桑叶总降糖活性成分的提取及其胶囊制剂学研究

桑叶总降糖活性成分的提取及其胶囊制剂学研究

孙媛

哈药集团世一堂制药厂150000

【摘要】通过实验探究对桑叶当中有效降糖成分提取方法的优化方案，使降糖成分的提取工作能在降低成本的同时有良好的效果。并能创建胶囊制剂的质量检验标准，实现对桑元止咳类药物的质量控制。方法：在提取桑叶当中总降糖成分的阶段中，采用了复合类型的成分提取工艺，并采用了单因素类型的分析方式，对实验分析提取时间因素、环境温度数值、提取阶段乙醇体积分数数值、提取料液比例数值以及提取总次数进行了分析。在最终的分析当中以桑叶当中的生物碱物质提取分数为标准，确定最终的影响因素以及最佳反应数值。在处理数据的阶段中，综合运用BOX类型的响应分析法以及分析软件对实验数据进行分析，进一步完善提取工艺数据。同时在实验分析当中使用ZTCL天然澄清剂对提取出来的桑叶降糖成分进行澄清处理，同样通过单一变量实验方式研究最佳的澄清条件。结果：在但用单一变量研究方式探究提出操作最佳状态的时候，以热回流类型处理方式提取桑叶当中有效降糖成分，以乙醇和水的混合溶液作为有提取剂，提取反应的环境温度为80摄氏度，整个提取过程的时间长度为120分钟，乙醇浓度被设定为百分之65，料液混合比为1：1的条件下，生物碱物质的有效提取率达到了百分之0.356。结论：通过单一变量实验分析方式探究了提取桑叶当中生物碱最佳的反应环境温度、提取处理时间长度、物质提取次数以及料液比数值。在确定了各种反应标准数据之后进一步提升了有效成分的提取效果。并以实验数据作为结果，进一步完善了胶囊的制工艺，使制备出来的胶囊具有颗粒大小适度、填装效果均一、质量可靠的特点。

【关键词】桑叶；降糖作用；成分；提取；胶囊制剂

在生活水平普遍提高的当今，糖尿病已经成为自心血管疾病和恶性肿瘤后威胁人类健康的第三大杀手。其发病率呈上升趋势，已经成为一种常见病、多发病。糖尿病的病因和发病机制至今仍不十分清楚，目前临床尚无根治此病的药物。西药治疗糖尿病作用靶点单一，且不良反应较大，我国传统中药对糖尿病的治疗历史悠久，无毒副作用，可长期使用。桑叶为桑科植物的干燥叶，自古以来，就有用于“止消渴”，即现代糖尿病的记载。近年来，其降血糖活性作用受到广泛关注和研究。

本次试验探究了桑叶当中有效降糖成分提取方法的优化方案，使降糖成分的提取工作能在降低成本的同时有良好的效果。并能创建胶囊制剂的质量检验标准，实现对桑元止咳类药物的质量控制。

1仪器以及药材

1.1实验仪器

BP21ID型电子天平（德国赛多利斯），DHG一9013A电热恒温鼓风干燥箱上（上海精宏实验设各有限公司），HWS28型电热恒温水浴锅（上海一恒科学仪器有限公司），LabTech紫外分光光度计（北京莱伯泰科仪器有限公司），PHS一3D型DH计（上海精密科学仪器有限公司），EYELAN21001旋转蒸发仪（日本东京理化器械株式会社），台式低速大容量离心机（上海菲恰尔分析仪器有限公司）。

1.2实验药材

雷氏盐(上海晶纯试剂有限公司，批号20140331)；4．羟基哌啶(上海晶纯试剂有限公司，批号L1405027，纯度≥98％)；芦丁(上海晶纯试剂有限公司，批号J143071，纯度≥98％)；葡萄糖(上海晶纯试剂有限公司，批号E1409051，纯度≥98％)；水为去离子水，本医院自制；亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，丙酮，盐酸，乙醇，苯酚，浓硫酸为分析纯，购于天津大茂化学试剂厂。桑叶(生产批号：140501，生产许可证：粤20110100，广东和翔制药有限公司)。

