丹参胶囊质量标准研究

丹参胶囊质量标准研究

曹奎

广西玉林北流市城南街道社区卫生服务中心537400

摘要：目的：建立丹参胶囊的质量标准。方法：对于丹参胶囊的内容物，采用TLC鉴别法开展丹参酮ⅡA定性鉴别；对于丹参胶囊中的五种主要成分，采用HPLC法测定其含量。结果：采用TLC鉴别法进行丹参酮ⅡA定性鉴别，发现其分离度比较好；采用HPLC法测定丹参胶囊五种主要成分的含量，即丹参酮ⅡA、丹酚酸B、隐丹参酮、原儿茶酚以及丹参素，发现其线性范围分别为2.05至40.92、1.503至60.102、1.482至59.29、0.617至24.696、11.49至459.58微克每毫升，且有良好的线性关系，r=0.999。结论：建立丹参胶囊的检查、鉴别、含量测定标准，可重复应用、简便、准确性高，可用于控制丹参胶囊的质量。

关键词：丹参胶囊；质量标准；色谱法

丹参胶囊的原料为单味丹参药材，经水提工艺之后，得到酚酸类化合物，即丹酚酸B、原儿茶酚以及丹参素等成分，经醇提工艺之后，得到二萜醌类化合物，即隐丹参酮以及丹参酮ⅡA等成分。为建立简便、可行的丹参胶囊检查、鉴别、含量测定、质量控制标准，确保丹参胶囊有效成分具有良好的可靠性、稳定性，现对丹参胶囊的质量标准进行研究，具体报告如下：

1.仪器与试药

1.1仪器

美国安捷伦公司生产的色谱工作站、高效液相色谱仪（1260型）；德国赛多利斯生产的电子天平（BP211D型）；上海科导超声仪器有限公司生产的超声波清洗器（SK5200H型），功率为200瓦，频率为53千赫兹。

1.2试药

海南赛立克药业有限公司提供3种不同批号（110401、110701、110901）的丹参胶囊进行检查与鉴别试验，3种不同批号（120901、120902、120903）的丹参胶囊进行含量测定实验；中国食品药品检定研究院提供丹参对照药材、丹参酮ⅡA对照品以及丹酚酸B对照品；贵州迪大生物有限公司提供隐丹参酮、原儿茶酚以及丹参素对照品。

2.丹参酮ⅡA定性鉴别

对于丹参胶囊的内容物，采用TLC鉴别法开展丹参酮ⅡA定性鉴别。①供试品溶液的制备。3批丹参胶囊各取10粒，并对其内容物进行研细、混匀，之后加入20毫升乙醚，将其放到具塞试管中，静置1个小时，滤过、挥干滤液，得到残渣之后加入1毫升乙酸乙酯，使其溶解，得到供试品溶液[1]；②对照药材溶液的制备。另取1克丹参对照药材，制备对照药材溶液，方法同①；③对照品溶液的制备。取取丹参酮ⅡA对照品，之后加入乙酸乙酯，得到浓度为2毫克每毫升的对照品溶液；④各取5微克供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液，分别点于一硅胶G薄层板上，展开剂取环己烷、乙酸乙酯混合液（比例为6：1），展开，之后取出、晾干；⑤供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

3.成分含量测定

3.1色谱条件

首先，色谱条件。①色谱柱：C18，250毫米×4.6毫米，5微米；②柱温：35摄氏度；③丹参酮ⅡA：流动相为甲醇-水，比例为75：25，检测波长为270纳米，按丹参酮ⅡA峰进行计算，理论板数应≥2000；④丹酚酸B：流动相为甲醇-乙腈-冰醋酸-水，比例为30：10：1：59，检测波长为286纳米，按丹酚酸B峰进行计算，理论板数应≥4000；⑤隐丹参酮：流动相为乙腈-水，比例为80：20，检测波长为263纳米，按隐丹参酮峰进行计算，理论板数应≥2000；⑥原儿茶酚：流动相为0.5%冰醋酸-甲醇，比例为88：12，检测波长为280纳米，按原儿茶酚峰进行计算，理论板数应≥6000；⑦丹参素：流动相为0.5%冰醋酸-甲醇，比例为88：12，检测波长为280纳米，按丹参素峰进行计算，理论板数应≥2000。⑧上述进样量均为20微升，流速为1毫升每分钟。

