图像采集分析仪进行采集、分析。

1.3方法

（1）切片：石蜡标本制成3-5μm切片；（2）切片65℃电热恒温干燥箱过夜，脱蜡至水；（3）EGFR经胃酶进行酶消化抗原修复,37℃水浴箱内孵育30min；（4）PBS液冲洗3min；（5）H2O2100ml+CH3OH900ml液浸泡10min；（6）PBS冲洗3次滴加一抗，4℃冰箱过夜；（7）PBS冲洗2次，滴加即用型MaxVision检测试剂，室温下40min；（8）PBS冲洗3次后DAB显色；（9）苏木素复染；（10）脱水封片，显微镜下观察。

1.4结果判断

每批实验均设阳性和阴性对照，EGFR表达阳性可见细胞膜细胞浆有棕黄色颗粒样沉淀,阴性细胞膜细胞浆无棕黄色颗粒样沉淀。染色分级整张切片无阳性细胞（-），阳性细胞数<10%(+),阳性细胞数10%-50%(++),阳性细胞数≥50%(+++)。

1.5统计分析

应用SPSS17.0统计软件包进行统计分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

78例胃癌组织中EGFR阳性表达率分别为57.7%，20例癌旁正常组织中EGFR表达率为0%，EGFR蛋白表达与患者性别、年龄无显著性相关,与肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及临床分期相关。

3讨论

表皮生长因子受体(EGFR)属于酪氨酸激酶I型受体家族,研究发现EGFR的过表达参与肿瘤的发生和肿瘤细胞的增殖,且可通过对细胞骨架的重构、黏附、移动、表达及蛋白脂酶的活化等多种机制参与肿瘤细胞的转移。本研究显示在胃癌组织中EGFR阳性表达率为57.7%，其表达随着肿瘤部位、肿瘤增大、侵袭深度加深、出现淋巴结转移及远处转移而明显增高，这说明EGFR参与了胃癌肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移等生物学行为。

EGFR单克隆抗体与胃癌的治疗：Cetuximab（西妥昔单抗）、Trastuzumab、Panitumumab（帕尼单抗）等为EGFR单克隆抗体，Pinto等应用Cetuximab+Folfiri方案一线治疗晚期胃癌的Ⅱ期临床试验，总体有效率为44.1%，中位疾病进展时间为8个月，预期中位生存时间为16个月。最早公布的Ⅱ期临床试验是以奥沙利铂为基础,联合西妥昔单抗,它证实了早前认为的K-ras突变或EGFR基因拷贝数的增加在胃癌中较少见,第一次证明使用西妥昔单抗结合FOLFOX6在EGFR表达并且低配体水平的胃癌患者中有较好的预后。在38例患者中,被证实PR(部分缓解)为50.0%,TTP(疾病进展时间)为5.5个月,OS(总生存期)为9.9个月。Pintol等运用西妥昔单抗联合FOLFIRI作为一线治疗进展性胃癌和胃食管交接处(GEJ)肿瘤患者。共选择了38例患者,其中34例为ORR,占44.1%,TTP为8个月,在随访的11个月中55.3%的患者仍生存,平均预计生存期为16个月。因此,虽然在大多数西妥昔单抗联合化疗Ⅱ期的临床试验中,RR均显示较单使用化疗提高,但中位生存时间和早前的研究无差异。Lordick等研究表明西妥昔单抗加上FUFOX治疗晚期胃癌患者，其TTP达到7.6个月总生存期9.5个月，耐受性良好。

EGFR酪氨酸激酶拮抗剂与胃癌的治疗:Gefitinib（吉非替尼）、Elotinib等为EGFR酪氨酸激酶拮抗剂，能抑制EGFR激酶区磷酸化，而阻断下游相关信号传导，从而达到治疗目的。有研究显示，给予Ⅳ期胃癌患者以Gefitinib治疗后，瘤细胞增殖指数下降，而细胞凋亡增加。Dragovich等应用Elotinib单药一线治疗晚期胃癌和贲门癌的Ⅱ期临床试验的总有效率为9%，治疗贲门癌的中位生存期（6.7个月）好于胃癌（3.5个月）。曹卫国等在胃癌细胞株中发现吉非替尼应用可提高胃癌细胞的放射敏感性并阻碍细胞增殖、促进凋亡和干扰细胞周期分布。最近的一项临床前研究显示吉非替尼能增强细胞毒性药物的抗肿瘤活性。此外，EGFR靶向药物与其他肿瘤基因如bcl2、p53、Survivin等的靶向治疗联合，发挥协同作用，也能够起到增强抗肿瘤的作用。

胃癌组织中EGFR分子靶向治疗为晚期胃癌长期以来生存时间短、化疗效果有限的现状打开了新的局面,由于EGFR在胃癌中存在特异性表达，相信随着EGFR在胃癌中研究的进一步深入,做为治疗胃癌的一个新的理想靶点，针对EGFR的靶向治疗将为胃癌治疗提供新的有效方法。相信在不久的将来，晚期胃癌的治疗将掀开新的篇章。

参考文献

[1]孙燕，石远凯主编.临床肿瘤内科手册[M].第五版.北京:人民卫生出版社.

[2]付建华,赵曼,胡国强,杨达宽,黄云超.EGFR和E-cadherin与肿瘤的发生发展及其调控机制的研究进展.实用癌症杂志，2008，27:107-109.

[3]曹卫国，马韬，李建芳，黎皓，纪玉宝，陈雪华，刘炳亚，金冶宁.吉非替尼对胃癌细胞株放射增敏的作用.癌症，2007,26(12):1330-1335.