膀胱肿瘤患者血清胰岛素样生长因子(IGF-1)的测定及临床意义

膀胱肿瘤患者血清胰岛素样生长因子(IGF-1)的测定及临床意义

南晓松石银川王少锋

南晓松石银川王少锋（中国人民解放军第91中心医院泌尿外科454003）

【摘要】目的探讨膀胱肿瘤患者术前、术后血清中胰岛素样生长因子(IGF-1)的水平及意义。方法采用双抗体夹心ELISA法对48例膀胱肿瘤患者及50例正常人血清中IGF-1的检测，了解膀胱肿瘤患者在术前、术后血清中IGF-1的水平变化，以及不同病理分级和不同浸润深度膀胱肿瘤患者血清中IGF-1水平的异同。结果术前、术后第7天，膀胱肿瘤患者血清中IGF-1值明显高于正常人;术后膀胱肿瘤患者血清中的IGF-1的水平明显低于术前水平；随着病理分级的升高或浸润深度的增加，膀胱肿瘤患者血清中IGF-1的水平也升高。结论监测膀胱肿瘤患者血清中的IGF-1的水平的变化，对预测肿瘤恶性潜能和肿瘤的发展情况，以及了解肿瘤的治疗效果具有重要的临床意义。

【关键词】胰岛素样生长因子-1膀胱肿瘤

胰岛素样生长因子(IGFs)是1957年Salmon和Daughaday在研究生长激素作用时首次发现血清中有胰岛素样作用的促生长因子,即胰岛素样生长因子1（IGF-1）。近年来的研究发现:IGF-1还是一种自泌或旁泌的癌基因,与肿瘤的关系十分密切,具有刺激细胞分化以及DNA合成和转录的能力。多种类型的肿瘤细胞可异常表达IGF-1,并通过内生性IGF-1的合成促进自身的生长[1-3]；同时IGF-1是生长调节素的一种,可促进细胞周期的进行,通过提高mRNA的表达或通过提高强力生长因子如VEGFmRNA等的稳定性来发挥其丝裂原的作用,还可以通过丝裂原缴活蛋白激酶(MAPK)通路和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)通路抑制细胞凋亡[4],在肿瘤细胞的增殖,存活及迁移中起到了重要促进作用[5]。Parker等[6,7]研究表明IGF-1R表达与肾透明细胞癌病人的预后有关。但是目前国内在膀胱肿瘤中的表达报道少见，与膀胱肿瘤的病理分级、预后及复发的关系少见报道。

因此本实验通过检测膀胱肿瘤患者血清中不同时间的IGF-1水平，根据其不同的差异来推测VEGF在膀胱肿瘤血清中的水平情况及其与膀胱肿瘤的不同病理分级、临床分期的关系，为探讨膀胱肿瘤的诊断和预后做相关性研究。

1材料和方法

1.1一般资料48例患者均经病理诊断,确诊为膀胱肿瘤。男27例，女21例；年龄48-82岁，平均67岁。WHO病理分级G1:15例,G2:18例,G3:15例,UICC分期浅表性(Tis-T1)23例,浸润性(T2-T4)25例;33例经尿道肿瘤电切术，15例行经膀胱部分切除术。50名健康体检者,男35名,女15名;年龄35岁-65岁,平均42岁。

1.2标本收集所有患者于入院后治疗前空腹抽取静脉血2mL以及术后第7天空腹抽取静脉血2mL；健康体检者也于空腹时抽取静脉血2mL，用EDTA抗凝，3000r／min离心10min，分离血清存放于-20℃待用。

1.3实验步骤①浓缩洗涤液(20X)用双蒸馏水稀释成1X(至300ml);②试剂盒应平衡至室温(20-25℃)再试验;③建立标准曲线：设标准孔6孔，每孔中各加入不同浓度(0ug/l50ug/l100ug/l200ug/l500ug/l1000ug/l)标准品50ul;④加入50ul已稀释血清于反应孔中;⑤每孔加入100ul酶联物,轻轻混匀30秒.室温温育60分钟;⑥洗板:甩尽板内液体,用洗涤液洗涤反应板(每孔内加入350ul洗涤液),并除去水滴(在厚叠吸水纸上拍干);这样反复洗涤5次。

1.4统计学处理本检验采用sPSS统计软件包进行统计处理，数据以X±s表示，两个独立样本t检验,配对检验,单因素方差分析。

2结果

2.1病人组术前血清中IGF-1水平显著高于正常组水平(P<0.01),提示IGF-1在膀胱肿瘤中的高水平表达；术后第7天病人组血清中的IGF-1水平显著低于术前水平（P＜0.01）,提示手术治疗可以影响病人组血清中的IGF-1的水平（见表2.1）。

表2.1病人组与对照组血清中的IGF-1水平的比较

2.2病人组术前IGF-1水平G1与G2,G1与G3之间有显著差异,G2与G3之间有差别,但是无统计意义;病人组术后IGF-1水平G1与G2,G1与G3，G2与G3之间有显著差异;病人组术前、术后IGF-1水平G1之间无显著差异，术前、术后G2、G3之间有显著差异；提示随着肿瘤病理分级的升高，病人组术前或术后血清中IGF-1的水平也随着升高。（见表2.2）