3.2线性关系检查

分别配备丹参酮ⅡA、丹酚酸B、隐丹参酮、原儿茶酚以及丹参素的对照品贮备液，质量浓度分别为：204.6、60.102、59.25、123.48、459.582微克每毫升，之后再利用各自的测试液进样测定，并将色谱峰面积记录下来。分别以峰面积、对照品的质量浓度为根据，绘制出标准曲线，之后再进行线性回归，得到线性回归方程。结果发现，发现其线性范围分别为2.05至40.92、1.503至60.102、1.482至59.29、0.617至24.696、11.49至459.58微克每毫升，且有良好的线性关系，r=0.999。

3.3重复性实验

选择使用120901批号的丹参胶囊进行重复性实验，平行取样品，每个6份，之后将其制成丹参酮ⅡA、丹酚酸B、隐丹参酮、原儿茶酚以及丹参素供试品溶液，之后再连续地进行进样测定，并将其含量计算出来。结果发现，丹参酮ⅡA：RSD=0.85%；丹酚酸B：RSD=0.89%；隐丹参酮：RSD=0.88%；原儿茶酚：RSD=0.92%；丹参素：RSD=0.82%。

3.4样品含量测定

取3种批号的丹参胶囊，制备成供试品溶液之后，根据3.1中的对应色谱条件对丹参酮ⅡA、丹酚酸B、隐丹参酮、原儿茶酚以及丹参素的含量进行测定，并使用外标法进行计算，得出平均值。结果如下：批号120901，丹参酮ⅡA为0.241±0.023，隐丹参酮0.150±0.009，丹酚酸B为5.076±0.830，丹参素0.525±0.013，原儿茶酚0.018697±0.000686；批号120902，丹参酮ⅡA为0.249±0.035，隐丹参酮0.150±0.021，丹酚酸B为5.189±0.751，丹参素0.526±0.028，原儿茶酚0.018550±0.000475；批号120903，丹参酮ⅡA位0.258±0.048，隐丹参酮0.157±0.018，丹酚酸B为5.637±0.955，丹参素0.529±0.015，原儿茶酚0.019682±0.000856.

4.讨论

丹参胶囊主要由丹参酮ⅡA、丹酚酸B、隐丹参酮、原儿茶酚以及丹参素5种成分组成，其功能为活血化瘀，临床常用于治疗心绞痛、冠心病等。丹参胶囊中，含有脂溶性成分以及水溶性成分，其中脂溶性成分以丹参酮为主，水溶性成分以酚酸为主。经过含量测定发现，丹参胶囊中丹参酮ⅡA以及丹酚酸B的含量较高，其中，丹参酮ⅡA为药材的0.1%到0.9%左右，丹酚酸B为药材的2%到8%左右，是丹参胶囊质量评价最主要的指标。

以丹参单味药材所开发的复方制剂以及以丹参为主药所开发的复方制剂，剂型多达十几种，例如丹参胶囊、丹参片、丹参滴丸、丹参注射液、香丹注射液等，这种制剂临床上广泛应用于对心、脑血管疾病的治疗中。但就现阶段来说，关于丹参制剂的质量标准仍旧存在着一些争议。目前已有的研究文献中，主要是针对剂型不同、生产工艺不同、提取方法不同的产品，围绕着脂溶性菲醌类、水溶性酚酸类2类活性成分进行质量标准研究。

本研究中，将丹参胶囊作为对象，应用薄层色谱法对丹参酮ⅡA进行定性分析，应用HPLC法测定丹参胶囊五种主要成分的含量，即丹参酮ⅡA、丹酚酸B、隐丹参酮、原儿茶酚以及丹参素。结果表明，除了原儿茶酚的含量比较低之外，丹参酮ⅡA、丹酚酸B、隐丹参酮以及丹参素的含量相对来说均比较高。

总之，建立丹参胶囊的检查、鉴别、含量测定标准，可重复应用、简便、准确性高，可用于控制丹参胶囊的质量。

参考文献：

[1]任萃文，杨晶.丹参舒心宁胶囊质量标准研究[J].中国现代中药，2013，06：507-509.