均匀试验法优化靛玉红超声辅助提取工艺的研究

均匀试验法优化靛玉红超声辅助提取工艺的研究

张剑1张珩2焦韵苹2

张剑1张珩2焦韵苹2

（1陕西医药控股集团有限责任公司710075）

（2陕西省妇幼保健院陕西西安710003；陕西省第二人民医院陕西西安710001）

【摘要】目的研究板蓝根中靛玉红的超声辅助提取工艺。方法以靛玉红含量为指标，采用均匀设计法考察影响超声辅助法提取靛玉红的主要因素，并优化板蓝根中提取靛玉红的工艺条件。结果试验确定的靛玉红最佳提取工艺为：板蓝根粗粉以12倍量无水乙醇，于16kHz功率、60℃条件下超声提取30min共2次，该工艺下测得板蓝根中靛玉红的含量为14.20μg?g-1（生药材）。结论本工艺操作简单易行，提取周期短，效率高。

【关键词】板蓝根靛玉红提取工艺

【中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）07-0390-01

OptimizationofUltrasonic-assistedExtractionProcessofIndirubinbyUniformDesignMethod

【Abstract】objectiveToresearchonultrasonic-assistedextractionprocessofindirubin.methodUsingindirubincontentastheindex,theuniformdesignmethodtostudytheeffectsofultrasonic-assistedextractionofindirubinmainfactor,andoptimizationofextractionprocessofindirubinbyRadixIsatidis.resultTheoptimumextractionprocessisusing12timesethanolasRadixIsatidis,andextractundertheconditionof16kHzpowerand60℃fortwice.Astheconditionofthebestcraft,thecontentofinderubinis14.20μg?g-1.conclusionThetechnologyissimpleandeasyoperation,shortextractionperiodbuthighefficiency.

【Keywords】RadixIsatidisinderubinextractionprocess

引言

板蓝根（RadixIsatidis）是十字花科菘蓝属植物菘蓝（IsatistinctoriaL.）的干燥根，为我国常用的传统中药材，主要含靛蓝、靛玉红等吲哚类和氨基酸类成分，具有清热解毒、凉血利咽和消肿等功效[1]。板蓝根提取的传统工艺为水提醇沉法,利用该法所得有效成分的提取率小、损失大[2]。为减少提取过程中有效成分的损失,增加药材的利用率，本研究拟采用超声辅助醇提工艺,以靛玉红含量为考察指标,以均匀试验设计对影响其提取的各主要因素进行研究，通过薄层层析－紫外分分光光度法来测其含量以确定出最佳的提取工艺条件。

1仪器与试药

1.1试验试药

板蓝根饮片（西安怡康医药超市，由大学教授鉴定为十字花科菘蓝属植物菘蓝（IsatistinctoriaL.）的干燥根）；靛玉红标准品（中国药品生物制品检定所）；其他试剂均为分析纯。

1.2仪器设备

752型分光光度计（上海光谱）；KQ-500DE数控超声仪（昆山市超声仪器）；BSA124S电子天平（德国赛多利斯）；RE-52型旋转蒸发仪（上海青浦）；HH-2超级恒温槽（常州国华）。

2方法与结果

2.1靛玉红的含量测定方法研究

2.1.1靛玉红标准曲线的制备[3]

用无水乙醇将靛玉红标准品溶解，以无水乙醇为空白，于760CRT双光束紫外分光光度计扫描，确定测定波长为289nm。精密称靛玉红标准品0.0030g，无水乙醇定容至100mL，摇匀。分别移取上述溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0和6.0mL于25mL容量瓶，无水乙醇定容，摇匀。以无水乙醇为空白，在289nm下测吸光度。以靛玉红浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作直线，计算其回归方程为：y=0.0932x-0.0027（r=0.9998，n=6），说明靛玉红在1.2～7.2μg?mL-1时本测定方法的线性关系良好。

2.1.2样品液的制备与测定

将提取液减压回收至无醇味，用氯仿萃取，浓缩氯仿萃取液并定容至10mL。取定容液40μL点样于硅胶板上，以氯仿—乙酸乙酯（8:2）进行展开[4]，刮取与对照品Rf值相同的紫红色斑点，用无水乙醇提取并离心，取上清液并定容至5mL，即为样品液。以无水乙醇为空白，在

289nm波长处测定样品溶液的吸光度，并计算靛玉红的含量。

2.1.3精密度和加样回收率实验取40μL靛玉红标准溶液（100μg?mL-1），按上述方法重复测定5次，结果为：S=0.0032，RSD(%)=1.55，表明本方法重复性良好。另取已知含量样品液40μL数份，点样，分别取100μg?mL-1的靛玉红标准溶液3、4、5、6和7μL，与已知供试品点于同一点上，按上述方法进行含量测定，结果为：S=2.1875，RSD(%)=2.29。

2.2超声辅助法提取板蓝根中靛玉红的工艺研究

2.2.1超声辅助提取工艺的基本操作

称取板蓝根粗粉50.0g，按料液比加入一定浓度的乙醇溶液，在一定条件下超声辅助提取2次。过滤，合并两次滤液，减压回收提取液至无醇味，用氯仿萃取至氯仿层透明。取氯仿层，减压回收氯仿，即得靛玉红粗品。

2.2.2均匀设计法优化靛玉红提取工艺

根据单因素实验结果，药材粒度和超声温度对提取效果的影响很小，故直接采用单因素实验结果，确定为板蓝根粗粉为提取原料，60℃下超声提取。而影响板蓝根超声辅助提取的主要因素有：乙醇体积分数（A）、料液比（B）、超声时间（C）以及超声功率（D），以靛玉红的含量为考察指标，采用U8（83×4）混合水平均匀试验，研究提取靛玉红的最佳工艺条件。其因素水平表见表1，试验结果见表2。

表1U8(83×4)均匀设计试验因素水平表

由表３可知，在实验确定的最佳提取工艺条件下，进行重复实验所得的浸提率均大于均匀设计实验最大值，说明通过均匀设计实验所得的实验方案可行。

3结论

本研究以靛玉红含量为评价指标，通过均匀设计试验优化超声辅助法从板蓝根中提取靛玉红的工艺条件，筛选出最佳工艺条件为：板蓝根粗粉加12倍量无水乙醇，于16kHz功率、60℃条件下超声提取30min共2次，且在此条件下得到靛玉红的含量为14.20μg?g-1（生药材），说明所得提取工艺操作简单易行，提取周期短，效率高。

参考文献

[1]季宗彬.中药有效成分药理与应用[M].北京:人民卫生出版社,2011.

[2]李影,滕兆森,金汉台.板蓝根冲剂生产过程中靛玉红的含量变化及工艺改进设想[J].中成药,1990,12(9):8-10.

[3]温博栋.板蓝根制剂提取工艺及检测方法研究概况[J].中成药,1995,17(6):8-9.

[4]迟芳振,苏维国,车洪勇.板蓝根颗粒的薄层色谱鉴别[J].药物分析杂志,1999,19(1):61-62.