表2.2病人组术前.后血清IGF-1水平与肿瘤分级的关系

两两比较(Q检验)结果：G1与G2：P<0.01P<0.05

G1与G3：P<0.01P<0.05

G2与G3：P>0.05P<0.05

2.3病人组中浸润性术前或术后血清中的IGF-1水平明显高于浅表性者，相关分析表明，肿瘤浸润深度与病人组血清中的IGF-1值之间有正相关关系；病人组中浸润性术后血清中的IGF-1水平显著低于术前水平，病人组中浅表性术后血清中的IGF-1水平也显著低于术前水平。（见表2.3）

表2.3病人组术前、后血清IGF-1水平与肿瘤浸润深度的关系

3讨论

在泌尿系统肿瘤发病率中，膀胱肿瘤占第一位,约为总数的75%。早期治疗效果较好，当其发生浸润、转移后，病人预后差，死亡率高，临床治疗非常棘手。以前临床上多根据肿瘤的TNM分期推测其预后，现在认为膀胱肿瘤在临床上有许多预后因子，新发现的分子肿瘤标记物为我们指出了新的研究途径。

由IGF-1诱导的信号转导通路在肿瘤形成过程中起着重要作用，IGF-1及IGF-1R表达上调与乳腺癌、结肠癌、Ewing肉瘤和前列腺癌等发生、发展关系密切[8-10]。Zhao等[11]报道了膀胱癌患者血清中IGF-1水平升高，而Shariat等[12]报道膀胱癌患者血清中IGF-1水平并没有显著高于对照组。本组结果显示病人组术前血清中IGF-1水平显著高于正常组水平(P<0.01)，并且术后第7天病人组血清中的IGF-1水平显著低于术前水平（P＜0.01）,提示IGF-1在膀胱肿瘤中的高水平表达，血清中的IGF-1可能主要来自肿瘤组织；IGF-1对术后肿瘤的预后和复发有一定的参考。本组结果显示：病人组术前G1与G2,G1与G3之间有显著差异（P<0.05）,G2与G3之间有差别,但是无统计意义（P>0.05）;病人组术后G1与G2,G1与G3，G2与G3之间有显著差异（P<0.05）;病人组术前、术后G1之间无显著差异（P>0.05），术前、术后G2、G3之间有显著差异（P<0.05），提示检测膀胱肿瘤患者术前血清中VEGF水平对筛选中晚期膀胱肿瘤患者有参考价值。

本实验结果显示，血清中的IGF-1水平显著高于正常对照组（P<0.01）,提示膀胱癌病人血清中的IGF-1主要来源于肿瘤组织，从现有研究结果看：IGF-1与包括膀胱肿瘤在内的多种肿瘤的发生发展、浸润转移密切相关，这样IGF-1将有可能作为临床上的一个新指标来预测高危人群，作出早期诊断，并可通过某种途径改变膀胱肿瘤患者体内IGF-1的表达水平，来达到治疗肿瘤的目的，成为临床上肿瘤治疗的新途径。

参考文献

[1]KappleCC,MariaC,StevenH,etal.Humanosteosarcomacelllinesaredependentoninsulin-likegrowthfactor1forinvitrogrowth.cancerRes,1994,54:2803.

[2]BergmannU,FunatomiH,YokoyamaM,etal.Insulinlikegrowthfactor1overexpressioninhumanpancreaticcancer,Evidenceforautocrineandparacrineroles.CancerRes,1995,55:2007-2011.

[3]AtoSD,bellRS,CaraD,etal.Insulin-likegrowthfactor1(IGF-1)receptors,IGF-1andIGF-2areexpressedinprimaryhumansarcomas.CancerRes,1995,55:129-134.

[4]YASIRH,IBRAHIM,DOUGLSY,etal.Insulin-likegrowthfactor1andcancerrisk[J].GrowthHormIGFRes,2004,14(10);261-269.

[5]GOADDL,RUBINJ,WANGH,etal.EnhancedexpressionofvascularendothelialgrowthfactorinhumansaOS-2osteoblast-likecellsandmurineosteoblastsinducedbyinsulin-likegrowthfactor1[J].Endocrinology.1996,137(2):2262-2271.

[6]ParkerAS，ChevilleJC，JanneyCA，eta1．Highexpressionlevelsofinsulin-likegrowthfactor—Ireceptorpredictpoorsurvivalamongwomenwithclear．cellrenalcellcarcinoma[J]．HumPathol，2002，33(8)：801—805．

[7]ParkerAS，ChevilleJC，LohseC，eta1．Expressionofinsulin-likegrowthfactor-Ireceptorandsurvivalinpatientswithclearcellrenalcellcarcinoma[J]．JUrol，2003，170(2pt1)：420-424．

[8]王嵩,夏同礼,张智清,等.膀胱癌组织中血管内皮生长因子的表达及与血管生成的关系[J].中华外科杂志,200,1:34-36.

[9]KatherineLT,HelenTKevinC,etal.TheexpressionanddistributionofthehypoxiainduciblefactorsHIF-1alphaandHIF-2alphainnomalhumantissues,cancers,andtumorassociatedmacrophages[J].AmJPathol,2000,157:411-421.

[10]deAlavaE,PanizoA,AntonescuCR,etal.AssociationofEWS-FLI1fusionwithlowerproliferativerateinEwing’ssarcoma[J].AmJPathol,2000,156(3):849-855.

[11]ZumkellerW,WestphalM.TheIGF/IGFBPsysteminCNSmalignancy[J].MolPathol,2001,54(40:227-229.

[12]ShariatSF，KimJ，NguyenC，eta1．CorrelationofpreoperativelevelsofIGF--IandIGFBP-3withpathologicparametersandclinicaloutcomeinpatientswithbladdercancer[J]．Urology，2003．61(21：359-364.