肝癌晚期患者氩氦刀治疗手术前后外周血TBNK表达差异相关研究

肝癌晚期患者氩氦刀治疗手术前后外周血TBNK表达差异相关研究

李前进刘兴贵

贵阳医学院贵州贵阳550004

摘要：目的：本研究旨在通过对T淋巴细胞亚群的检测，从而对肝脏恶性肿瘤患者氩氦刀手术治疗前后细胞免疫功能的差别进行了解，进一步探讨T淋巴细胞亚群在肿瘤患者和正常患者之间的表达差异。方法：对我院2012年8月至2014年9月收治的20例肝脏恶性肿瘤患者进行氩氦刀手术治疗，通过氩氦靶向治疗肿瘤时，肿瘤组织细胞反复冻融，细胞破裂，细胞膜融解，从而促使细胞内和处于遮蔽状态的抗原释放。肿瘤细胞的坏死，使得肿瘤正常分泌的抗原停止分泌，肿瘤免疫抑制状态解除。结果：肝癌晚期患者经氩氦刀治疗手术后T/B/NK中T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞亚群、NK细胞亚群较术前有所增加。患者术后免疫功能较术前增强，3年生存时间相对于常规肝切除手术有一定延长。结论：氩氦刀手术治疗是一种对肝癌晚期患者的有效治疗手段。

关键词：肝癌晚期患者；氩氦刀治疗手术；T淋巴细胞亚群

引言

目前越来越多的研究表明，T淋巴细胞亚群在各种临床疾病如自身免疫性疾病、免疫缺陷性疾病、变态反应性疾病、再生障碍性贫血、病毒感染、恶性肿瘤等都有异常改变，在各种疾病的发生，发展过程中不同的T淋巴细胞又产生着极其重要的影响。T淋巴细胞亚群的检测对控制这些疾病的发生、发展、了解发病机制、指导临床治疗都有极其重要的理论意义和临床意义，它已成为临床检验的一项重要指标。对此，笔者结合相关资料和实践分析结果展开以下论述：

1研究资料和方法

1.1研究对象

按照下述标准，选取我院2012年8月至2014年9月收治的20例肝脏恶性肿瘤患者：

（1）患者年龄30-75岁；

（2）知情并自愿行氩氦刀手术治疗；

（3）无合并严重心、肺、肝功能疾患，无凝血机制障碍，非结核病活动期；

（4）非怀孕期及哺乳期妇女。

其中，男性患者13例，女性患者7例，年龄段在35-74岁，平均年龄为58.7岁，皆属于自愿施行氩氦刀手术治疗，没有心、肺、肝功能疾患合并严重的患者，凝血机制良好，不处在结核病活动期，没有怀孕期及哺乳期妇女。

1.2研究方法

1.2.1诊断标准

利用各种单克隆抗体与淋巴细胞表面的抗原结合，再配合多色荧光染料，通过流式细胞仪检测分析即可以把各种不同功能的淋巴亚群区分开来，进而得到各亚群的相对比例。我们的检测指标包括CD3+细胞、CD3+CD4+辅助性T细胞、CD3+CD8+抑制性T细胞、CD19+B淋巴细胞、CD3-CD16+CD56+NK细胞、CD25、TH/S（CD4/CD8）。在肿瘤病人外周血中T淋巴细胞亚群数值都有异常，其特征是患者体内CD3+细胞、CD4+细胞明显减少，而CD8+细胞明显增加，CD4+/CD8+比值显著降低，说明肿瘤病人的细胞免疫功能处于免疫抑制状态，患者对识别和杀伤突变细胞的能力下降，形成了肿瘤的生长转移。

