三乌胶镇痛作用的实验研究

三乌胶镇痛作用的实验研究

汤徐俊

（浙江省金华市武义县第一人民医院，321200）

【中图分类号】Ｒ２８４．１【文献标识码】Ａ【文章编号】１５５０－１８６８（２０１６）０４

摘要：目的探索不同环境温度和醋酸浓度对小鼠扭体反应的影响，寻找最佳的实验温度和醋酸浓度来研究三乌胶的镇痛作用。方法采用醋酸扭体法制备小鼠疼痛模型，采用小鼠醋酸扭体法研究三乌胶的镇痛作用。结果在不同温度，醋酸浓度为1.1%时小鼠扭体最明显，浓度继续增加并不能增加鼠的扭体次数。三乌胶可使醋酸所致小鼠扭体次数明显减少（P<0.05）。结论醋酸扭体法制备疼痛模型最适温度为22℃，醋酸浓度为1.1%。三乌胶具有良好的镇痛作用。

关键词：三乌胶；镇痛作用；醋酸扭体法；小鼠疼痛模型

引言

疼痛是由于痛觉感受器受到刺激而产生兴奋，冲动经传入神经纤维到达大脑某些神经细胞，或中枢通路的某一水平受损时所产生的一种不舒适的感觉[1]。在生活中疼痛常给患者带来生理和心理的折磨。它能改变人的精神心理状态，引起情绪反应。同时会导致机体消化系统、内分泌系统、心血管系统和呼吸系统功能紊乱，降低人们的生活质量[2-3]。因此缓解和减轻疼痛成为现代医学研究者广泛关注的问题。但目前市场上具有镇痛作用的药物多为西药，且副作用多，使许多患者望而止步。探索镇痛疗效好且毒副作用少的中药显得尤为重要[4]。有“云南黑药”之称的三乌胶，主要成份有草乌、川乌、何首乌等。文献报道其具有显著的祛风除湿、活血祛瘀、强筋健骨等治疗和保健作用[5]，但对其镇痛作用的研究较少。本实验采用醋酸扭体法[6]研究其镇痛作用，同时在实验中发现不同温度和醋酸浓度对小鼠扭体疼痛模型有一定的影响，并做了一定的探索。

1材料

1.1试剂与器械：小活络丸为北京同仁堂制药厂生产，批号：091023。三乌胶为云南滇北制药有限公司提供，批号：091120。冰醋酸，购自天津北六化玻采购销售中心，批号：2009-04-30。电子天平，型号SL-202，上海民桥电子仪器厂生产。计数器，绍兴医疗器械厂生产。水银温度计，上海医用仪表厂生产。

1.2实验动物：ICR小鼠，♀♂各半，l8-22g，由温州医学院实验动物中心提供

2方法与结果

2.1不同浓度的醋酸对小鼠扭体反应的影响

取ICR小鼠40只，♀♂各半，体重18-22g，随机分为A、B、C、D、E组，每组8只。在环境温度为22℃的房间，A、B、C、D、E组分别腹腔注射浓度为0.3%、0.7%、1.1%、1.4%、1.9%的醋酸0.2ml，10min后观察10min内小鼠的扭体次数。结果如表2-1所示。

图2-1不同环境温度下醋酸作用的量-效关系曲线

通过图2-1可知，在环境温度为16℃和22℃时，随着醋酸浓度的增加，效应(扭体次数)也增加，但浓度增加到1.1%时达到最大效应，浓度再增加时效应不增加反而下降；并且发现在环境温度为16℃时，量-效关系曲线出现了双峰现象，扭体反应不稳定。而当环境温度为28℃时，量-效关系曲线左移，最大效应出现在0.7%的浓度点。

2.2.2不同环境温度对小鼠扭体反应出现时间的影响

取ICR小鼠40只，♀♂各半，体重18-22g，随机分为A、B、C、D组，每组10只。各组分别腹腔注射浓度为0.7%、1.1%、1.4%、1.9%的醋酸0.2ml后在环境温度为16℃、22℃、28℃的条件下观察小鼠扭体反应情况。不同温度下小鼠扭体反应出现的时间如表2-2所示。

