高效液相法同时测定粉条中10合成着色剂

高效液相法同时测定粉条中10合成着色剂

马玉凤赵芸卉黄文任杰刘彬丁伟

（陕西省汉中市食品药品检验检测中心陕西汉中723000）

【摘要】建立快速的高效液相法同时测定粉条中10种合成着色剂的方法。AgelaC18柱分离，甲醇：乙酸铵（0.02mol/L）为流动相。在0.50～105.00ug/L范围内10种着色剂的质量浓度均与色谱峰面积呈良好的线性。方法检出限为0.01～0.3μg/kg，加标回收率为91.89～102.80%，测定结果的相对标准偏差为2.0%～8%（n=5）。该方法简单、准确、快速，适用于粉条中合成着色剂的定量分析。

【关键词】高效液相色谱；合成着色剂；粉条

【中图分类号】R4【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2016）34-0394-02

Simultaneousdeterminationof10syntheticcolorantsinvermicelliwithhighperformanceliquidchromatography

YufengMa,YunhuiZhao,HuangWen,RenJie,LiuBin,DinWei.Hanzhonginstituteforfoodanddrugcontrol,Hanzhong723000,PRChina

【Abstract】Toestablishasimplemethodforthedeterminationoftenkindsofsyntheticcolorantinvermicelliatthesametime.sampleswereextractedbyultrasonicprocessingwithwater.Samplewereseparatedbyliquidchromatographywithcarbinolandaceticammoniumsolution(0.02mol/L)mixtureasmobilephase.Thecalibrationcurvesshowedagoodlinearitywithcorrelationcoefficientsfrom0.9990to1.0000.Thedetectionlimitwasfrom0.01to0.3μg/kg.Therecoveryofthemethodwasfrom91.89～102.80%,andtherelativestandarddeviation(RSD)wasfrom2.0%～8%（n=5）.Themethodissimple,andaccurate,fast,andcanbeusedtoaccuratedetectionofsyntheticcolorantsinvermicelli.

【Keywords】Highperformanceliquidchromatography(HPLC);Syntheticalcolour;Vermicelli

人工合成着色剂主要以苯、甲苯、萘等化工产品为原料合成，其成本低、色泽鲜艳、着色力强、易溶解，易调色，故常用于食品着色，过多食用会危害人体健康。对于食品中合成着色剂的检测目前国内外合成着色剂的方法主要有HPLC法[1]，UPLC-MS法[1]，毛细管胶束电动色谱法[2]等。本文建立了粉条中10种合成着色剂的高效液相定量方法，缩短了测定时间，提高工作质量和效率，得到满意结果。

1.实验部分

1.1主要仪器与试剂

安捷伦1260型高效液相色谱仪，二极管阵列检测器（DAD）；柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、苋菜红、新红、赤藓红、靛蓝、亮蓝、喹啉黄标准品为Dr.EhrenstorferGmbH（纯度为87.0%～93.1%）；甲醇为色谱纯试剂，其他试剂均为分析纯试剂，所有水为去离子水。

1.2试验方法

1.2.1合成着色剂标准储备液的配制分别配制0.5mg/mL的柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、苋菜红、新红、赤藓红、靛蓝、亮蓝、喹啉黄混合标准储备液，于冰箱中-4℃保存。

1.2.2样品处理方法取约5g粉碎后的粉条样品，于50mL的离心管中，加水定容至刻度。超声提取，涡旋，离心后过0.22μm滤膜，进行HPLC分析。

1.2.3液相色谱分离条件色谱柱AgelaC18柱（5μm，4.6mm×250mm）流动相：甲醇：水（0.02mol/L乙酸铵20：80）梯度洗脱；流速1.0mL/min；进样量10μL；柱温30℃。采用多通道检测，检测波长：柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、苋菜红、新红、赤藓红、靛蓝、亮蓝、喹啉黄分别230、254、428、484、509、531、611nm。

2.结果与分析

2.1着色剂的工作曲线

柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、苋菜红、新红、赤藓红、靛蓝、亮蓝、喹啉黄回归方程分别为Y1=5.05E-10X、Y2=3.98E-10X、Y3=3.15E-10X、Y4=7.03E-10X、Y5=4.5E-10X、Y6=7.21E-10X、Y7=5.38E-10X、Y8=6.32E-10X、Y9=2.87E-10X和Y10=5.66E-10X相关系数R2分别为1.0000、1.0000、0.9999、0.9998、0.9991、0.9996、0.9999、0.9992、0.9995和0.9990。

2.2保留时间

经测定标准试样柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、苋菜红、新红、赤藓红、靛蓝、亮蓝、喹啉黄的HPLC色谱图见图1。

图110种合成着色剂标准试样色谱图

Figure1HPLCchromatographyof10syntheticcolorantstandards

1：柠檬黄；2：新红；3：苋菜红；4：靛蓝；5：胭脂红；6：日落黄；7：诱惑红；8：亮蓝；9：喹啉黄；10：赤藓红

2.3重复性及回收率试验

将0.005mg/mL的柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、苋菜红、新红、赤藓红、靛蓝、亮蓝、喹啉黄重复进样(n=5)，其结果良好，该检测方法重复性良好。柠檬黄、日落黄、胭脂红、诱惑红、苋菜红、新红、赤藓红、靛蓝、亮蓝、喹啉黄的标准平均回收率分别为100.02±1.05%、99.20±1.80%、91.89±3.12%、102.80±2.23%、94.56±2.65%。

3.讨论

3.1波长的选择

国家标准GB/T5009.35-2003《食品中人工合成着色剂的测定方法》[3]中方法采用254nm测定不同种类着色剂，但灵敏度不高，分离度不好。本方法在确定最佳梯度后，对检测波长进行了优化，对不同着色剂采用多波长检测，大大地提高了各种着色剂的灵敏度和特异性。

3.2流动相的选择

本项实验目标是同时测定10种合成着色剂，必须采用梯度洗脱。以甲醇+0.02mol/L乙酸铵为流动相梯度洗脱，能将10种着色剂进行有效分离，且峰形良好，保留时间稳定。

4.结论

本研究建立梯度洗脱，多波长同时测定粉条中10种合成着色剂，处理方法简单、线性范围好、灵敏度高、准确度高、受杂质峰干扰小、分离效果好、测定结果稳定可靠，能满足食品中合成着色剂的检测要求，具有实际应用价值。

【参考文献】

[1]KUCHARSKAM，GRABKAJ.Areviewofchromatographicmethodsfordeterminationofsyntheticfooddyes[J].Talanta，2010，80:1045-1051.

[2]THOMPSONCO，TRENERRYVC.Determinationofsyntheticcoloursinconfectioneryandcordialsbymicellarelectrokineticcapillarychromatography[J].JChromatogrA，1995，704:195-201.

[3]中华人民共和国卫生部.GB/T5009.35—2003食品中人工合成着色剂的测定方法[S].北京:中国标准出版社，2004.