2方法

2.1有效成分提取分析

在提取桑叶当中总降糖成分的阶段中，采用了复合类型的成分提取工艺，并采用了单因素类型的分析方式，对实验分析提取时间因素、环境温度数值、提取阶段乙醇体积分数数值、提取料液比例数值以及提取总次数进行了分析。在最终的分析当中以桑叶当中的生物碱物质提取分数为标准，确定最终的影响因素以及最佳反应数值。在处理数据的阶段中，综合运用BOX类型的响应分析法以及分析软件对实验数据进行分析，进一步完善提取工艺数据。同时在实验分析当中使用ZTCL天然澄清剂对提取出来的桑叶降糖成分进行澄清处，同样通过单一变量实验方式研究最佳的澄清条件。

2.2ZTCl+III天然澄清剂用于桑叶降糖成分提取液的澄清工艺分析

以桑叶生物碱、黄酮和多糖保留率，固形物去除率为指标，进行单因素试验，分别考察澄清剂加入顺序、澄清剂加入量、生药浓度、作用温度、搅拌时间、搅拌速率及水浴保温时间对桑叶提取液除杂效果的影响。

2.3桑元止渴胶囊成型工艺研究

首先考虑口服剂量，以此来确定制粒方式，选择合适的干燥工艺；然后以不影响桑叶多糖含量测定为原则，筛选药用辅料；接着通过胶囊质量检查、制得颗粒吸湿性和流动性研究的结果，确定辅料用量；最后以制粒后的颗粒得率为因变量，辅料比例，润湿剂乙醇浓度和用量为自变量，采用正交试验设计优化制粒工艺条件，确定桑元止渴胶囊制粒工艺中的最佳辅料比例，乙醇浓度和用量。

2.4桑元止渴胶囊质量标准研究

采用薄层色谱法(TLC)以桑叶对照药材和芦丁对照品为对照，对桑元止渴胶囊原料桑叶进行定性鉴别；采用高效液相二级质谱法(HPLC-MS／MS)对桑元止渴胶囊中的主要有效成分脱氧野尻霉素进行定量测定，制定制剂中脱氧野尻霉素的含量限度范围。脱氧野尻霉素定量测定的色谱条件为，色谱柱：AgilentHC-C柱，以水为流动相A，乙腈为流动相B，A：B=IO：90(V：V)，流速为0．4mL／min，柱温为常温；质谱条件为，电喷雾离子源ESI，毛细管电压4000V，正离子模式，干燥气温度350。通过紫外一可见光分光光度计，分别采用苯酚一硫酸法和亚硝酸钠一硝酸铝法对桑元止渴胶囊中的桑叶总多糖和总黄酮进行定量分析，测定制剂中桑叶总多糖和总黄酮的含量限度范围，建立稳定可行的质量标准。

3结果

在但用单一变量研究方式探究提出操作最佳状态的时候，以热回流类型处理方式提取桑叶当中有效降糖成分，以乙醇和水的混合溶液作为有提取剂，提取反应的环境温度为80摄氏度，整个提取过程的时间长度为120分钟，乙醇浓度被设定为百分之65，料液混合比为1：:1的条件下，生物碱物质的有效提取率达到了百分之0.356。

在zTCl+tⅡ天然澄清剂2组分加入顺序先B组分后A组分，澄清剂B组分加入量为10％药液体积，A组分为5％，药液浓度为0．179／mL，作用温度为76"C，搅拌速率为120r／min，搅拌lOmin，80。C水浴保温30min，静置12h的工艺条件下，桑叶生物碱保留率为92．5％，桑叶黄酮保留率为90．2％，桑叶多糖保留率为9I．i％，固形物去除率为26．5％。

4结论

通过单一变量实验分析方式探究了提取桑叶当中生物碱最佳的反应环境温度、提取处理时间长度、物质提取次数以及料液比数值。在确定了各种反应标准数据之后进一步提升了有效成分的提取效果。并以实验数据作为结果，进一步完善了胶囊的制工艺，使制备出来的胶囊具有颗粒大小适度、填装效果均、质量可靠的特点。

参考文献

[1]贺胜.桑叶总降糖活性成分的提取及其胶囊制剂学研究[D].广州中医药大学,2016.

[2]王贺.新疆药桑叶生物碱的提取及不同活性成分降血糖作用的研究[D].塔里木大学,2016.

[3]曾聪彦,李乐愚,梅全喜,等.桑叶降血糖作用研究进展[J].中华中医药学刊,2016(1):192-194.