比较载杆玻璃化冷冻法与程序冷冻法对人早期胚胎冷冻复苏的效果

比较载杆玻璃化冷冻法与程序冷冻法对人早期胚胎冷冻复苏的效果

张俊

河南省人民医院生殖中心河南郑州450000

【摘要】目的：探究载杆玻璃化冷冻法与程序冷冻法对人早期胚胎冷冻复苏的效果。方法：在本次研究中选择载杆玻璃化冷冻复苏100个周期，程序冷冻90个周期，分别为甲组和乙组，对胚胎复苏后的复苏率、临床妊娠情况和种植率等指标进行分析。结果：甲组扩张囊胚以及孵出囊胚的比例分别为80%、68%，乙组扩张囊胚以及孵出囊胚的比例分别为56.7%、27.8%，各项数据比较差异明显，具有统计学意义（p＜0.05）。结论：载杆玻璃化冷冻法是当前行之有效的胚胎冷冻方式，其优势显著，能有效提高胚胎率，值得临床推广和应用。

【关键词】载杆玻璃化冷冻；程序冷冻；早期胚胎；冷冻复苏

【中图分类号】R321-33【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-10-026-01

近些年来我国医疗卫生技术取得了突出的成就，对医院生殖科的各项工作有了更高的要求。以冷冻技术为主，当前应用比较广泛的技术以载杆玻璃化冷冻法与程序冷冻法为主。载杆玻璃化冷冻法操作技术操作流程比较简单，时间短，整体效果更明显。为了探究载杆玻璃化冷冻法与程序冷冻法对人早期胚胎冷冻复苏的效果。方法：在本次研究中选择载杆玻璃化冷冻复苏100个周期，程序冷冻90个周期，分别为甲组和乙组，对胚胎复苏后的复苏率、临床妊娠情况和种植率等指标进行分析。详细如下：

1.资料与方法

1.1一般资料

在本次研究中选择载杆玻璃化冷冻复苏100个周期，程序冷冻90个周期，分别为甲组和乙组。甲组患者年龄在22-37岁，平均年龄（32.5±2.5）岁。乙组患者年龄在20-37岁，平均年龄（31.8±3.5）岁。两组患者在常规性资料方面无差异性，不具有统计学意义（p＞0.05）。取卵周期采用促性腺激素释放激素激动剂和重组人卵泡刺激素。如果卵泡直径达18mm时则进行肌肉注射人绒毛膜，促进性腺激素1000u，34h后取出，根据患者的实际情况采用常规体外受精或卵胞浆内单精子显微注射受精，取出在24h后观察受精情况，最后对胚胎进行冷冻保存。

1.2方法

在本次研究中甲组应用玻璃化冻法，在常温下，降胚胎移送到20mg/mL的血清白蛋白溶液中，平衡1min左右，将其送到7.5%乙二醇、7.5%二甲基亚砜平衡5min左右，最后将其送到含有15%一二穿的血清蛋白中。全部操作结束后按照要求进行保存[1]。

乙组应用程序冷冻法，在常温下将胚胎送到1.5mol/L的丙二醇和12mg/mL中，平衡10min左右，将其移送到含有丙二醇、蔗糖的溶液中。将麦管放入程序冷冻仪中，取出后进行保存。

1.3胚胎复苏

在胚胎复苏中，分为不同的类型，包括：子宫内膜的准备、玻璃化法冷冻囊胚复苏、程序冷冻法和胚胎移植法等。针对不同类型的特殊性，在实践过程中需要按照流程要求进行落实[2]。

1.4统计学方法

在本次研究中采用SPSS24.0统计学软件对本次研究所得数据进行统计学分析，计量资料采用t检验，计数资料采用X2检验，当P＜0.05说明比较结果存在明显的差异性，具有统计学意义。

2.结果

在本次研究中，甲组扩张囊胚以及孵出囊胚的比例分别为80%、68%，乙组扩张囊胚以及孵出囊胚的比例分别为56.7%、27.8%，两组各项数据比较差异明显，具有统计学意义（p＜0.05），详细如表一：

3.讨论

近些年来我国医疗卫生技术取得了突出的进步，基于生殖技术的特殊性，需要从实际情况入手，对衍生技术形式进行分析，将其落实到实践中。当前应用比较广泛的是玻璃化冷冻法和程序化冷冻，针对不同方式的特殊性，在实践阶段需要掌握不同方式的属性，结合具体要求进行落实[3]。

程序化冷冻是应用比较早的一种冷冻方案，通过采用程序冷冻仪实现细胞脱水，但是很难杜绝出现损伤的现象。玻璃化冷冻方式采用的迅速降温形式，能有效抑制细胞内冰晶形成，起到明显的保护作用。但是由于玻璃化方式需要采用浓度比较高的保护剂，因此会对胚胎造成影响，需要对发育机制进行分析，按照要求进行落实。在冷冻过程中，胚胎会出现多种损伤现象，考虑到形成机制的特殊性，在形成阶段要杜绝出现不良影响，玻璃化冷冻一方面能起到保护作用，其次温度逐渐下降，很难形成冰晶，能减少胚胎以及细胞机械损伤现象，整体优势显著。在不同胚胎体确定阶段，由于囊胚腔不断扩大，复苏存活率下降。近些年来随着囊胚腔人工皱缩的逐渐应用，程序化冷冻无论是卵裂球或者完整的胚胎，其发育潜能是相同的，要按照实际情况对其进行冷冻操作。

甲组扩张囊胚以及孵出囊胚的比例分别为80%、68%，乙组扩张囊胚以及孵出囊胚的比例分别为56.7%、27.8%，两组各项数据比较差异明显，具有统计学意义（p＜0.05）。说明玻璃化冻法应用范围比较广，用于人类卵裂期胚胎和囊胚保存中有重要的作用，对胚胎无明显影响。

综上所述，玻璃化冻法在人早期胚胎冷冻复苏中优势显著，不良反应小，值得推广和应用。

参考文献

[1]李雅芳,赵焕,罗琛等.玻璃化冷冻与慢速程序冷冻对人ICSI的D3胚胎的效果观察[J].广东医学,2010,04（12）:464-465.

[2]赵庆红,杨菁,尹太郎等.玻璃化冷冻法和程序化冷冻法对人卵裂期胚胎冷冻复苏效果的比较[J].生殖与避孕,2010,09（01）:592-595.

[3]郑群,程兆俊,邹立波等.玻璃化冷冻法和程序化冷冻法对人卵裂期胚胎冷冻复苏效果及临床结局的比较[J].中国优生与遗传杂志,2016,01（12）:118-119+97.