1.2.2观察指标

此次研究当中，所观察的指标如下：

T淋巴细胞亚群：CD3（T）、CD4（Th）、CD8（Tc+Ts）

B淋巴细胞亚群：CD19（B）

NK细胞亚群：CD16+56（NK）

1.2.3手术治疗

在治疗期间，对肝癌晚期患者采用氩氦刀的手术治疗方式，通过氩氦靶向治疗肿瘤时，肿瘤组织细胞反复冻融，细胞破裂，细胞膜融解，从而促使细胞内和处于遮蔽状态的抗原释放。肿瘤细胞的坏死，使得肿瘤正常分泌的抗原停止分泌，从而使得肿瘤免疫抑制状态得到解除。

1.2.4统计学分析：

运用SPSS20.0软件对T/B/NK各指标数据进行统计分析。并采用t检验和方差检验计量资料，当t检验的检验水平为0.01，方差检验标准α=0.01，P<0.05时具有统计学意义，0.01＜P＜0.05表示差异性显著，P＜0.01表示差异性极显著。

1.2.5随访调查

对氩氦刀术后患者随访：术后每3个月对患者随访一次T/B/NK指标，经常性的展开对被治疗人员的观察，随时进行上门监测，做好相应记录，在相应的时间内解答病患疑惑。

2结果

通过对所选择患者进行手术前及手术后的外周血相关指标检测，检测结果的各项指标以平均值计入。同时，对20例患者治疗前后的各项指标逐项进行配对样本T检验，结果显示CD4（Th）、CD8（Tc+Ts）、CD4/8等指标存在显著性差异。如下表所示：

注：*表示指标治疗前后存在显著性差异，p>0.01.

另外，从指标均值结果来看，肝癌晚期患者经氩氦刀治疗手术后T/B/NK中T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞亚群、NK细胞亚群较术前有所增加。

并且，肝癌晚期患者在手之术后，其免疫功能也得到了增强，三年生存时间相对于常规肝切除手术有了一定的延长，这也就说明了利用氩氦刀手术治疗肝癌晚期患者是一种有效的治疗手段。

3讨论

笔者查阅大量的相关资料，得知许多的恶性肿瘤患者，比如肺癌、结肠癌、卵巢癌等的外周血和肿瘤局部，Treg细胞比例增高，且数量与肿瘤进展程度同预后呈负相关。在此次研究当中，Ⅲ期肝癌患者外周血Treg细胞占CD4+T细胞比例同Ⅱ期患者相比要高的多（P<0.05），说明肝癌患者Treg细胞介导的免疫耐受同肿瘤生长有着十分密切的关系，可能直接参与其进展过程，所以将外周血Treg细胞比例作为判定肝癌预后的重要指标之一是可行的。

与此同时，相关研究表明，抗肿瘤效果的增强可以利用各种途径来对Treg细胞或下调其活性而实现。在运用氩氦冷冻治疗之后，Treg细胞比例下降较少，T淋巴细胞亚群分布异常也在一定的程度上得到了改善，所以，我们可以以此为根据，将联合免疫治疗进行结合，从而使得Treg细胞功能进一步的得到降低，最终增强机体抗肿瘤免疫反应，进而使得一种全新的肿瘤综合治疗模式得以实现。

4结语

通过上述研究分析，利用氩氦靶向治疗肿瘤时，肿瘤组织细胞反复冻融，细胞破裂，细胞膜融解，细胞内和处于遮蔽状态的抗原将会得到释放。肿瘤细胞的坏死，也会使得肿瘤正常分泌的抗原停止分泌，肿瘤免疫抑制状态解除。并在对T淋巴细胞亚群的检测之后，我们了解到肝脏恶性肿瘤患者在运用氩氦刀手术治疗之后细胞免疫功能有所增强，术后T/B/NK中T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞亚群、NK细胞亚群较术前有所增加，三年生存时间相对于常规肝切除手术有了一定的延长，因此可以表明氩氦刀手术治疗是一种对肝癌晚期患者的有效治疗手段，将其广泛运用到临床医学上将具有重大意义。

参考文献

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作者简介：李前进（1980-03）男贵州龙里县人住院医师主要从事肝癌晚期患者氩氦刀治疗手术前后外周血TBNK表达差异相关研究。