蛹虫草的安全性评价

蛹虫草的安全性评价

高珉之王明秋张雷柴玮杰赵博

高珉之王明秋张雷柴玮杰赵博（黑龙江省疾病控制中心黑龙江哈尔滨150030）

【摘要】目的为蛹虫草安全性评价提供毒理学依据。方法卫生部《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）进行急性毒性、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、Ames试验和大鼠30d喂养试验。结果蛹虫草对雌、雄小鼠和雌、雄大鼠进行急性毒性试验，结果该样品LD50＞10.0g/kg?BW，属实际无毒物质；Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸变试验等三项遗传毒性试验检测均为阴性；30天喂养试验3个剂量组大鼠各项指标与对照组比较均无显著性差异。结论蛹虫草属实际无毒级;未见潜在致突变作用;对大鼠30d喂养试验,未见其对受试动物有毒性损害作用。

【关键词】蛹虫草毒理实验安全性评价

【中图分类号】R961.1【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）25-0036-01

蛹虫草又称蛹草、北冬虫夏草，与冬虫夏草同属于真菌门虫草属，是我国传统名贵野生药材中的一种真菌类药材。有资料显示其重要成分为虫草素（3’-脱氧腺苷）、腺苷、虫草糖、虫草酸、麦角甾醇、β-谷甾醇、腺嘌呤、18种氨基酸及硒、钾、钙、铁、锌等多种人体必须的微量元素。目前冬虫夏草价格昂贵，是很多人心目中的上等补品，还有些宣传称其在增强免疫和抗氧化方面效果显著，那么它在食品安全方面究竟如何，对此我们进行了食品安全性评价。

1材料和方法

1.1样品

蛹虫草由生产企业提供，据称是国内蛹虫草中最接近野生形态的品系之一，人体推荐剂量为2.7g/60kg?BW/d。

1.2试验动物

清洁级ICR小白鼠及清洁级Wistar大白鼠均由吉林大学基础医学院动物试验中心提供，许可证号：SCXK（吉）2003-0001。

1.3动物实验室环境

屏障环境。许可证号：SYXK（黑）2006-008。饲料由北京科澳协力饲料有限公司提供，许可证号SCXK(京)2005-0007。

1.4急性毒性试验

采用霍恩氏法进行试验，分别选用清洁级ICR小白鼠40只，雌雄各半，体重20±2g。清洁级Wistar大鼠40只，雌雄各半，体重200±20g，随机分组。动物试验前隔夜空腹（禁食16小时，不禁水），以10.0、4.64、2.15、1.0g/kg?BW剂量进行灌胃给予受试物，高剂量组为间隔四小时按20ml/kg?BW两次灌胃，其余各组均按20ml/kg?BW。灌胃后观察14天，注意观察动物中毒及死亡情况。

1.5遗传毒性试验

1.5.1Ames试验

将受试样品在无菌条件下用无菌蒸馏水稀释分别制成5000、1000、200、40、8μl/0.1ml共5个浓度的样，0.055MPa20分钟灭活，同时设阴性对照组及阳性对照组敌克松50μg/0.1ml（-S9）、叠氮钠1.5μg/0.1ml（-S9）、二氨基芴10μg/0.1ml（+S9）、1，8—二羟基蒽醌50μg/0.1ml（+S9）。试验采用平板掺入法，每皿加入0.1ml受试物、0.1ml菌液和0.5mlS9混合液（+S9）。TA97、TA98、TA100、TA102经生物特性鉴定合格后投入试验。S9肝微粒体酶经加已知致突变物试验，酶活性良好。

1.5.2小鼠骨髓细胞微核试验

选用清洁级ICR小白鼠，体重25～30g，雌雄各半，共50只，随机分为5组，每组10只。剂量分组：设三个剂量组，高剂量组为6.7g/kg?BW（此为一次最大灌胃量）、中剂量组为3.35g/kg?BW、低剂量组为1.68g/kg?BW，对照组给予同体积蒸馏水。各组均按20ml/kg?BW给予不同浓度的受试物，阴性对照组以等量蒸馏水灌胃，每日一次，连续2日；阳性对照组为间隔24小时经口灌胃给予环磷酰胺(40mg/kg?BW)两次。各组均在末次灌胃或注射后6小时处死动物，取材常规制片，显微镜下每只动物观察1000个嗜多染红细胞(PCE)，记录有微核的细胞数，计算出细胞微核率。观察并记录嗜多染红细胞与成熟红细胞比值。

1.5.3小鼠精子畸变试验

选用清洁级雄性ICR小白鼠25只，随机分成5组，每组5只，体重25～35g。剂量分组及给予受试物方式同微核试验。阴性对照组给予相同体积蒸馏水，阳性对照组给予环磷酰胺(40mg/kg?BW)，每日一次，连续5日。各组动物均在首次投与受试物后35天处死，按常规方法制片、固定，2%伊红溶液染色，每只动物镜检1000个完整精子，计算畸形率。

1.630天喂养试验

采用刚断乳的Wistar大白鼠80只，体重85±10克，随机分成4组，每组20只，雌雄各半，其中三个组为试验组，一个组为空白对照组。高剂量组为4.5g/kg?BW/d(相当于人体推荐量100倍),中剂量组为2.25g/kg?BW/d(相当于人体推荐量的50倍)，低剂量组1.13g/kg?BW/d(相当于人体推荐量的25倍)。各组动物均采用饲料掺入法，动物单笼喂养，自由饮水、进食，每周称一次体重，并记录食物摄入量，30天后杀鼠做血液学、血液生化、病理组织学检查及脏器系数计算。

2结果

2.1急性毒性试验：玉米花丝MTD＞10.2g/kg?BW。

2.2遗传毒性试验：结果表明无遗传毒性作用。

2.2.1Ames试验：结果为阴性。

2.2.2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验：结果为阴性。

2.2.3小鼠精子畸形试验：结果为阴性。

2.3大鼠90天喂养试验：临床检验、血液生化学检查、脏器称量结果表明各检验项目的试验组与对照组比较：血液生化学指标可见，各剂量组的各项指标与对照组比较，差异均无显著性意义（P＞0.05）。体重增长及食物利用率结果显示，动物生长及状态未见异常。病理组织学检查结果表明对照组和高剂量组雄、雌性大鼠的肝、脾、肾、胃、肠、睾丸（卵巢）、心脏，均未见与实验因素有关的病理组织学变化。

3结论

蛹虫草属实际无毒级;未见潜在致突变作用;对大鼠30d喂养试验,未见其对受试动物有毒性损害作用。

参考文献

[1]赵克蕊等121冬虫夏草的药理作用[J];国外医药.植物药分册;2006年03期.

[2]陈建国等冬虫夏草菌丝体的安全性毒理学评价.《中国卫生检验杂志》2009年02期.