化学发光法检测血清C肽的性能验证

化学发光法检测血清C肽的性能验证

何穗冉欧

（湖南省湘潭市中心医院检验科湖南湘潭411100）

摘要：目的对新产业公司MAGLUMI-4000全自动化学发光仪检测血清C肽进行性能验证。方法用EP15-A2方案进行精密度验证；直接引用临检中心室间质评结果评价正确度；EP6-A方案评价线性范围；随机选取20表观键康个体进行参考区间验证。结果两浓度质控品均S批内≤σ批内，S总≤σ总，精密度与厂商声明一致；临检中心室间质评数据累积性能成功，正确度可接受；血清C肽检测线性范围0.12－19.60ng/ml；20份空腹血清C肽标本检测值均在0.4－3.6ng/ml范围内。结论MAGLUMI-4000全自动化学发光仪检测血清C肽的性能满意，该检测项目可满足临床需求。

关键词：C肽；化学发光；性能验证

根据《医疗机构临床实验室管理办法》和《三级综合医院评审标准实施细则》，实验室应对所使用检测系统进行有效性的评估，包括正确度、精密度、分析测量范围、参考范围等项目，评估合格才能将之应用于临床工作。本室去年引进了新产业公司MAGLUMI-4000全自动化学发光仪进行血清C肽检测，现将新产业公司MAGLUMI-4000全自动生化学发光仪检测血清C肽的性能验证结果报告如下。

1材料与方法

1.1材料

线性验证采用的接近检测上限（H）和检测下限（L）标本来自本室日常检测标本。参考区间验证20名表观健康个体来自本院健康体检者，男13人，女7人，年龄37.3±11.5岁。

1.2仪器与试剂

仪器为深圳新产业公司MAGLUMI-4000全自动化学发光仪，试剂、质控品及标准品均为新产业公司配套产品，中国卫生计生委临检中心提供的2017年第一次内分泌室间质评质控品201711和201713，201711为较低浓度样品，201713为较高浓度样品。

1.3方法

1.3.1不精密度评价按EP15-A2精密度验证方案操作[1]，实验周期5天，每天测一批，对两浓度质控品分别重复测定3次，总共测定次数为3×5次。如当天质控失控，则重新检测。按EP15-A2文件要求，根据所有结果的均值Xdi、一天中所有结果的均值即批均值Xd及厂商提供的批内CV和批间CV，计算实验室标准差S批内、S总和厂商声明标准σ批内、σ总[2]。如S批内＜σ批内，S总＜σ总，则精密度与厂商声明一致，验证通过。

1.3.2正确度评价直按引用中国卫生与计划生育委员会临床检验中心室间质评数据进行验证，三次该项目得分高于80，累积性能解释为成功，则可认为正确度可接受。

1.3.3线性范围评价接近检测上限（H）和检测下限（L）标本各一份，按5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H比例混合成6份标本，每份标本检测双份，取平均值作为实测值，与预期值比较，计算回归方程Y=bX+a，如果相关系数r2≥0.95，b在0.97-1.03范围内，a接近于0，则判断该测定方法在实验所涉及的浓度范围内为线性[3]。

1.3.4参考区间验证随机抽取本院健康体检者20人，20个体各检测1次，不少于90%的检测结果在参考区间内，验证通过。若验证未通过，首先确认本次实验数据是否正确有效，如数据有效，可加采用增加样本量的方法。

1.4统计学分析采的用SPSS19.0进行数据处理及统计学分析。

2结果

2.1不精密度评价两浓度质控品均值和批均值见表1。厂商提供批内CV≤5%，批间CV≤10%，计算得低浓度质控S批内为0.09，σ批内为0.11，S总为0.09，σ总为0.22，高浓度质控S批内为0.28，σ批内为0.58，S总为0.28，σ总为1.15。两浓度质控品均S批内≤σ批内，S总≤σ总，精密度与厂商声明一致，验证通过。

2.4参考区间验证

20份空腹血清C肽标本检测值均在0.4－3.6ng/ml范围内，厂家给定参考区间为0.3-3.73ng/ml，参考区间验证通过。

3结果

C肽与胰岛素等摩尔分泌，可反映机体胰岛β细胞的分泌功能，对糖尿病患者的分型和低血糖症的鉴别的诊断意义。本室新采用新产业公司MAGLUMI-4000全自动化学发光仪进行血清C肽检测，操作较原使用的方法方便快捷。但根据《医疗机构临床实验室管理办法》和《三级综合医院评审标准实施细则》，对新应用的检测系统应进行精密度、正确度、线性范围和参考区间范围等几方面的评估验证，判断是否有效的应用于临床。

精密度是指在规定条件下获得独立测量结果之间的相近程度，是反应仪器性能的重要指标，因EP5文件验证检测方法的精密度周期较长，操作复杂，且本次实验采用新产业仪器及配套试剂标准品及质控品，故采用EP15-A2方案来进行精密度验证。验证所用双浓度标本均S批内≤σ批内，S总≤σ总，精密度与厂商声明一致，验证通过。

正确度评价直接引用2016年到2017年上半年三次中国卫生与计划生育委员会临床检验中心室间质评C肽室内检测结果为证，本室用C肽检测的正确度为可接受。

线性范围验证采用的为EP6-A方案，采用高低浓度样品按比例混合的方法，制备了6个浓度水平样品，本次验证线性范围0.12－19.60ng/ml，接近厂家提供的0.1-20.0ng/ml。

参考区间验证全部20个标本检测值均在0.4－3.6ng/ml，均在厂家规定的0.3-3.73ng/ml范围内，验证通过。说明该参考区是适用于本实验室。

本次验证新产业公司MAGLUMI-4000全自动化学发光仪检测血清C肽的精密度、正确度、线性范围、参考区间等性能均与厂商提供的资料和说明一致，该检测项目可满足临床需求，为临床提供准确可靠的诊断依据。

参考文献

[1]ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute－UserverificationofperformanceforprecisionandtruenesEP15-A2[S].Wayne，PA.

[2]张秀明，温冬梅，袁勇.临床生物化学检验管理与标准操作规程[M]，北京：人民军医出版社，2010：59-61.

[3]ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute.EP6-A2Approvedguideline-secondedition：evaluationofquantitiativemeasurementmethods[S].Wayne，PA，USA：CLSI，2003.