胶体金免疫层析法与ELISA法检测HBsAg在无偿献血筛查中的应用分析

胶体金免疫层析法与ELISA法检测HBsAg在无偿献血筛查中的应用分析

罗宏新张起魏恩钲邓超

三明市中心血站福建三明365000

【摘要】目的：分析无偿献血者健康筛查过程中运用胶体金法与ELISA检查乙肝病毒HBsAg的临床应用价值。方法：采用HBsAg金标快速试纸对献血前献血者进行初筛，ELISA法对捐献血液进行复检，初筛阴性而两遍ELISA法检测阳性标本用金标快速试剂复试。结果：胶体金法有34例阳性患者漏检，漏检率为0.86‰，比较两种检测方法阳性检出率，有明显差异，p＜0.05。同时计算2种HBsAg检测方式阳性结果符合率为98.63%。结论：ELISA法较胶体金法在检测HBsAg中具有较高的特异性与敏感性，但是胶体金法操作简单，反应时间短，更加适应于临床急症手术前与无偿献血者筛查中HBsAg病毒的检测。

【关键词】无偿献血者；ELISA；’胶体金免疫层析法；HBsAg

我国是乙型肝炎高发区，乙型肝炎表面抗原（HB-sAg）携带者达10%左右，无偿献血者献血前应筛查HBsAg，以减少HBsAg阳性血液的采集，降低血液报废率，减少受血者和工作人员医源性感染的风险。临床常采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HBsAg，但是由于此种检测方法需要的时间长、还需采集静脉血，不适用于献血者献血前的HBsAg检测[1]。近年来，由于胶体金免疫层析法（胶体金法）检测HBsAg时，操作简便快捷、即采即测，同时试剂稳定，对HBsAg特异性高而被临床实验室广泛运用。本文为研究在无偿献血者健康筛查过程中运用胶体金法与ELISA检查乙肝病毒HBsAg的临床应用价值，特收集2013年1月至2014年12月我站无偿献血者血液样本39740份进行研究，现报告如下：

1.材料与方法

1.1标本来源

2013年1月至2014年12月我站无偿献血者血液标本39740份，年龄18-55周岁。

1.2试剂与仪器

胶体金试剂盒是由厦门英科新创科技有限公司提供，ELISA试剂盒由厦门英科新创科技公司和上海梅里埃生物工程有限公司提供，所有试剂均在使用有效期限内。加样仪器：迪肯RSP150全自动样本处理系统，后处理：BEPⅢ酶免全自动处理系统

1.3方法

留取献血者静脉血进行胶体金法与两遍ELISA检测HBsAg，对检测结果进行统计分析。胶体金法与ELISA按试剂说明书操作

1.4结果分析

采用SPSS17.0系统对所有数据进行处理，配对设计的X2检验，p<0.05时，具差异统计学意义。

2.结果

2.1据表1数据显示，39740份无偿献血者血液样本经胶体金法检测HBsAg，其中有2306份血液样本检测结果显示为阳性，阳性测试率为5.80%（2306/39740），其余37434份血液样本测试结果为阴性，经ELISA法检测HBsAg，2338份血清样本测试结果为阳性，阳性检测率为5.88%（2338/39740），其中胶体金法检出的无偿献血者血液样本阳性人员，ELISA法检测其血清样本结果同为阳性，胶体金法有34例漏检，漏检率为0.86‰（34/39740），比较两种检测方法阳性检出率，存在明显差异，p＜0.05。同时计算2种HBsAg检测方式阳性结果符合率为98.63%（2304/2338），其余1.45%（34/2338）为胶体金法的假阴性检出率，阴性检出率的符合率为99.91%（37402/37434）。

3.讨论

有效检出乙肝病毒血清学标志物HBsAg是目前判断临床肝炎分型、传染性以及患者病情的重要依据，及时检出HBsAg并对其携带者进行有效治疗对于临床控制乙肝病情的发展及传播具有重大意义，临床常用胶体金法与ELISA法检测HBsAg[2]。

胶体金试剂是为定性检测血液样本中存在HBsAg的一类试剂，其不能检测血液中乙肝病毒的含量，由于操作简单，短时间内确定血液样本中是否存在乙肝病毒，所以更适用于临床急症手术前与无偿献血者筛查中HBsAg病毒的检测[3]。ELISA法能够灵敏检出血清中HBsAg，特异性高。本实验结果显示胶体金法检测HBsAg，其中有2306份血液样本检测结果显示为阳性，阳性测试率为5.80%（2306/39740），其余37434份血液样本测试结果为阴性，经ELISA法检测HBsAg，2338份血清样本测试结果为阳性，阳性检测率为5.88%（2338/39740），阳性检出率存在明显差异，（P＜0.05），但2种HBsAg检测方式阳性结果符合率为98.63%，胶体金试剂具有较高的特异性。在胶体金与ELISA法检测中，HBsAg阳性率明显低于福建HBsAg携带者阳性率，原因有可能是一些HBsAg携带者在献血前的问询中主动放弃献血所致。

同时运用胶体金法HBsAg有34例阳性标本漏检，漏检率为0.86‰（34/39740），分析引起假阴性结果的原因，主要由以下几个方面：⑴气候与温度的影响：气候干燥，环境温度过低时，容易引起血样样本与乳胶颗粒复合物反应时间增长，所以环境温度过低或过高，湿度多大或过小均会影响结果的判定[4]。⑵反应时间的影响：胶体金法可以迅速筛选出强阳性或阳性样本，但是对于弱阳性样本的HBsAg检测需要较长时间，在试剂所规定的10分钟内还未能显示阳性结果，容易漏掉大多数的弱阳性样本，增加漏检率[5]。⑶加样量的影响：无偿献血时一般采用指端末梢静脉针刺取血检测HBsAg，取血量难以控制，对于强阳性样本，取血量少于试剂盒要求也能检出结果，但是对于弱阳性样本反应时间会相对延长，取血量一旦不足会严重影响HBsAg的检出结果。⑷胶体金法的检测灵敏度低于ELISA法。

综上所述，胶体金法与ELISA法检测HBsAg相比，ELISA法具有较高的特异性与敏感性，但是胶体金法操作简便，反应时间短，更加适用于献血者的献血前筛查。

参考文献：

[1]高海锋，陶焕荣，胡莉莉等.2种方法在HBsAg检测中的评价[J].国际检验医学杂志，2011，32（16）：1863-1864.

[2]洪玲.金标法和ELISA法在无偿献血者中检测HBsAg的比较[J].现代医药卫生，2007，23（10）：1431-1433.

[3]王希敏，郑东旭.两种方法检测HBsAg的效果评价[J].海南医学，2008，19（3）：129-130.

[4]邢培清，温涛，方建华等.胶体金免疫层析法检测HBsAg在无偿献血中的应用研究[J].河南医学研究，2003，12（1）：17-19.

[5]许美凤.胶体金免疫层析法检测乙型肝炎表面抗原效果分析[J].海峡预防医学杂志，2004，10（6）：43-43.