芍药甘草复方效应组分谱效关系研究

芍药甘草复方效应组分谱效关系研究

史美耿1石海云2

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（1南京美峰医药科技有限公司江苏南京210000）

（2南京宇道科技开发有限公司江苏南京210002）

【摘要】目的：以芍药甘草复方为例，探讨谱效关系应用价值。方法：取合适SD大鼠分组，随机分组，每组5只，分别以芍药苷效应组分A（0.3、0.6、1.2g/kg）、甘草酸效应组分B（0.3、0.6、1.2g/kg）、甘草总黄酮效应组C（0.6、1.2、2.4g/kg）分，进行配比，灌胃，共17组，另取2组各5只，分别以阿托品、生理盐水灌胃，计算药剂对胃底肌条抑制率制。结果：A3B3C3配伍抑制率最高，达到（35.83±5.73）%；芍药苷效应组分、甘草总黄酮配比与抑制率方差分析，差异具有统计学（P＜0.05），重复试验平均抑制率（36.43±7.19）%。结论：谱效关系以色谱峰获取体内活性物质与药效进行相关性分析，具有极高的应用价值。

【关键词】中医药；谱效关系；芍药；甘草；效应组分

【中图分类号】R28【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2015）23-0317-02

指纹图谱与药效的相关性研究，即谱效研究，是开展中药质控研究工作的重要方法[1]。本次研究试分析芍药甘草复方效应组分谱效关系，为开展芍药甘草复方质控研究提供借鉴。

1.材料与方法

1.1实验动物

随机取体重在（275±25）g范围内，8周龄，SD雄性大鼠。

1.2药物与试剂

芍药苷效应组分，含芍药苷44%，甘草酸效应组分，含甘草酸50.0%，甘草总黄酮效应组分，甘草总黄酮含量以甘草苷计52.0%，自行配置。乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

1.3方法

自由饮水，随机分组，每组5只。分别以芍药苷效应组分（0.3、0.6、1.2g/kg）、甘草酸效应组分（0.3、0.6、1.2g/kg）、甘草总黄酮效应组（0.6、1.2、2.4g/kg）分，进行配比，灌胃，共27组。另选5只大鼠给予生理盐水、阿托品灌胃。连续给药5d，禁食，不禁水，末次给药120min后，敲昏大鼠，腹主动脉取血，处理备用。取大鼠胃底肌条，制备胃底肌条收缩模型，计算药物对胃底肌条抑制率。重复性实验。以最佳配比灌胃大鼠血液样本血清，进行HPLC指纹图谱测定，最后进行HPLC谱峰、活性成分配比与药效双变量分析。

1.4色谱条件

ThermoTMＣ18柱(4.6mm×250mm,5μm)，流动相：A(乙腈),B(0.05%三氟乙酸)进行梯度洗脱，运行时间90min；0～5min，15%A；5～7min，15%A～25%A；7～27min，25%A；27～29min，25%A～50%A；29～59min，50%A；59～61min，50%A～75%A；61～90min，75%A。流速1.0mL?min-1，柱温30℃，检测波长232nm，进样量20μL。

1.5统计学处理

计量资料以均数±标准差（x-±s）表示，组间比较采用t检验，相关性分析采用双变量检验，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2.结果

2.1最佳配比

生理盐水对照组抑制率为（2.28±3.10）%，A1B1C1抑制率为（13.11±3.42）%，A2B1C1（16.83±5.50）%、A3B1C1（25.43±5.58）%、A1B2C1（33.22±8.42）%、A1B3C1（22.74±8.91）%、A1B1C2（22.58±7.36）%、A1B1C3（22.85±7.94）%、A2B2C1（22.89±8.43）%、A1B2C2（28.48±5.83）%、A2B1C2（22.8±7.34）%、A2B2C2（25.31±7.17）%、A3B2B2（28.42±5.71）%、A2B3C2（31.24±5.28）%、A3B3CBC3（28.47±5.26）%、A2B3C3（29.55±5.14）%、A3B2C3（31.15±5.58）%、A3B3C3（35.83±5.73）%。其中A3B3C3配伍抑制率最高。以三类有效成分配比为自变量，以抑制率为因变量，进行方差分析，结果显示芍药苷效应组分、甘草总黄酮配比与抑制率方差分析，差异具有统计学（F=84.322，P=0.03＜0.05）、（F=24.38，P=0.04）。在最佳配比（1:1:2）配比情况下，理论上剂量水平越高，抑制率越高。进行重复性实验5次，最佳配比条件下，抑制率均值为（36.43±7.19）%，标准差/均值=19.74%＜20%，稳定性较好。

2.2谱效相关性分析

HPLC色谱图分析各血清特征峰与药效相关性分析，见下表1。

表1各时间段最佳配比血清特征峰与药效相关系数

t/min4.568.4310.4812.5315.6720.4325.9485.4

r00.7740.00-0.680.03-0.830.18-0.30

3.讨论

研究显示，组内芍药苷效应组分、甘草酸效应组分、甘草总黄酮组分最佳配比为1:1:2，且理论上剂量水平越高，药效越明显。色谱分析不仅有助于寻找最佳的复方组成构成，还有助于识别组分色谱与药效的关系，以色谱峰获取体内活性物质与药效进行相关性分析，可用于活性物质药理学分析，具有极高的应用价值[2]。

【参考文献】

[1]邓书鸿,聂磊.中药谱效关系的分析方法及数据处理技术研究进展[J].中药材，2010，33(11):1819-1823.

[2]秦昆明，郑礼娟，沈保家等.谱效关系在中药研究中的应用及相关思考[J].中国中药杂志，2013，38(1):26-29.