经t检验，10%和50%三乌胶组、小活络丸组与生理盐水组比较，扭体次数都明显减少，组间差异均具有统计学意义(P<0.05)，即给药组与生理盐水组存在显著性差异，给药组均具有镇痛作用。10%三乌胶组、50%三乌胶组分别与阳性对照组(小活络丸组)进行t检验，均具有统计学意义(P<0.05)，显示各三乌胶组的镇痛作用较小活络组好。而10%三乌胶组与50%三乌胶组进行t检验，无统计学意义(P>0.05)。实验结果表明，三乌胶可明显抑制小鼠扭体反应，具有良好的镇痛作用，但浓度10%或50%对镇痛效果的影响不大。

3统计方法

实验数据结果以(±s)表示，实验结果采用配对样本t检验[8]。

4讨论

通过实验证实，醋酸浓度和环境温度影响着小鼠扭体反应的出现时间和扭体次数。当醋酸浓度为0.3%时，不出现扭体反应；在0.3%-1.1%的范围内，随着醋酸浓度的增加小鼠扭体反应次数也随之增加，当浓度达到1.1%时，再增加醋酸的浓度小鼠扭体反应次数也不增加。当醋酸浓度为1.9%时，小鼠活动减少，甚至出现小鼠在观察时间内死亡的现象，提示醋酸浓度太高。

当环境温度为16℃和22℃时，小鼠扭体反应的最大效应浓度为1.1%；而当环境温度为28℃时小鼠扭体反应的最大效应浓度为0.7%，但此时小鼠扭体活动减少。在醋酸浓度为1.1%的条件下，随着环境温度的增加扭体的显效时间缩短。在同一醋酸刺激浓度下，并非环境温度越高，扭体次数就越多。本实验观察到环境当温度为22℃时、醋酸浓度为1.1%时小鼠扭体反应最典型。同时在此条件下各三乌胶组可明显减少醋酸所致小鼠扭体反应次数，具有良好的镇痛作用，但关于三乌胶镇痛的有效成分及其作用机制尚待进一步研究。

结束语

醋酸小鼠扭体法是化学刺激致痛法，同时也是临床筛选镇痛药的常用模型之一，具有敏感、简便、重复性好的特点。本文通过实验探索扭体反应醋酸浓度的依赖关系，探讨温度对模型的影响。希望能给其他对此模型做进一步研究的学者提供一定的理论依据，以确定更好的实验条件，提高实验的可控制性。三乌胶为云南省名老中医根据家传秘方倾注数十年心血，用多种药物精制而成。三乌胶中川乌、草乌能祛风除湿、温经止痛，何首乌补肝肾、益精血，祛风通络，活血止痛，强筋健骨。本文通过实验证实三乌胶确实具有镇痛作用，但仅采用小鼠醋酸扭体法初步探讨了其镇痛作用。希望有更多的研究者在此基础上采用更多的方法研究三乌胶的镇痛作用及其机制，相信随着研究的深入，三乌胶镇痛研究方面一定会有新的突破，期待三乌胶在临床疾病治疗中发挥更大的作用！

参考文献

[1]姜亚芳,余丽君.病理生理学[M].北京:中国协和医科大学出版社,2001:83.

[2]ZhouZhigang,Zhangsi.ProgressinPainMedicine[J].HenanJournalofSurgery.2003,9(6):46-48.

[3]周志刚,张斯.疼痛医学的新进展[J].河南外科学杂志,2003,9(6):46-48.

[4]胡献国.理气止痛延胡索[J].家庭中医药,2006,(3):68.

[5]温俊,蔡文峰等.三乌胶对大鼠急性“血瘀”证血液流变学影响的实验研究[J].云南中医中药杂志,2002,2(23):32-33.

[6]吴晓松,李晓光,肖飞等.砂仁挥发油中乙酸龙脑酯镇痛抗炎作用的研究口[J].中药材,2004,27(6):438-439.